基因敲除对黄酒酵母高级醇生成量的影响论文

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1、基因敲除对黄酒酵母高级醇生成量的影响毕业论文目录1前言11.1黄酒概述11.2黄酒风味物质概述11.2.1高级醇对黄酒风味的影响21.2.2酯类对黄酒风味的影响31.2.3其他类物质对黄酒风味的影响31.3黄酒发酵过程中高级醇的形成与控制31.3.1高级醇的形成机理31.3.2影响黄酒中高级醇含量的主要因素61.3.3降低黄酒中高级醇含量的主要措施71.4低产高级醇酵母菌株的研究进展81.4.1诱变育种81.4.2细胞融合育种91.4.3基因工程育种91.5本课题的立题依据及研究内容101.5.1本课题的立体依据101.5.2本课题的主要研究内容112材料与方法132.1材料与仪器132.1

2、.1主要试剂132.1.2主要实验仪器142.1.3菌种与质粒152.1.4主要培养基152.1.5主要溶液162.2分析方法172.2.1CO2失重的测定172.2.2酒精度的测定172.2.3还原糖的测定17632.2.4挥发性风味物质含量的测定182.2.5生长曲线的测定182.3实验方法192.3.1引物设计192.3.2各目的基因片段的获得212.3.3重组质粒的构建232.3.4酵母转化252.3.5G418抗性基因的去除262.3.6黄酒发酵实验263结果与讨论283.1BAT1基因敲除对黄酒酵母高级醇生成量的影响283.1.1BAT1基因的验证283.1.2重组质粒pUC-B

3、ABK的构建283.1.3BAT1基因敲除突变株的获得及验证303.1.4BAT1基因敲除对黄酒酵母高级醇生成量的影响323.1.5小结与讨论333.2BAT1、BAT2基因双敲除对黄酒酵母高级醇生成量的影响333.2.1BAT1、BAT2基因双敲除突变株的获得及验证333.2.2突变株与出发菌株生长性能的比较343.2.3BAT1、BAT2基因双敲除对黄酒酵母高级醇生成量的影响353.2.4小结与讨论363.3HOM2基因一个等位基因敲除对黄酒酵母高级醇生成量的影响373.3.1HOM2基因的验证373.3.2重组质粒pUC-HABK的构建383.3.3HOM2基因一个等位基因敲除的突变株

4、的获得及验证403.3.4HOM2基因一个等位基因敲除对黄酒酵母高级醇生成量的影响413.3.5遗传标记基因KanMX的去除423.3.6小结与讨论443.4HOM2基因两个等位基因敲除对黄酒酵母高级醇生成量的影响443.4.1重组质粒pUC-HB1A1K的构建443.4.2HOM2基因两个等位基因敲除的突变株的获得及验证473.4.3突变株与出发菌株生长性能的比较483.4.4HOM2基因两个等位基因敲除对黄酒酵母高级醇生成量的影响493.4.5小结与讨论504结论515展望52636参考文献537攻读硕士学位期间发表论文情况588致谢591前言1.1黄酒概述黄酒是我国的民族特产，至今已经

5、有6、7千年的历史，与啤酒、葡萄酒并称为世界上三大最古老的酿造酒[1]。黄酒由于具有悠久的历史、丰富的营养、独特的风味、酒精度低等特点[2]，所以受到广大人民群众的喜爱。黄酒是以谷物为主要原料酿制成的粮食酒，它不同于白酒，黄酒是没有经过蒸馏的，酒精含量较低。黄酒是一种高营养性的饮料酒，所以又被誉为“液体蛋糕”。黄酒中富含的营养物质有氨基酸、糖、肽等，其中黄酒中的氨基酸不仅种类高达20种之多，而且其含量非常丰富，其中人体必需的8种氨基酸含量，居酿造酒之首。黄酒中还含有丰富的人体所必需的微量元素、有机酸和各种维生素[3-4]。黄酒除了直接饮用外，还可以入药，也可以入馔来去腥增香。黄酒是传统的养生

6、保健佳品，目前的初步研究已经表明，黄酒具有抗衰老、抗氧化、降胆固醇、降血压、参与机体的代谢活动和免疫调节等功效[5-6]。黄酒是一种集饮用与保健为一体的酿造酒，是我国重点发展和扶植的饮料酒之一。我国从实行改革开放的政策以来，黄酒行业的发展速度较快。近年来，由于国家政策的支持、黄酒企业积极引导人们消费，从而黄酒行业的发展势头良好，且行业的整体规模也稳步扩大。2006年至2010年，我国的黄酒产量由63.8万千升增加至134.1万千升，合计增长110%，年平均复合增长率为20%。黄酒行业龙头骨干不断做大做强，发展迅速。2012年全国黄酒行业实现主营业务收入134.32亿元，同比增长12.89%；

7、利润总额为14.49亿元，同比增长7.33%；工业销售产值136.40亿元，同比增长18.42%。2013年1-8月，全国规模以上的黄酒企业销售额同比增加8%，利润增加19%左右，较其他酒种相对稳定。但是，目前仍存在着一些问题制约着黄酒行业的快速发展，如消费市场地域性限制没有突破导致市场拓展艰难、业内存在着无序竞争从而导致黄酒价值低估身价降低、传统观念影响从而导致创新能力不够以及过分强调传统的黄酒酿造技术从而