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《gb 5009.248-2016 食品安全国家标准 食品中叶黄素的测定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华人民共和国国家标准GB5009.248—2016食品安全国家标准食品中叶黄素的测定2016-08-31发布2016-09-20实施中华人民共和国发布国家卫生和计划生育委员会GB5009.248—2016前言本标准代替GB/T23209—2008《奶粉中叶黄素的测定液相色谱-紫外检测法》。本标准与GB/T23209—2008相比,主要变化如下:———标准名称修改为“食品安全国家标准食品中叶黄素的测定”;———扩大适用范围,增加在冷冻饮品、米面制品、焙烤食品、果酱、果冻和饮料中叶黄素的液相色谱测定方法;———对原标准的原理进行了修改,把
2、原用丙酮为溶剂提取改为用乙醚-正己烷-环已烷溶剂体系进行提取;———增加操作过程的注意点;———增加了对包括奶粉在内的脂肪含量高的样品的皂化步骤,并提供了不同前处理方法以适应各种样品基质分析需要;———增加了对叶黄素标准溶液浓度的校正要求;———对于在试验操作过程中叶黄素可能产生异构化的现象,增加了对因异构化生成的顺式叶黄素的定性与定量要求。ⅠGB5009.248—2016食品安全国家标准食品中叶黄素的测定1范围本标准规定了食品中叶黄素的液相色谱测定方法。本标准适用于婴幼儿配方奶粉、乳品、冷冻饮品、米面制品、焙烤食品、果酱、果冻和饮料中
3、叶黄素的液相色谱测定。2原理脂肪含量高(脂肪含量以干基计不低于3%)的食品经氢氧化钾溶液室温皂化使叶黄素游离后,再以乙醚-正己烷-环己烷(40+40+20,体积比)提取,液相色谱法分离,紫外检测器或二极管阵列检测器检测,外标法定量。其他食品直接以乙醚-正己烷-环己烷(40+40+20,体积比)提取样品中叶黄素。提取液经中性氧化铝固相萃取小柱净化后,液相色谱法分离,紫外检测器或二极管阵列检测器检测,外标法定量。样品在提取与分析过程中,反式结构的叶黄素可能发生异构化,转化为顺式叶黄素。对于转化产生的顺式叶黄素,可通过保留时间定性、峰面积加合
4、定量。3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂3.1.1环己烷(C6H12):色谱纯。3.1.2乙醚[(C2H5)2O]:色谱纯。3.1.3正己烷(C6H10):色谱纯。3.1.4无水乙醇(C2H5OH):色谱纯。3.1.5甲基叔丁基醚[CH3OCC(CH3)3,MTBE]:色谱纯。3.1.6二丁基羟基甲苯(C15H24O,BHT)。3.1.7氢氧化钾(KOH)。3.1.8碘(I2)。3.2试剂配制3.2.110%氢氧化钾溶液:称取10g氢氧化钾(3.1.7),加水溶解稀释至100
5、mL。3.2.220%氢氧化钾溶液:称取20g氢氧化钾(3.1.7),加水溶解稀释至100mL。3.2.3萃取溶剂:称取1gBHT(3.1.6),以200mL环己烷(3.1.1)溶解,加入400mL乙醚(3.1.2)和400mL正己烷(3.1.3),混匀。3.2.40.1%BHT乙醇溶液:称取0.1gBHT(3.1.6),以100mL乙醇(3.1.4)溶解,混匀。3.2.5碘的乙醇溶液:称取1mg碘(3.1.8),加乙醇(3.1.4)溶解稀释至1L。1GB5009.248—20163.3标准品叶黄素(CAS号:127-40-2),纯度不
6、低于98.0%。3.4标准溶液配制3.4.1标准储备液(50μg/mL):准确称取5mg(精确至0.01mg)叶黄素(3.1.3),以0.1%BHT乙醇溶液(3.2.4)溶解并定容至100mL。该标准储备液充氮避光置于-20℃或以下的冰箱中可保存六个月。注:叶黄素标准储备液使用前需校正,具体操作见附录A。3.4.2标准工作液:从叶黄素标准贮备液(3.4.1)中准确移取0.050mL、0.100mL、0.200mL、0.400mL、1.00mL溶液入5个25mL棕色容量瓶中,用0.1%BHT乙醇溶液(3.2.4)定容至刻度,得到浓度为0.
7、100μg/mL、0.200μg/mL、0.400μg/mL、0.800μg/mL、2.00μg/mL的系列标准工作液。标准工作液充氮避光置于-20℃或以下的冰箱中可保存一个月。3.5中性氧化铝固相萃取小柱,500mg/3mL,使用前以5mL萃取溶剂(3.2.3)淋洗,保持柱体湿润。3.60.45μm滤膜,有机系。4仪器和设备4.1液相色谱仪,带二极管阵列检测器或紫外检测器。4.2紫外可见分光光度计。4.3分析天平:感量0.01mg和0.01g。4.4组织捣碎机。4.5旋涡振荡器。4.6振荡器。4.7减压浓缩装置。4.8固相萃取装置。4
8、.9离心机:转速不低于4500r/min。5分析步骤注:由于叶黄素对光敏感,除非另行说明,所有试验操作应在无500nm以下紫外光的黄色光源或红色光源环境中进行。5.1试样制备将一定数量的样品按要求经过粉碎、
