急性冠脉综合征患者经皮冠脉介入治疗前后血浆内皮素系统变化和临床意义

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1、急性冠脉综合征患者经皮冠脉介入治疗前后血浆内皮素系统变化和临床意义　　[摘要]目的研究急性冠脉综合征（ACS）患者经皮冠脉介入治疗（PCI）前后不同时限血浆内皮素（ET）水平及外周血单个核细胞ETA及ETB受体表达的变化及其临床意义。方法选取2008年10月～2009年2月住院并接受PCI治疗的ACS患者40例（ACS组），包括ST段抬高型心肌梗死（STEMI）26例（STEMI组），非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）9例（NSTEMI组），不稳定型心绞痛（UA）5例（UA组）；选择同期健康体检者20例为对照组。采用酶联免疫法测定对照组及ACS组PCI治疗前后不同

2、时限血浆ET-1水平，同时用半定量RT-PCR方法测定外周血单个核细胞表面ETA及ETB受体的表达。结果①PCI术前1hSTEMI组、NSTEMI组、UA组间ET-1水平差异无统计学意义（P>0.05），但均高于对照组，差异有高度统计学意义（P0.05）；术后3个月STEMI组、NSTEMI组、UA组ET-1水平均低于同组术后7d水平，差异有统计学意义（P0.05）。②PCI术前1hSTEMI组、NSTEMI组、UA组ETAmRNA、ETBmRNA表达水平均高于对照组，差异有高度统计学意义（P0.05）；术后3个月STEMI组、NSTEMI组、UA组ETAmRNA、E

3、TBmRNA表达水平均低于同组术后75d水平，差异有统计学意义（P0.05），具有可比性。1.2方法1.2.1ET-1的测定ET-1酶联免疫分析试剂盒由北京东亚免疫技术研究所提供。1.2.2外周血单个核细胞采集所有患者随机采集PCI术前1h及术后12h、24h及术后7d、术后3个月静脉血5mL用乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝，静置2h后分离血浆，以3000r/min离心5min，吸取白细胞层，用生理盐水稀释后，缓慢加入5mL淋巴细胞分离液，以3000r/min离心25min，吸取单个核细胞层至EP管，离心4min，弃上清，加入1mL红细胞（RBC）裂解液离心4min，弃

4、上清，然后加入200μLRNAfree水溶解沉淀。1.2.3总RNA提取取50μL单个核细胞溶液按硫氰酸胍-酚-氯仿法抽提总RNA，置入-70℃冰箱保存。1.2.4一步法半定量RT-PCR操作参照TaKaRa大连宝生物公司一步法RT-PCR试剂盒说明书进行。引物由上海生物工程公司合成。ETA引物序列：上游：5’-CACTGGTTGGATGTGTAATC-3’；下游：5’-GATACACCAGTAACTAGAGGC-3’，367bp；ETB引物序列：上游：5’-TCAACACGGTTGTGTCCTGC-3’；下游：5’-TTCTAACCACCGACAAGTCA-3’，5

5、29bp；β-actin引物序列：上游：5’-TGTGCTACGTCGCCCTGGACTTG5G-3’；下游：5’-GAGGTAGGACCGGAGCGACAGGTG-3’，263bp。取扩增产物上样4μL，用1.5%的琼脂糖凝胶电泳，用SynGene公司成像系统进行成像。所得条带用scionimmage软件进行灰度值的半定量。　　1.3统计学方法采用统计软件SPSS16.0对数据进行分析，正态分布的计量资料以均数±标准差（x±s）表示，多组间比较采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P0.05），但均高于对照组，差异有高度统计学意

6、义（P0.05）；术后3个月STEMI组、NSTEMI组、UA组ET-1水平均低于同组术后7d水平，差异有统计学意义（P0.05）。见表1。2.2各组PCI治疗前后ETAmRNA的表达情况PCI术前1hSTEMI组、NSTEMI组、UA组ETAmRNA、ETBmRNA表达水平均高于对照组，差异有高度统计学意义（P0.05）；术后3个月STEMI组、NSTEMI组、UA组ETAmRNA、ETBmRNA表达水平均低于同组术后7d水平，差异有统计学意义（P　　[3]MongeJC.Neurohormonalmarkersofclinicaloutcomeincardiova

7、sculardisease：isendothelinthebestone？[J].JCardiovascPhammcol，1998，32：36-42.[4]StewartDJ，KubacG，CosteloKB，etal.Increasedplasmaendothelin-1intheearlyhoursofacute5myocardialinfarction[J].JAmCollCardiol，1991，18（1）：38-43.[5]YipHK，WuCJ，ChangHW，etal.Prognosticvalueofcirculatinglevelso