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时间:2017-11-14
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1、鸡蛋清胶体破坏以及方案设计胶体的主要性质1布朗运动:胶体分散粒子做不停的,无秩序的运动。2丁达尔效应:光束通过胶体,形成光亮的“通路”的现象。3电泳现象:在电流的作用下,胶体粒子的定向移动。这说明溶胶粒子带同性电荷,如果电场中固相不动而液相流动,称为电渗析(Electro-osmosis)加入电解质:在胶体中加入电解质,这就增加了胶体中与胶粒电性相反的粒子的浓度,而给带电荷的胶体粒子创造了吸引相反电荷离子的有利条件,从而减少或中和原来胶粒所带电荷,使它们失去了保持稳定的因素。这时由于粒子的布朗运动,在相互碰撞时,就可以聚集起来,迅速沉降。胶体破坏的指标提取鸡蛋清中蛋白质的方
2、案设计三、材料、试剂与器具1、材料新鲜鸡蛋2、试剂饱和硫酸铵、硫酸铵结晶、生理盐水、1mg/mL标准牛血清白蛋白液3、器具紫外分光光度计、离心机、恒温水浴锅、冰箱、电子天平实验步骤(一)、鸡蛋清清蛋白的提取5mL鸡蛋清(20℃)+5mL生理盐水(20℃)稀释液(以减少共沉淀)逐滴加入10mL饱和硫酸铵溶液,边加边搅拌,饱和度为50%,然后静置10min3000r/min离心15min弃沉淀上清液,加入硫酸铵固体至不溶解为止静置10min3000r/min离心15min弃上清液沉淀10mL生理盐水(20℃)溶解用0.1mol/L醋酸调pH=4.6-4.8(卵清蛋白等电点)静置
3、10min3000r/min离心15min弃上清液沉淀(卵清蛋白晶体)5mL生理盐水(20℃)溶解(粗产品于20℃以下保存)紫外吸收法测定卵清蛋白的含量(1)标准曲线的绘制按下表分别向每支试管加入各种试剂,摇匀。在280nm波长处分别测定各管溶液的A280值。以A280值为纵坐标,蛋白质浓度为横坐标,绘制标准曲线。(2)蛋白提取液中蛋白质含量测定提取液分别稀释1倍、10倍、20倍后,取待测蛋白质溶液1ml,加入蒸馏水3ml,摇匀,按上述方法在280nm波长处测定光吸收值,并从标准曲线上查出经稀释的待测蛋白质的浓度超声波对提取的作用超声具有凝聚作用,当它作用于溶液体系,可以促
4、进传质过程,加快电解质离子与蛋白质周围的水化层的位置更换,离子很快取代水分子,从而使蛋白质的水化层被电解质离子取代,同时中和了蛋白质表面所带的部分电荷。这样,超声波加速蛋白质分子碰撞,使失去了水化层和电荷的蛋白质大分子,很容易絮凝析出
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