杜仲叶中绿原酸的提取论文.doc

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1、杜仲叶中绿原酸的提取论文1器材与方法1.1材料与仪器杜仲叶，购于北京某地区，为初秋采集叶。绿原酸标准品（中国药品和生物制品鉴定所）；丙酮、正丁醇、冰乙酸均为分析纯（上海试剂公司）；实验用水为去离子水。Unic-2100型紫外可见光分光光度计（上海龙尼柯仪器有限公司）；RE-52AA型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；365nm紫外分析仪（上海科艺光学仪器厂）；SHZ-III循环水多用真空泵（上海亚荣生化仪器厂）。1.2方法1.2.1杜仲叶中绿原酸含量的测定采用纸层析-紫外分光光度法［15］。1.2.2提取单因素实验随机称取5g干燥的杜仲叶粉（

2、20目），置于250ml平底烧瓶中，采用不同的实验方法设计进行提取。改变提取条件以确定提取因素变化范围以及各因素的较佳值。每次提取液过滤，真空蒸发去除丙酮后，用去离子水定容至100ml，测定绿原酸的含量，并折算为每100g干叶中的提取得率。1.2.3正交实验设计在提取单因素实验的基础上，采用正交实验优化工艺条件。以丙酮浓度、浸提温度、浸提时间、料液比4个因素作为考察对象，每个因素选用3个水平。选用L9（34）表，并安排实验，优化工艺条件。2结果2.1丙酮浓度对提取率的影响在提取温度35℃，料液比1∶12，提取时间2h，丙酮浓度对绿原酸提取率的

3、影响见图1。由图1可以看出，当浓度低于40%时，随着丙酮浓度的增加，绿原酸的提取率升高，用40%丙酮的提取，其提取率最高。随后，绿原酸的提取率随丙酮的浓度的升高而降低。2.2温度对提取率的影响不同提取温度对绿原酸提取率的影响见图2。从图2可以看出，随着提取温度的升高，其提取率增加，当温度高于55℃4学海无涯时，不再增加。这是由于温度升高，分子运动加快，有利于分子的扩散，有利于活性物质的溶出；当温度过高时，丙酮气化，不利于活性成分的析出，而且温度过高，杂质溶出量也相应增大，活性成分易分解破坏。2.3料液比对提取率的影响不同料液比对绿原酸提取率的

4、影响见图3。随着溶剂量的增加，浸提效果也随之增高，但提高幅度减小。当料液比超1∶12时，它们的提取率无明显变化。料液比过大给后续蒸发工序造成困难，且成本增大，因此，料液比采用1∶12左右为宜。2.4提取时间对提取率的影响在提取液中，当植物材料细胞内外活性成分含量未达到平衡时，提取率随提取时间的延长而增加。一旦细胞内外浓度达到平衡，活性成分不再溶出。提取时间对绿原酸提取率的影响见图4。从图4可以看出，随着提取时间的增加，绿原酸的提取率不断提高，尤其是从1h延长到2h时，绿原酸提取率提高幅度较大，提取时间在2h和3h之间绿原酸提取率基本保持稳定趋

5、势。而提取时间在3h以后绿原酸提取得率呈现出缓慢上升趋势。2.5提取次数对提取率的影响在其它条件不变的情况下，提取次数对绿原酸提取率的影响见图5。从图5可以看出，提取次数多，绿原酸的提取率高。当提取次数超过两次时，提取率增加不明显。所以，提取次数以两次为好。2.6pH值对提取效果的影响在固定料液比1∶12，提取温度35℃，提取时间2h的情况下，用不同pH的40%丙酮提取，浸提剂pH对提取效果的影响见图6。从图6可以看出，对于绿原酸的提取，当pH值低于4时，随着pH值的增加提取率增加；当pH=4时，绿原酸的提取率达到最大；当pH值再增加时，提取

6、率下降。绿原酸是极性有机酸，在酸性介质中比较稳定，因此，绿原酸的提取，宜在酸性溶剂中进行。但是，无论是碱性溶剂提取还是酸性溶剂提取，都会影响废水的排放处理，从产业化和环境保护考虑，其均不宜在酸性或碱性溶剂中提取，宜在中性水溶液中进行，因此，pH值对提取率的影响在以后的工艺条件优化中不做考虑。4学海无涯2.7丙酮-水溶液提取绿原酸工艺条件的优化从以上单因素可知，杜仲叶绿原酸在提取过程中，受到浸提时间、温度、丙酮浓度和丙酮溶液用量等因素的影响。为探索最佳提取条件，在单因素的基础上，对上述4个因素分别取3个水平，采用L9（34）正交实验设计进行优化

7、，各因素和水平如表1。正交实验方案和结果见表2。各因素与绿原酸提取率的关系直观图见图7。表1影响绿原酸提取率的因素及水平数（略）表2绿原酸提取正交实验表L9（34）（略）对正交实验有关数据作极差分析，结果见表2。由表2可知，各因素对绿原酸提取率的影响程度依次为C＞A＞B＞C。在4个影响因素中，料液比、温度对提取率影响较大，其次是丙酮浓度，影响最小的是浸提时间。由图7表明，以绿原酸提取率为考察指标，依次最佳工艺条件是A3B2C2D3，各因素的最佳水平分别是：浸提温度65℃，浓度40%，料液比1∶12，浸提时间3h。说明绿原酸提取率明显受到温度的

8、影响，因为升高温度，增加分子的热运动，使溶剂和叶粉分子间的传递加速，有利于绿原酸的浸出。但绿原酸为热敏性物质，温度过高，会造成绿原酸的分解，并引起丙酮汽化挥发损失。