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1、进入夏天,少不了一个热字当头,电扇空调陆续登场,每逢此时,总会想起那一把蒲扇。蒲扇,是记忆中的农村,夏季经常用的一件物品。 记忆中的故乡,每逢进入夏天,集市上最常见的便是蒲扇、凉席,不论男女老少,个个手持一把,忽闪忽闪个不停,嘴里叨叨着“怎么这么热”,于是三五成群,聚在大树下,或站着,或随即坐在石头上,手持那把扇子,边唠嗑边乘凉。孩子们却在周围跑跑跳跳,热得满头大汗,不时听到“强子,别跑了,快来我给你扇扇”。孩子们才不听这一套,跑个没完,直到累气喘吁吁,这才一跑一踮地围过了,这时母亲总是,好似生气的样子,边
2、扇边训,“你看热的,跑什么?”此时这把蒲扇,是那么凉快,那么的温馨幸福,有母亲的味道! 蒲扇是中国传统工艺品,在我国已有三千年多年的历史。取材于棕榈树,制作简单,方便携带,且蒲扇的表面光滑,因而,古人常会在上面作画。古有棕扇、葵扇、蒲扇、蕉扇诸名,实即今日的蒲扇,江浙称之为芭蕉扇。六七十年代,人们最常用的就是这种,似圆非圆,轻巧又便宜的蒲扇。 蒲扇流传至今,我的记忆中,它跨越了半个世纪,也走过了我们的半个人生的轨迹,携带着特有的念想,一年年,一天天,流向长长的时间隧道,袅凝胶过滤层析简介.content凝
3、胶过滤的基本原理凝胶分类与性质凝胶过滤的基本操作凝胶过滤层析的应用凝胶过滤层析技术Services凝胶过滤法又称为分子筛层析、凝胶层析或排阻层析,是利用凝胶的网状结构根据分子大小进行分离的一种方法。凝胶过滤所用的介质是由交联葡萄糖、琼脂糖或聚丙烯酰胺形成的凝胶珠。凝胶珠的内部是多孔的网状结构。单个凝胶珠本身象“筛子”,不同类型凝胶的筛孔的大小不同。
4、基本原理原理分子洗脱体积分配系数Services
5、基本原理最先流出物质A,A分子量最大,完全不能进入颗粒内部,只能从颗粒间隙流过,“全排阻”。其洗脱体积最小,等于
6、外水体积V0。最后流出物质C,它分子量最小,其分子可以自由进出凝胶颗粒,“全渗入”。洗脱体积是外水体积与内水体积之和V0+Vi。物质B分子量介于渗入限与排阻限之间,其分子能够部分地进入凝胶颗粒中。“部分排阻”或“部分渗入”。洗脱体积Ve是全部外水体积加上内水体积的一部分,即Ve=V0+KdVi分配系数原理洗脱体积分子分子分子洗脱体积原理Services分配系数
7、基本原理当Kd=1时,洗脱体积Ve=V0+Vi,为全渗入。当Kd=0时,洗脱体积Ve=V0,为全排阻。0<Kd<1时,洗脱体积Ve=Vo+KdVi,为
8、部分渗入。分配系数Kd分配系数是指某个组分在固定相中和流动相中的浓度比,对于凝胶过滤,分配系数表示组分在内水体积和在外水体积中的浓度分配关系Kd=对于某一型号的凝胶,在一定分子范围内,各个组分的Kd与其分子量对数呈线性关系测定分子量凝胶含大量液体的具三维网状开孔弹性结构的多聚体结构,一般制成球状颗粒。
9、分类与性质性能多孔、亲水、惰性、稳定、色谱性能好凝胶分类性质凝胶凝胶分类性质
10、分类与性质葡聚糖凝胶(Sephadex)结构稳定性色谱性
11、分类与性质聚丙烯酰胺(Bio-Gelp-x)凝胶凝胶分类性质结构稳定性色谱
12、性
13、分类与性质交联丙烯基葡萄糖(Sephacryl)凝胶凝胶分类性质结构稳定性色谱性
14、分类与性质琼脂糖凝胶(Sepharose)结构制备色谱性产品名因生产厂家不同而异稳定性凝胶凝胶分类性质
15、分类与性质交联琼脂糖(Sepharose)凝胶凝胶分类性质结构稳定性色谱性
16、分类与性质新型凝胶superosesuperdex凝胶凝胶分类性质
17、基本操作凝胶的选择凝胶的处理选择适宜的凝胶是取得良好分离效果的最根本的保证。选取何种凝胶及其型号、粒度。凝胶的性质分离目的和样品的性质对生物样品来说,经常遇到的是两种分离形式类分离
18、——将分子量极为悬殊的两类物质分开,如蛋白质与盐类分级分离——将分子量相差不很大的大分子物质加以分离,如分离血清球蛋白与白蛋白后者对实验条件和操作要求都比较高(1)使大分子的分配系数Kd=0;(2)小分子的Kd=1。(1)使各种物质的Kd值尽可能相差大。(2)不使分子量分布在凝胶分离范围的一侧。(3)分子量大于渗入限的3倍,并小于排阻限的1/3。细粒凝胶柱流速低,洗脱峰窄,分辨率高,用于精制分离或分析。粗粒凝胶柱流速高,洗脱峰平坦,分辨率低,用于粗制分离,脱盐。干凝胶加入5、10倍的蒸馏水→充分浸泡→去小颗粒
19、→用0.5mol/LNaoH—0.5mol/LNaCl溶液浸泡0.5h→去碱液→蒸馏水洗至中性除去凝胶中的气泡的方法抽气加热煮沸注意点:避免置于酸或碱溶液中加热凝胶层析柱加样洗脱再生保存
20、基本操作柱的选择柱的装填同样直径的层析柱长层析柱比短的分辨率高;同样长度的层析柱直径大的比小的分辨率高;同样体积的层析柱层析柱长的比短的分辨率高。理想的层析柱直径与长度之比是1:25-1:100常用的支持物有棉花、