蛋白质透析说课讲解.doc

《蛋白质透析说课讲解.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、精品好文档，推荐学习交流蛋白质透析在蛋白质的研究中，经常要进行蛋白质脱盐，即将蛋白质同其它盐类小分子分离开。蛋白质脱盐的方法很多，各有优缺点。以下仅介绍常用的透析和凝胶过滤方法，可根据实验条件和要求选用。（一）蛋白质透析一.目的学习透析的基本原理和操作。二.原理蛋白质是大分子物质，不能透过透析膜而小分子物质可以自由透过。在分离提纯蛋白质的过程中，常利用透析的方法使蛋白质与其中夹杂的小分子物质分开。三.仪器、试剂、材料1.仪器烧杯；玻棒；离心机；离心管；冰箱；电炉。2.试剂1％氯化钡溶液；硫酸铵粉末；1mol/LEDTA；2%NaHCO3

2、。3.材料透析管（宽约2.5cm，长12－15cm）或玻璃纸;皮筋；鸡蛋清溶液：将新鲜鸡蛋的蛋清与水按1：20混匀，然后用六层纱布过滤。四.操作方法1.透析管（前）处理：先将一适当大小和长度的透析管放在1mol/LEDTA溶液中，煮沸10分钟，再在2％NaHCO3溶液中煮沸10分钟，然后再在蒸馏水中煮沸10分钟即可。2.取5ml蛋白质溶液于离心管中，加4g硫酸铵粉末，搅拌使之溶解。然后在4℃下静置20分钟，出现絮状沉淀。3.离心：将上述絮状沉淀液以1000转/分的速度离心20分钟。4.装透析管：离心后倒掉上清夜，加5ml蒸馏水溶解沉淀物

3、，然后小心倒入透析管中，扎紧上口。5.将装好的透析管放入盛有蒸馏水的烧杯中，进行透析，并不断搅拌。6.每隔适当时间（5－10分钟），用氯化钡滴入烧杯的蒸馏水中，观察是否有沉淀现象。五.结果处理记录并解释实验现象。六.注意事项1.硫酸铵盐一定要充分溶解，才能使蛋白质沉淀下来。七.思考题在透析袋处理过程中，EDTA和NaHCO3起何作用？仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢3精品好文档，推荐学习交流EDTA，二价金属离子螯合剂，除去钙镁等二价离子，防止他们跟目的样品螯合，影响活性NaHCO3，中和乙酸，延长透析袋寿命。级物理力学部分一

4、、速度公式物理量计算式国际主单位常用单位换算关系速度vV＝s/tm/sKm/h1m/s＝3.6km/h路程sS＝vtmKm1km＝1000m时间tt＝s/vsh1h＝60min＝3600s火车过桥（洞）时通过的路程s＝L桥＋L车声音在空气中的传播速度为340m/s光在空气中的传播速度为3×108m/s二、密度公式(ρ水＝1.0×103kg/m3)物理量计算式国际主单位常用单位换算关系密度ρρ＝m/vKg/m3g/Cm31g/Cm3＝1000kg/m3质量mM＝ρvKgg1kg＝1000g体积vV＝m/ρm3Cm31m3＝103dm3＝1

5、06cm31L＝103ml(cm3)仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢3精品好文档，推荐学习交流仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢3