比较两种粪便隐血试剂的检测

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时间:2017-12-30

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1、比较2种粪便隐血试剂的检测[摘要]目的通过用邻联甲苯胺和便隐血胶体金检测试纸分别检测200例粪标本进行对照实验并分析探讨粪潜血二种检测方法的优劣和应用。结果:二者一致性符合率为90%。结论:化学法灵敏度、特异性较胶体金法低,受饮食影响因素大,胶体金法有假阴性,故建议二者结合判断。[关键词]大便潜血;邻联甲苯胺法;免疫胶体金 Abstract:ObjectiveMethodsTodetectthesedoccultbloodof200specimenswithbothorthotolidinemethodandimmunogoldmethod.Toex

2、plorethecomparabilitybetweenthechemicalmethodandimmunogoldmethodindetectingsedoccultblood.thenanalysetheresults.ResultsThecoincidenceofthedetectingresultsbetweenthetwomethodsis90%.ConclusionFoodanddrinkimpacttheresultsofchemicalmethodverymuch.sochemicalmethodislesssensitiveands

3、pecificthanimmunogoldmethod.Butimmunogoldmethodalsohasfalsepositivereaction,thereforewesuggestdetectingsedoccultbloodwiththebothtwomethods.  Keywords:Sedoccultblood;Orthotolidinemethod;Mmunogoldmethod  1 材料和方法1.1样本来源自我院消化科门诊患者收集粪便493份,患者随机分为2组:一组未按医嘱指引进行饮食及药物控制,称无指引组250例;另一组按医嘱

4、指引进行饮食及药物控制3日,称指引组243例。。1.2试剂         万华普曼生物工程有限公司生产的万华牌“消康保”粪便隐血胶体金试剂盒(简称WH试纸条)。邻联甲苯胺试剂:由上海远航试剂厂生产,冰乙酸及无水乙醇由广州东红化工厂生产,均为AR级。称取AR级邻甲苯胺1g溶于冰乙酸及无水乙醇各50ml中,存放于棕色瓶中,4℃冰箱保存备用。3%过氧化氢溶液。  1.3 方法         每份标本均做粪便隐血胶体金试纸和邻联甲苯胺法检测、粪便隐血胶体金试纸法按说明书操作,邻联甲苯胺法按全国操作规程,。  2 结果  2.1 灵敏性试验      取正

5、常人粪便2g加入刻度离心管中,加蒸馏水至5ml刻度混匀,再加入纯化的人血红蛋白的质控品(浓度为80g/L)10μl,其Hb含量为160μg/ml,然后再吸出含Hb的粪便混合液用蒸馏水稀释成含Hb16.0μg/ml、4.0μg/ml、1.0μg/ml、0.8μg/ml、0.4μg/ml、0.2μg/ml、0.15μg/ml、0.10μg/ml的系列混合液,用两种方法进行测定,结果见表1。联苯胺法胶体金纸法合计    (-)(+)(-)(+) 7066511762415013161174     9415678172250两种方法检测不同浓度的人血红蛋白

6、液结果比较Hb含量(略) WH试纸条最低Hb检测出浓度为0.2μg/ml,联苯法最低检测出浓度为0.80μg/ml。这说明WH试纸法比单克隆抗体法灵敏度高,对人体早期的消化道微量出血更为敏感。  2.2 敏感性试验      用单克隆抗体法及联苯胺法同时分别检测120例大便隐血标本,结果如表2。对联苯胺法阳性,单抗法阴性的24例患者,素食3d后,留大便,重新用联苯胺法测试大便隐血,仅有1例阳性,而单抗法检测均为阴性结果。  2.3 特异性和准确性试验         在单克隆抗体法阴性标本中,分别加各种动物血红蛋白和肌红蛋白时,单克隆抗体法始终还是阴

7、性,而在联苯胺法阴性标本中,加各种动物血红蛋白和肌红蛋白,联苯胺法则均为阳性。表2 两种方法检测大便隐血结果检测(略)   2.4 干扰试验         用含维生素C浓度分别为5.0mg/ml、10.0mg/ml、20.0mg/ml、40.0mg/ml、80.0mg/m加入约含Hb3.5μg/ml的粪便中,用两种方法比较见表3,结果单抗法仍为阳性,而联苯胺法测得结果为阴性,再用铁剂及含过氧化物酶的蔬菜汁加入含Hb3.5μg/ml粪便中做同样的隐血试验,结果是单克隆抗体法所做的结果始终不变,而联苯胺法测得的结果为阴性。这说明单克隆抗体法不受其他化学

8、药品、铁剂、过氧化物酶等的干扰,而联苯胺则受之影响较大,易形成假阴性结果。表3 维生素C对二种隐血试验方法的

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