急性冠脉综合征患者经皮冠脉介入治疗前后血浆内皮素系统的变化及临床意义.doc

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1、急性冠脉综合征患者经皮冠脉介入治疗前后血浆内皮素系统的变化及临床意义［摘要］目的研究急性冠脉综合征（ACS）患者经皮冠脉介入治疗（PCI）前后不同时限血浆内皮素（ET）水平及外周血单个核细胞ETA及ETB受体表达的变化及其临床意义。方法选取2008年10月〜2009年2月住院并接受PCI治疗的ACS患者40例（ACS组），包括ST段抬高型心肌梗死（STEMI）26例（STEMI组），非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）9例（NSTEMT组），不稳定型心绞痛（UA）5例（UA组）；选择同期健康体检者20例为对照组。采用酶联免疫

2、法测定对照组及ACS组PCI治疗前后不同时限血浆ET-1水平，同时用半定量RT-PCR方法测定外周血单个核细胞表面ETA及ETB受体的表达。结果①PCI术前1hSTEMI组、NSTEMI组、UA组间ET-1水平差异无统计学意义（P>0.05）,但均高于对照组，差异有高度统计学意义（P0.05）；术后3个月STEM!组、NSTEMT组、UA组ET-1水平均低于同组术后7d水平，差异有统计学意义（P0.05）o②PCI术前1hSTEMI组、NSTEMI组、UA组ETAmRNA、ETBmRNA表达水平均高于对照组，差异有高度统计学意

3、义（P0.05）；术后3个月STEM!组、NSTEMT组、UA组ETAmRNA>ETBinRNA表达水平均低于同组术后7d水平，差异有统计学意义（卩〈0.05）o结论ET系统在卩CT术后血管内皮增殖中起着重要作用，可能与再狭窄的发生相关。［关键词］急性冠脉综合征；经皮冠脉介入治疗；内皮素［中图分类号］R541.4［文献标识码］A［文章编号］1673-7210（2013）06（c）-0060-04经皮冠脉介入治疗（PCI）术是目前治疗冠心病的主要策略Z-,但植入支架术后仍有20%〜30%的再狭窄率。许多研究发现介入治疗术后再狭窄

4、是一个内皮功能失调的过程。在球囊扩张及支架植入过程中，存在不同程度的支架植入部位内皮的剥脱、损伤和功能紊乱，随之引发中层平滑肌细胞增殖、迁移和表型的改变是PCI术后再狭窄的主要原因之一。内皮素-1（ET-1）是强烈的缩血管因子，同时具有强有力的促平滑肌细胞分裂作用，其效应是通过与ETA和ETB受体的结合而介导。因此ET系统可能在再狭窄的发生中起着重要作用。研究证实人外周血单个核细胞具有产生ET-1的能力，且在单个核细胞表面有ETA受体（ETA-R）及ETB受体（ETB-R）的表达［1］。本研究应用逆转录聚合酚链反应半定量法，测

5、定了急性冠脉综合征（ACS）患者PCI术前及术后不同阶段血浆ET-1水平及外周血单核细胞表面ETA及ETB受体表达的变化，进而探讨ET系统在PCI术后血管内皮增殖中以及再狭窄的临床意义。1资料与方法1.1一般资料选取2008年10月〜2009年2月住院并接受PCI治疗的ACS患者40例（ACS组），包括ST段抬高型心肌梗死（STEMT）26例（STEMI组），非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）9例（NSTEMI组），不稳定型心绞痛（UA）5例（UA组）；其中男22例，女8例；选择同期健康体检者20例为对照组，所有入选对象需

6、排除患有严重肺实质疾病、自身免疫系统疾病、自身免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液系统疾病、急性或慢性感染性疾病、急性脑樓死1个月内的患者。所有入选者均签署知情同意书。各组一般资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。1.2方法1.2.1ET-1的测定ET-1酶联免疫分析试剂盒由北京东亚免疫技术研究所提供。1.2.2外周血单个核细胞采集所有患者随机采集PCI术前1h及术后12h、24h及术后7d、术后3个月静脉血5niL用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，静置2h后分离血浆，以3000r/min离心5min,吸取白细胞层，用

7、生理盐水稀释后，缓慢加入5mL淋巴细胞分离液，以3000r/min离心25min,吸取单个核细胞层至EP管，离心4min,弃上清，加入1mL红细胞(RBC)裂解液离心4min,弃上清，然后加入200mLRNAfree水溶解沉淀。1.2.3总RNA提取取50UL单个核细胞溶液按硫氧酸脈-酚-氯仿法抽提总RNA,置入-70°C冰箱保存。1.2.4一步法半定量RT-PCR操作参照TaKaRa大连宝生物公司一步法RT-PCR试剂盒说明书进行。引物由上海生物工程公司合成。ETA引物序列:上游：5'-CACTGGTTGGATGTGTAAT

8、C-3，；下游：5'-GATACACCAGTAACTAGAGGC-3',367bp；ETB引物序列：上游：5'-TCAACACGGTTGTGTCCTGC-3'；下游：5'-TTCTAACCACCGACAAGTCA-3',529bp；3-actin引物序列：上游：5'-TGTG