最新UV-VIS实验讲义.ppt

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1、赛默飞世尔EV220型UV-VIS光谱仪唐婉莹__________________________________________________教学要求1、掌握本实验室UV-VIS光谱仪的基本原理2、了解实验室UV-VIS光谱仪的结构及一般应用3、掌握ThermoInsight软件的操作方法__________________________________________________UV-VIS概述在仪器分析中紫外—可见分光光度法是历史悠久、应用最为广泛的一种光学分析方法。它是利用物质的分子或

2、离子对某一波长范围的光的吸收作用，也就是说采用分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱来对物质进行定性分析、定量分析及结构分析。按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。分光光度法是在比色法基础上发展起来的，两者所依据的原理基本相同。由于分光光度法采用了更为先进的单色系统和光检测系统，使得分光光度法在灵敏度、准确度、精密度及应用范围上都大大优于比色法。_______________________________________________

3、___UV-VIS的理论基础朗伯-比尔定律：当一束平行的单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质的浓度、液层厚度乘积成正比，即A=κcl式中比例常数κ与吸光物质的本性，入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度，l为透光液层厚度。__________________________________________________UV-VIS区域划分紫外光区:10～400nm<200nm远(真空)紫外区200～400nm近紫外区可见光区:400～800nm仪器:190～1100nm__

4、________________________________________________UV-VIS的特点仪器和操作都比较简单、费用少、分析速度较快。灵敏度较高。其最低检出浓度可达10-6g/mL。有较好的选择性。通过选择适当的测量条件，可在多种组分共存的体系中，对某一物质进行测定。精密度和准确度较高。其相对误差可达到1%～2%。这满足了对微量组分的测定要求。用途广泛。可用于医药、化工、冶金、环境保护、地质等诸多领域；不但可以对被测物质进行定量，定性和结构分析，还可以进行官能团鉴定、相对分子质

5、量测定、配合物的组分及稳定常数的测定等等。__________________________________________________物质对光的选择性吸收物质的结构决定了物质在吸收光时只能吸收某些特定波长的光，也就是说，物质对光的吸收具有选择性。因此可以利用测量物质对某种波长的光的吸收来了解物质的特性。光与物质作用时，物质可对光产生不同程度的吸收。分子中电子跃迁所需要的能量大部分处于吸收光波长的紫外和可见光范围，通常将分子在这一区域的吸收光谱称为电子光谱。不同分子中的电子跃迁所需能量不一样，吸

6、收光谱也就不同。用经过分光后不同波长的光依次通过待测物质，并记录物质对不同波长光的吸收程度（吸光度）的变化曲线，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，便得到该物质的紫外-可见吸收光谱。__________________________________________________UV-VIS谱图认识-1紫外吸收曲线横坐标为波长（λ）,常用nm表示;纵坐标为吸收强度,常用的单位有吸光度（A）、透光率（T%）、mol吸光系数（ε）、mol吸光系数的对数（logε）表示。_______________

7、___________________________________UV-VIS谱图认识-2__________________________________________________UV-VIS吸收光谱的产生-1有机化合物的紫外－可见吸收光谱，是由分子中价电子的跃迁产生的。价电子分为以下三种：形成单健的σ电子形成双健的π电子未成健的n电子(孤对电子)有机物最有用的吸收光谱是基于n→π*和π→π*跃迁产生的，这两类跃迁所需要的辐射能量大多处于波长大于200nm的区域。分子中电子的能级和跃迁类

8、型(σ→σ*n→σ*π→π*n→π*)__________________________________________________UV-VIS吸收光谱的产生-2(1)σ→σ*跃迁吸收光波长在180nm以下，饱和烃只有C-H健才有这种跃迁，只有在真空紫外区才能观察到，无实际应用。(2)n→σ*跃迁含有未成健的杂原子(如S、N、O、Cl、Br、I等)的饱和烃衍生物都会发生这种跃迁，吸收峰在150～250nm之间，在紫外区仍观察不到这类跃迁，也无实际应