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时间:2018-01-02
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1、生物实验中试剂的作用及实验方法总结 一、化学物质的检测方法 ①淀粉——碘液(蓝色) ②还原性糖——斐林试剂班氏试剂(砖红色) ③CO2——Ca(OH)2溶液(澄清石灰水变浑浊) ④乳酸——pH试纸 ⑤O2——余烬复然 ⑥蛋白质——被蛋白酶水解、双缩脲试剂(紫红色) ⑦脂肪——苏丹Ⅲ染液(橘黄色)、苏丹Ⅳ染液(红色) ⑧DNA——二苯胺(蓝色) ⑨染色体——龙胆紫溶液,醋酸洋红溶液 二、实验条件的控制方法 1、加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物 2、减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水 3、除去容器中CO2——NaOH溶液 4、除去叶中原有淀粉——
2、置于黑暗环境 5、除去叶中叶绿素——酒精水浴加热 6、除去光合对呼吸干扰——给植株遮光 7、如何得到单色光——棱镜色散或透明薄膜滤光 8、血液抗疑——加入柠檬酸钠 9、线粒体提取——细胞匀浆离心 10、骨无机盐的除去——盐酸溶液 11、灭菌方法——培养基用高压蒸汽灭菌;接种环用火焰灼烧灭菌;双手用肥皂冼净,擦干后用75%酒精消毒;实验室或接种箱用甲醛蒸汽或紫外灯灭菌;整个过程都在实验室无菌区或酒精灯旁进行。 三、实验结果的显示方法 ①光合速度——O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量 ◆水生植物可依气泡的产生量或产生速率; ◆离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片
3、数目; ◆植物体上的叶片可依指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅。 ②呼吸速度——O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量 ③原子或分子转移途径——放射性同位素示踪 ④细胞液浓度大小——质壁分离 ⑤植物细胞是否死亡——质壁分离 ⑥甲状腺激素—动物耗氧量,发育速度等 ⑦生长激素—生长速度(体重、体长变化) ⑧胰岛素作用—动物活动状态 ⑨菌量—菌落数,亚甲基蓝褪色程度 四、实验中控制温度的方法 1、还原糖,DNA鉴定——沸水浴加热 2、酶促反应——水浴保温 3、用酒精溶解叶中的叶绿素——酒精要隔水加热、 4、细胞和组织培养以及微生物培养——恒温箱培养 五、实验中常用器材和
4、药品的使用 1、NaOH:用于吸收CO2或改变溶液的pH 2、Ca(OH)2:鉴定CO2 3、CaCl2提高细菌细胞壁的通透性 4、HCl:解离或改变溶液的pH 5、NaHCO3:提供CO2 6、NaCl:配制生理盐水或用于提取DNA 7、琼脂:激素或其他物质的载体或培养基的凝固剂 8、亚甲基蓝:用于检测污水的细菌含量 9、酒精:用于消毒、提纯DNA、叶片脱色及配制解离液 10、蔗糖:测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原、作为碳源和能源物质 11、滤纸:过滤或纸层析 12、纱布、尼龙布:过滤,遮光 13、龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色 14、柠檬酸
5、钠——血液抗凝剂 六、一些常见的实验方法 ⑴、根据颜色来确定某种物质的存在: 淀粉+I2(蓝色);还原性糖+斐林试剂(砖红色);脂肪+苏丹Ⅲ(橘黄)或+苏丹Ⅳ(红色);蛋白质+双缩脲试剂(紫色); 大肠杆菌+伊红和美蓝(菌落为深紫色,有金属光泽) ⑵、用颜色标记法来确定原肠胚三个胚层的分化情况。 ⑶、用荧光标记法来证明细胞膜具有一定的流动性 ⑷、同位素示踪法:光合作用产生氧气的来源;光合作用中二氧化碳的去向; 噬菌体侵染细菌实验证明DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质; DNA的复制是半保留复制。 ⑸、确定某种元素为植物生长必需的元素的方法: 水培法(完全培养液与缺素完全
6、培养液对照) ⑹、获得无籽果实的方法: 用适宜浓度的生长素处理花蕾期已去雄的子房,如无籽蕃茄、 诱导染色体变异,如无籽西瓜。 ⑺、确定某种激素功能的方法: 饲喂法,切除注射法,阉割移植法,切除口服法。 ⑻、确定传入、传出神经的功能: 刺激+观察效应器的反应或测定神经上的电位变化。 ⑼、植物杂交的方法 雌雄同花:花蕾期去雄+套袋+开花期人工授粉+套袋 雌雄异花:花蕾期雌花套袋+开花期人工授粉+套袋 ⑽、确定某一显性个体基因型的方法: 测交;该显性个体自交。 ⑾、确定某一性状为显性性状或隐性性状的方法: 具有一对相对性状的纯合体的杂交 自交,观察后代是否有性状分离。
7、 ⑿、确定某一个体是否具有抗性基因的方法: 确定小麦是否具有抗锈病基因,用锈病菌去侵染,一段时间后,观察有无锈斑出现。 ⒀、鉴定血型的方法: 用标准血清与待测血型混合,在显微镜下观察血液的凝集情况。 ⒁、育种的方法: 杂交育种;人工诱变育种;单倍体育种;基因工程育种;细胞工程育种;多倍体育种等。 ⒂、测定种群密度的方法:样方法;标志重捕法 ⒃、生态瓶的制作方法;瓶必须透明,且封闭
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