液基薄层细胞学检测联合人乳头瘤病毒基因分型检测在宫颈病变筛查中应用价值评估

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1、液基薄层细胞学检测联合人乳头瘤病毒基因分型检测在宫颈病变筛查中应用价值评估　　【摘要】目的：探讨液基薄层细胞学检测（TCT）联合人乳头瘤病毒（HPV）基因分型检测在宫颈病变筛查中的作用。方法：2012年6月至12月，对我院432名TCT、高危型HPV检查阳性及临床怀疑宫颈有病变的患者行阴道镜下取宫颈活检，并对资料进行分析。结果：432名患者中病理检查异常者为68例（阳性率15.74%）；行TCT检查异常者为80例（阳性率18.51%），其中病理学异常者45例，占总病理学异常患者的66.17%；行高危

2、型HPV-DNA检测阳性者为116例（阳性率26.85%），其中病理学异常者53例，占总病理学异常患者的77.94%；68例病理异常的患者中，TCT联合高危型HPV检查阳性病例为58例，检出率为85.29%。TCT检出率与联合检查的检出率进行统计学分析，差异具有统计学意义（χ2=6.762，P=0.0092）。HPV检出率与联合检查的检出率进行统计学分析，差异具有统计学意义（χ2=4.917，7P=0.027）。TCT和HPV-DNA检查的阳性率随宫颈病变严重程度的增高而升高。结论：TCT联合HPV

3、基因分型检测可提高宫颈病变检出率，为宫颈病变的早期诊断提供重要的参考依据。定期进行TCT及HPV筛查，不仅可以降低HPV感染发病率，减少宫颈病变发病率，也可以防止宫颈癌的发生。【关键词】TCT技术；HPV分型；宫颈病变宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，发病率位居第二，仅次于乳腺癌。近年来宫颈癌的发病率有明显的年轻化趋势，每年新发病例中80%发生在发展中国家。而高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）持续感染是宫颈癌的明确病因[1，2]。从宫颈上皮内瘤变发展为原位癌平均需要10～20年，其发生和发展经

4、历了较长的演变过程。宫颈上皮内瘤变分为3级即CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ，级别越高，越容易发展为宫颈浸润癌。因此，早期发现及治疗癌前病变以阻断宫颈癌的发生尤为关键，而行之有效的筛查成为发现宫颈癌前病变，阻断、降低宫颈癌发生的重要环节[3，4]。有效的诊断是临床的首要因素，但在临床检查诊断的过程中，目前临床上常用超薄液基细胞技术筛查宫颈病变，但单独使用液基薄层细胞学检测（TCT）或人乳头瘤病毒（HPV）基因分型检测容易漏诊或误诊，其准确性较低。本研究通过对存在宫颈病变的患者同时进行TCT联合HPV分型

5、检测，尤其是高危型HPV检测进行筛查，探讨这两种方法在诊断宫颈病变中的应用价值，为妇女宫颈病变的早期发现、早期干预以阻断进一步癌变提供帮助。1资料与方法71.1一般资料选择2012年6月至12月来我院就诊，存在宫颈异常的患者432例，同时用TCT联合HPV基因分型检测，对结果阳性及临床怀疑宫颈有病变的患者行阴道镜下取宫颈活检，以病理组织学为金标准，并对资料进行分析。患者年龄19～68岁，平均年龄（34.3±6.5）岁，均有性生活史。1.2方法1.2.1TCT检测检查时间选取患者非月经期，且近3d无阴

6、道冲洗或放药，24h内无性生活，使用专用取样刷对宫颈可疑的病变区域进行采样，将可以分离的采集器刷头置于保存液之中，采用新柏式2000全自动制片机进行程序化处理。按照2001年国际癌症协会（NCI）推荐的TBS分级标准进行阅片，对细胞改变的诊断包括：良性细胞改变（NILM）、不能意义的非典型鳞状上皮细胞（AS-CUS）、低度鳞状上皮内病变（LSIL）、高度鳞状上皮内病变（HSIL）、鳞状细胞癌（SCC）和腺癌，其中细胞学异常是指ASCUS及以上病变。71.2.2HPV-DNA基因分型检测用HPV基因分

7、型检测试剂盒（PCR-反向点杂交法），应用DNA反向斑点杂交技术，结合专业数码凝胶成像与分析系统，通过P值（积分光密度差值）检测判断中国人群中广泛分布的19种HPV基因型别[5]，其中包括16种与宫颈癌密切相关的高危型别（16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、亚型CP8304型）及3种低危型别（6、11、43型）。本研究只计算HPV-DNA检测结果为高危型的患者。1.2.3宫颈病理活检用SLC-2000阴道镜对宫颈进行观察，并做醋酸白试验和碘试验，

8、对可疑部位进行多点活检，对阴道镜下无异常时则取3点、6点、9点、12点处组织，将标本用甲醛固定后送病理科经同一病理医生进行诊断。宫颈病理结果按级别分为宫颈炎（NILM）、宫颈轻度上皮内瘤变（CINI）、宫颈中度上皮内瘤变（CINⅡ）、宫颈重度上皮内瘤变（CINⅢ）、宫颈鳞状细胞癌（SCC）。其中CINI即TCT标准的LSIL，CINII、CINⅢ即TCT标准的HSIL。1.3统计学方法应用SPSS14.0软件对数据进行处理，采用χ2检验，P　　参考文献[1]Pimpl