银杏叶提取物egb对ccl4肝损伤小鼠的mda含量以及sod活力的影响论文

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1、银杏叶提取物EGB对CCl4肝损伤小鼠的MDA含量以及SOD活力的影响毕业论文近几年来由于大量有害物质的产生,人们可能在不经意间,接触大量有害物质,例如CCL4,CCL4致急性中毒性肝炎、肝中毒四氯化碳进入肝细胞后,使线粒体膜的脂质溶解,从而影响线粒体的结构和功能,使酶蛋白质的合成减少,造成酶的破坏,因而影响代谢功能和能量的合成,致死。新观点认为细胞坏死的关键是由于四氯化碳抑制了细胞膜上钙泵活性,大量钙离子内流,堆积于细胞内的结果。此种动物模型可观察到急性肝炎的糖、脂肪、胞色素等方面的代谢障碍、肝解毒功能障碍,磺溴酚纳滞留血清,转氨酶明显升高,迅速出现营养不良、肝脂肪化变性及坏死

2、等形态学变化。肝小叶中央坏死和肝细胞脂肪变性是其主要病变。有一种阳性药联苯双酯,它是一种治疗肝炎的降酶药物,即可减轻因CCL4所致的肝脏损害,对CCL4所致的肝脏微粒体脂质过氧化,CCL4代谢为CO有抑制作用,对肝脏具有保护作用,虽治疗肝脏的药物很多,但效果不是很好。近几年国内外学者对银杏叶药理进行了大量的研究,银杏(Ginkgobiloba)系银杏科银杏属落叶乔木,为中生代孑遗的稀有物种,被称为被子植物的“活化石”是我国特有植物。20世纪以来,发现其主要药用成分为黄酮类和萜内酯类化合物。药理试验表明银杏黄酮类化合物有使冠状血管及其他血管扩张的作用。银杏黄酮有抗自由基、抑制脂质过

3、氧化作用。可直接清除02一、.OH一,捕捉脂化自由基、脂氧自由基和烷自由基等,通过对这些自由基起一种氢原子供用而终止自由基连锁反应链,从而阻止和抑制氧自由基反应和脂质过氧化的病理性加剧,减轻氧自由基和脂质过氧化损伤。推测EGB对肝损伤也有保护作用。本实验就是通过设计一系列的对比实验,研究EGB是否确实有此作用。1材料与方法1.1实验材料1.1.1药物1.1.1.1银杏叶提取物(黄铜类)江苏同源堂生物工程公司批号:老师帮填一下临用时用0.1%吐温—80,蒸馏水配制成10mg/kg,40,mg/kg,160mg/kg低中高三个浓度。1.1.1.2联苯双酯(15mg/丸)浙江医药股份有

4、限公司新昌制药厂批号:080603临用时用蒸馏水配制成0.12%混悬液取80丸*15mg/丸=120mg(120mg→100ml水=0.12%)1.1.1.3CCl4北京化工厂提供批号:080121临用前用大豆油制成0.1%的四氯化碳油溶液。1.1.2试剂ALT试剂盒批号:20100316;AST试剂盒批号:20100317;SOD试剂盒批号:20100317;MDA试剂盒批号:20100317,均为南京建成生物工程研究所生产。总蛋白测定试剂盒北京北化康泰临床试剂有限公司批号:200910281.1.3实验动物小白鼠清洁级昆明种♀♂兼用,体重24+2g,北京医学科学院实验动物研究

5、所提供,许可证号:SCXK(京)2004-00011.1.4仪器111.1.4.1电子称:ACS-A-JJ交直流电子计价秤,中航第一集团太原航空仪表有限公司生产。1.1.4.2721分光光度计,上海第三分析仪器厂生产。1.1.4.3.HH-60数显恒温搅拌水箱,苏州威尔实验用品有限公司生产。1.1.4.4FZQ-2型漩涡混合器,竞速泰县医疗器械厂1.1.4.5电子天平,BP310P德国赛多利斯生产。1.1.4.6离心机(KDC-1044低速离心机),科大创新股份有限公司中佳分公司生产。1.2实验分组与处理1.2.1分组1.2.1.1空白对照组1.2.1.20.1%吐温对照组1.2

6、.1.3模型对照组1.2.1.4联苯双酯阳性对照300mg/kg1.2.1.5银杏叶提取物低浓度10mg/kg1.2.1.6银杏叶提取物中浓度40mg/kg1.2.1.7银杏叶提取物高浓度160mg/kg1.2.2处理3月15日,随即分为七组后,灌胃给药(0.25ml/10g体重),空白对照组、模型组给予等量蒸馏水,吐温对照组给予等量吐温,连续灌胃七天,灌胃前称一次体重,灌胃后第二天再次称重,然后第四天三次称重,称重后,除空白对照组及吐温对照组外,各组动物均腹腔注射0.1%CCl4溶液10ml/kg(取CCl430µl→30ml大豆油),第七天灌胃给药后停食。16小时后解剖取出肝

7、脏、脾。1.3称肝脏、脾脱臼处死小鼠,剖取肝脏、脾称重。1.4肝组织中脂质过氧化指标及抗氧化活性的测定 1.4.1MDA含量测定方式MDA含量测定方式是在国内外众多测试方法的基础上改进的一种微量、快速、简便、准确、对操作人员健康无损害的测试方法。通过测试可反映出血清(浆)、乳汁等细胞外液、红细胞、白细胞、培养细胞以及各种动植物的细胞水平及亚细胞水平的脂质过氧化物的量。1.4.1.1丙二醛(MDA)的测定意义:机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸

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