CFX96实时荧光定量PCR仪操作规程.docx

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1、CFX96实时荧光定量PCR仪操作规程1目的建立一个CFX96实时荧光定量PCR仪的标准操作程序。2适用范围适用于CFX96实时荧光定量PCR仪的使用及维护。3依据《CFX96实时荧光定量PCR仪操作说明书》。4职责仪器操作人员确保对CFX96实时荧光定量PCR仪进行正确使用和维护。5操作程序5.1检测环境5.1.1 仪器安置房间应清洁无尘，无易燃易爆和腐蚀性气体，室内排风良好。5.1.2 仪器工作台应平稳，周围无强烈机械振动和电磁干扰，仪器有良好接地。5.1.3 环境温度15℃～31℃，最大相对湿度80％（非冷凝），适宜最高海拔2000米。5.2设备操作流程及注意事项5.2.

2、1开始运行仪器5.2.1.1打开电脑5.2.1.2打开定量PCR仪底座开关5.2.1.3启动CFXManager软件5.2.2放置样品将PCR反应体系加入到0.2ml低缘八联管，盖上管盖；或加入低缘96孔板，用光学级封膜封好。注意，必须带一次性塑料手套，不要让手指接触到反应管表面。将反应管按顺序放入仪器的加热孔中。5.2.3设置程序，运行实验定量PCR软件操作基本步骤为：设置热循环程序文件（ProtocolTab）→设置反应板文件（PlateTab）→点击“StartRun”键，运行程序5.2.3.1热循环程序文件（ProtocolTab）设置指南：点击Edit（编辑）或Cre

3、ateNew（创建新程序）。5.2.3.2反应板设置文件（PlateTab）设置指南：选择本次实验所要使用的荧光染料种类；单击样品类型；如要某些反应孔第一荧光染料对应的样品类型为标准品（Standard），点击“DilutionSeries”键可设置其标准品浓度及稀释倍数。5.2.3.3点击“StartRun”键。单击openlid（打开热盖）或Closelid（关闭热盖）放置样品；单击StartRun，保存文件，开始运行程序。5.2.4结果分析5.2.4.1PCR反应结束后，软件会自动计算标准曲线和Ct值等。5.2.4.2如需进行表达量分析、等位基因分析等，在软件窗口选择相应

4、分析功能。5.2.4.3点击右上方的“Report”键，还可输出结果报告单。5.2.5关闭运行仪器实验结束后取出反应管，顺序关闭CFXManager软件、定量PCR仪电源，关闭电脑。注意！CFX仪器上盖部分为全自动控制，在通电状态，严禁任何人为干涉上盖开启或关闭的行为，此类行为会导致上盖故障，危及仪器使用。6维护6.1定期对以下区域使用医用杀菌剂、杀病毒剂或杀真菌剂进行清洁●外盖和机箱●内反应模块表面和反应模块孔●控制面板和显示屏注意：●为避免遭受电击，请在进行消毒清洁之前确保关闭设备电源开关，拔出设备电源插座。●施用消毒剂后，请始终采用清水多次冲洗反应模块和反应模块孔，最终需

5、彻底烘干反应模块和反应模块孔。禁止使用有摩擦性和腐蚀性消毒剂清洁仪器。6.2认真做好仪器的维护记录。