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时间:2017-12-30
《脂肪测定的四种方法,索氏提取法、酸水解法、巴布科克法、盖勃氏法》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、脂肪的测定方法第—法 索氏抽提法1 原理 样品用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后,蒸去溶剂所得的物质,在食品分析上称为脂肪或粗脂肪。因为除脂肪外,还含色素及挥发油、蜡、树脂等物。抽提法所测得的脂肪为游离脂肪。2试剂2.1 无水乙醚或石油醚。2.2海砂:同GB5009.3-85《食品中水分的测定方法》2.3。3 仪器 索氏提取器。4 操作方法4.1 样品处理4.1.1 固体样品:精密称取2~5g(可取测定水分后的样品),必要时拌以海砂,全部移入滤纸筒内。4.1.2液体或半固体样品:称取5.0~10.0g,置于蒸发皿中,加入海砂约20g于沸水浴上蒸干后,再于95~105℃干燥,研细,全部移入滤纸
2、筒内。蒸发皿及附有样品的玻棒,均用沾有乙醚的脱脂棉擦净,并将棉花放入滤纸筒内。4.2 抽提 将滤纸筒放入脂肪抽提器的抽提筒内,连接已干燥至恒量的接受瓶,由抽提器冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处,于水浴上加热,使乙醚或石油醚不断回流提取,一般抽取6~12h。4.3称量 取下接受瓶,回收乙醚或石油醚,待接受瓶内乙醚剩1~2mL时在水浴上蒸干,再于,95~105℃干燥2h,放干燥器内冷却0.5h后称量。4.4 计算 m1-m0X=───────×100 m2 式中,X——样品中脂肪的含量,%; m1——接受瓶和脂肪的质量,g; m0——接受瓶
3、的质量,g;m2——样品的质量(如是测定水分后的样品,按测定水分前的质量计),g。 第二法 酸水解法5 原理 样品经酸水解后用乙醚提取,除去溶剂即得游离及结合脂肪总量。6 试剂6.1 盐酸6.295%乙醇。6.3乙醚。6.4石油醚。7 仪器 100mL具塞刻度量筒。8 操作方法8.1 样品处理8.1.1 固体样品:精密称取约2g,置于50mL大试管内,加8mL水,混匀后再加10mL盐酸。8.1.2液体样品:称取10.0g,置于50mL大试管内,加10mL盐酸。 8.2 将试管放入70~80℃水浴中,每隔5~10min以玻璃棒搅拌一次,至样品消化完全为止,约40~50
4、min。8.3 取出试管,加入10mL乙醇,混合。冷却后将混合物移于100mL具塞量筒中,以25mL乙醚分次洗试管,一并倒入量筒中。待乙醚全部倒入量筒后,加塞振摇1min,小心开塞,放出气体,再塞好,静置12min,小心开塞,并用石油醚-乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10~20min,待上部液体清晰,吸出上清液于已恒量的锥形瓶内,再加5mL乙醚于具塞量筒内,振摇,静置后,仍将上层乙醚吸出,放入原锥形瓶内。将锥形瓶置水浴上蒸干,置95~l05℃烘箱中干燥2h,取出放干燥器内冷却0.5h后称量。8.4 计算同4.4三、巴布科克法(Babcock法)巴布科克法是用来测定乳及乳制品的一种
5、方法,测定牛奶前我们首先搞清牛奶的营养成分牛奶的平均成分:牛乳100%:水分87.5%,总固体12.2%,维生素,免疫体和酶;总固体12.2%:非脂固体8.8%,乳脂肪3.4%;非脂固体8.8%:蛋白质3.5%,乳糖4.6%,矿物质Ca.p.Fe.K等;蛋白质3.5%:酪蛋白3.0%,白蛋白0.4%,球蛋白0.1%在成分表中乳脂肪3.4%是需要我们检测。在牛乳中蛋白质比人乳蛋白质高。乳糖含量比人乳少,矿物质中Ca的含量比人乳多,而Fe的含量比人乳少牛乳中脂肪含量标准如下生鲜牛乳:(1)特级≥3.2%(2)一级≥3.0%(3)二级≥2.8%消毒牛乳≥3.0%众所周知牛乳是乳浊液。它的脂类在牛乳
6、中并不是以溶解状态存在,而是以脂肪球呈乳浊液状态存在,在它周围有一层膜,这层膜使脂肪球得以在乳中保持乳浊液的稳定状态,这层膜其中含蛋白质。磷脂等许多物质,通常用浓H2SO4时非脂成分溶解,脂肪球膜就被软化破坏,于是乳浊液就破坏,脂肪即可分离出来,这是公认的标准分析法。巴布科克法和盖勃氏法这两种方法是有两个科学家研制出来,一个是美国的Babcock在1890年研究出测牛乳的脂肪,后来经过2年,即1892年由英国的盖勃液研究出测牛乳的脂肪。
7、成分分离,分离出来的非脂成分一般用浓H2SO4分解,用容量法定量,操作简便,为许多国家用于乳制品的常规分析。Babcock法原理利用硫酸溶解乳中的乳糖浴蛋白质等非脂成分使脂肪球膜破坏,脂肪游离出来,在乳脂瓶中直接读取脂肪层,从而迅速求出被检乳中的脂肪率。2、方法准确吸取17.6ml牛乳→于乳脂瓶中→加17.5ml硫酸(用量筒量取)→混合→离心5分钟(1000转/分)→60℃水至瓶颈→离心2分钟(1000转/分
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