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《新型生长抑素原核表达质粒的构建及表达鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、生物工程学报ChinJBiotech2008,June25;24(6):995-998journals.im.ac.cnChineseJournalofBiotechnologyISSN1000-3061cjb@im.ac.cn©2008InstituteofMicrobiology,CAS&CSM,Allrightsreserved研究报告新型生长抑素原核表达质粒的构建及表达鉴定梁爱心,冯细钢,韩丽,滑国华,桑雷,刘兴斌,刘耘,杨利国华中农业大学动物科技学院,武汉430070摘要:将生长抑素(SS)与乙肝表面抗原(S)融合基因插入平衡致死系统原核表
2、达质粒pYA3493中,转化至缺失asd基因的减毒猪霍乱沙门氏菌C500,经酶切、测序筛选得到非抗性的目的克隆,命名为pYA-SS。应用SDS-PAGE和Westernblotting技术分离并检测融合蛋白在宿主菌中的表达活性。结果表明,本试验构建的非抗性筛选生长抑素原核表达质粒可以在宿主菌C500中稳定、正确表达。此研究为开发新型、高效、安全的促生长疫苗提供了可靠的研究材料。关键词:生长抑素,原核表达,平衡致死系统ConstructionandCharacterizationofaNovelSomatostatinProkaryoticExpres
3、sionAixinLiang,XigangFeng,LiHan,GuohuaHua,LeiSang,XingbinLiu,YunLiu,andLiguoYangCollegeofAnimalScience&Technology,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan430070,ChinaAbstract:Inthecurrentwork,thefusiongeneincludingsomatostatin(SS)andthehepatitisBsurfaceantigengenewasclonedinto−abal
4、ancedlethalsystemplasmid(pYA3493),andthentransformedintoasdattenuatedSalmonellacholeraesuisC500strain,thepositivetransformantwithoutantibioticresistancegenewasconfirmedbyrestrictionanalysisandDNAsequencing,designatedaspYA-SS.Theexpressionandimmunogenicityoffusionproteinweredete
5、ctedbySDS-PAGEandWesternblotanalysis.TheseresultsshowthattherecombinantprokaryoticexpressionplasmidpYA-SScouldexpresstheSSfusionproteinwithgoodimmunogenicityinC500strain.Inaboveall,thisstudycouldprovidereliablematerialstodevelopnovel,goodandsafevaccineinenhancingthegrowthofanim
6、als.Keywords:somatostatin,prokaryoticexpression,balancedlethalsystem生长抑素(somatostatin,SS)是下丘脑释放的14加快动物的生长。国外已报道应用SS抗血清被动免肽激素,在动物体内具有广泛的抑制作用,特别是疫或化学合成SS制成免疫原主动免疫牛、绵羊等家[1−4]对生长及免疫反应具有明显的影响,应用生长抑素畜,可以显著提高增重效果。国内杜念兴等已完主动或被动免疫动物,所产生的抗体与SS结合,能成了在大肠杆菌中表达的基因工程亚单位苗、痘苗阻断SS与受体作用;同时在肝脏的作用下
7、,加速循病毒表达的活载体苗等SS基因工程苗的制备,其中环中SS的清除,从而促进GH等多种激素的释放,由痘苗病毒表达的SS基因工程苗已开发成为激生IReceived:March13,2008;Accepted:April7,2008Supportedby:theNationalNaturalScienceFoundationofChina(No.30771549)andNationalProgramsforHighTechnologyResearchandDevelopmentofChina(No.2007AA10Z152).Corresponding
8、author:LiguoYang.Tel:+86-27-87281813;Fax:+86-27-872818
