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时间:2021-03-03
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1、麻栎体细胞胚胎发生与快速繁殖技术研究麻栎(QuercusacutissimaCarr.)既是重要的造林树种,也是经济价值很高的树种。本文综述了国内外栎属植物体胚发生和快速繁殖方面的研究现状,探索了麻栎快速繁殖技术新途径。以麻栎种子、成熟合子胚、幼苗茎叶组织和成年植株茎段为外植体,对麻栎体胚发生和快速繁殖技术进行了研究和探讨。成功获得了大量麻栎体胚,建立了麻栎体胚发生技术体系,为栎属植物体胚发生提供了重要参考。主要结论如下:(1)麻栎成熟合子胚体胚诱导最适培养基为MS+IBA(1.0mgL-1)+6-BA(1.0mgL-1)+
2、谷氨酰胺(1.0gL-1)+脯氨酸(0.5gL-1),诱导率达到70.0%;最适的成熟培养基为1/2MS+IBA(0.5mgL-1)+6-BA(2mgL-1)+ABA(2mgL-1)+谷氨酰胺(4gL-1)+脯氨酸(2gL-1);经4℃冷处理后,培养基1/2MS+6-BA(0.2mgL-1)+山梨醇(10gL-1)萌发效果最佳。(2)麻栎幼苗茎、叶外植体体胚诱导最适培养基为MS+TDZ(0.1mgL-1
3、sup>)+谷氨酰胺(1gL-1)+脯氨酸(0.6gL-1)+IBA(1.0mgL-1)+6-BA(1.0mgL-1);在1/2MS+6-BA(2.0mgL-1)+IBA(0.5mgL-1)+ABA(2mgL-1)+谷氨酰胺(4gL-1)+脯氨酸(2gL-1)培养基中,观察到体胚由白色或淡黄色逐渐转为绿色,呈颗粒球状,但没有观察到心形胚或鱼雷胚。(3)麻栎成熟植株茎段体胚诱
4、导最适培养基为MS+TDZ(0.1mgL-1)+谷氨酰胺(1gL-1)+脯氨酸(0.6gL-1)+IBA(0.5mgL-1)+6-BA(2.0mgL-1);最适成熟培养基为1/2MS+IBA(0.5mgL-1)+6-BA(2.0mgL-1)+ABA(2mgL-1)+谷氨酰胺(4gL-1)+脯氨酸(2gL-1);未见体胚萌发,可能由
5、于外植体存在生理老化现象。(4)麻栎体胚发生经历球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚阶段,成熟体胚和愈伤组织结合较松散,容易分离或自行脱落,分化出胚芽和胚根,独立形成完整小植株。观察结果表明,麻栎体胚具有明显的两极性和相对独立性,这两点完全符合判断体胚的两个重要特征。因此,本研究成功建立了麻栎体胚发生体系。(5)麻栎种子外植体芽增殖最适培养基为MS+IBA(0.1mgL-1)+6-BA(4.0mgL-1);壮苗培养基MS+IBA(0.1mgL-1)+水解酪蛋白(1.5gL-1<
6、/sup>)。麻栎幼苗茎段外植体最适芽诱导培养基为MS+IBA(1.0mgL-1)+6-BA(3.0mgL-1)。麻栎成熟茎段外植体最适芽诱导培养基为MS+IBA(1.0mgL-1)+6-BA(3.0mgL-1)。
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