AYLS7130标准菌株的保存与复苏标准操作规程.docx

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1、编写者：沈继录审核者：批准人：生效日期：2012.1.1文件发放范围：微生物组文件年度审核审核者：审核者：审核者：审核者：日期：日期：日期：日期：标准菌株的保存与复苏标准操作规程1.目的1.1.标准菌株是微生物实验室室内质量的重要物质基础。选择合适的保存方法与复苏步骤，能使标准菌株的形态、染色、生化及血清学特性尽量减少变异。2.适用范围2.1.微生物实验室所有ATCC标准菌株及卫生部临检中心的室间质控菌株，以下简称标准菌株。3.试验器材3.1.无菌接种针或环3.2.—80℃低温冰箱4.试剂4.1.40%甘油肉汤/Microbank4.2.血平板或巧克力平板4

2、.3.营养斜面5.标准菌株的复苏5.1.标准菌株送到实验室后，应严格按照说明书操作，复苏标准菌株。6.标准菌株的保存6.1.将标准菌株以无菌技术接种于10支Microbank中，置≤-80℃低温冰箱保存。6.2.每年取出1支Microbank菌种管，取1-2粒小珠接种于相应平板上，培养18～24h使其获得纯菌落。使用过的Microbank菌种管仍放回-80℃低温冰箱保存。Microbank菌种管内有20-25颗小珠可供应1年的标准菌株使用。6.3.再挑取纯菌落接种于5-10支40%甘油肉汤，置于—80℃低温冰箱保存，用以当月的质控菌株传代。7.标准菌株的使用

3、7.1.每月使用时，须从-80℃低温冰箱中取出供每月使用的甘油肉汤，接种于相应平板上，孵育培养获得纯菌落。7.2.平板上生长的纯菌落可以在2-8℃冰箱中保存一个月用以当月的质控菌株传代。1.1.肠杆菌科的标准菌株，可以再挑出单个菌落接种于营养斜面上，孵育培养后，可以在2-8℃冰箱中保存三个月。2.标准菌株的质控2.1.观察传代复苏后标准菌株菌落形态及培养基特征，看是否与预期菌株相符。2.2.挑取单个菌落进行革兰染色图片镜检观察是否与预期菌株相符。2.3.必要时，可进行生化试验进行验证。3.标准菌株的销毁3.1.从低温冰箱中取出来的菌种不再返回到冰箱中去必须经

4、121℃30分钟高压灭菌后处理。4相关文件无5相关表格AYL-S7-130/01：标准菌株使用及销毁记录表AYL-S7-130/01：标准菌株使用及销毁记录表金葡ATCC25923金葡ATCC25913大肠ATCC25922铜绿ATCC27853阴沟ATCC铅黄肠球菌ATCC嗜麦芽ATCC17666使用人负责人使用日期销毁日期使用日期销毁日期使用日期销毁日期使用日期销毁日期使用日期销毁日期使用日期销毁日期使用日期销毁日期文件更改记录修改后版本更改概述批准人生效日期3.0增加“文件更改记录”2012.1.1