层析技术ppt(如何选择合适的极性)

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1、常用层析方法按分离原理分为:*吸附层析:利用吸附力的差别进行分离。*分配层析:利用二种不互溶的溶剂中分配比不同进行分离。*离子交换层析:利用阴阳离子的交换作用达到分离。*凝胶层析:利用分子量大小进行分离。*电泳:利用在同一电场的作用下泳动的方向和速度不同而分离。按分离形式分为:薄层层析(ThinLayerChromatography)普通TLC;高效TLC;制备TLC;离心TLC;柱层析(ColumnChromatography)普通CC;制备CC(快速CC;低压CC;中压CC;高压CC)电泳(Electrophoresis)纸电泳(PE);

2、毛细管电泳(CE)含水量%氧化铝的活性0I级3II级6III级10IV级15V级氧化铝的适用性*碱性氧化铝:应用于碳氢化合物的分离,以及中性、碱性物质的分离,不适用于酸性成分的分离。*中性氧化铝:属于碱性吸附剂范畴,对于分离碱性中草药成分颇为理想,使用范围最广泛,不适合于酸性成分的分离。*酸性氧化铝:表面常带有NO3-或Cl-,具有离子交换剂的性质,适合于酸性成分的层析。汉防己甲素汉防己乙素对甲氧基偶氮苯苏丹红含水量%硅胶的活性0I级5II级15III级25

3、IV级38V级硅胶的适用性能用于非极性化合物,也能用于极性化合物。适用于芳香油、萜类、甾体、生物碱、强心甙、蒽醌类、酸性、酚性化合物、脂肪酸、氨基酸以及合成产品如:有机金属化合物等。聚酰胺的适用性分离极性和非极性物质,如:黄酮体、酚类、醌类、有机酸、生物碱、萜类、甾体、甙类、糖类、氨基酸衍生物、核苷类等。尤其对黄酮体、酚类、醌类物质的分离。凝胶层析同义词:凝胶过滤层析(gelfiltrationchromatography)分子筛过滤层析(molecularseivefiltration-)阻滞扩散层析(restric

4、teddiffusion-)排阻层析(exclusionchromatography)凝胶渗透层析(gelpermeationchromatography)Sephadex葡聚糖凝胶Sephacryl凝胶Sepharose琼脂糖凝胶分子筛的适用性水溶性的高分子化合物,如:蛋白质,多肽,核酸,多糖等。SephadexLH20适用于水溶性差的有机物质的分离,如:脂类、固醇类、黄酮类、大环内酯类等分子量差别大的化合物。离子交换层析适用性能在水溶液或含水极性溶剂中产生游离离子基团的酸、碱及两性成分。可用于氨基酸、肽类、生物碱、有机酸、酚类等水溶性成分

5、的分离。使用离子交换剂使物质分离表中药煎剂强酸型(磺酸型)稀NH4OH洗脱通过液酸性、中性化合物解离型、两性化合物稀NaOH洗脱强碱型(季铵型)强碱型稀HCl洗脱通过液通过液酸性化合物中性化合物解离型物质两性化合物(盐、生物碱)1.溶剂槽2.高压泵3.进样器4.层析柱5.检测器6.收集器7.记录仪8.梯度淋洗HPLC主要流程方块图超临界流体萃取SupercriticalFluidExtractionSCFE当一种物质处于临界温度与临界压力以上的状态下,形成即非液体又非气体的单一相态,称超临界流体。利用一种物质在超临界区域形成

6、的流体进行提取的方法称SCFE。SCF与常温常压下的气体和液体比较流体密度(g.ml-1)粘度(g.cm-1s-1)扩散系数(cm2.s-1)气体0.6~21031~310-40.1~0.4SCF0.2~0.91~910-40.2~0.710-3液体0.6~1.60.2~310-20.2~210-5大孔树脂的基本结构常用大孔树脂吸附剂性能一览表

7、树脂结构极性度比表面(m2/g)孔径(A)交联剂备注Amberlite系列XAD-1苯乙烯非极性100200二乙烯苯美国:Rohm-XAD-2苯乙烯非极性33090二乙烯苯HaasXAD-4苯乙烯非极性75050二乙烯苯XAD-7-甲基丙烯酸甲酯中极性45080双(-甲基丙烯酸)乙二醇酯XAD-9亚砜极性25080-XAD-10丙烯酰胺极性69350-XAD-12氧化氮类强极性251300-Diaion系列HP-10苯乙烯非极性400-二乙烯苯日本三菱化

8、学HP-20苯乙烯非极性600-二乙烯苯公司HP-30苯乙烯非极性500-600-二乙烯苯HP-40苯乙烯非极性600-700-二乙烯苯HP-05苯乙烯非极性400

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