枯草芽孢杆菌生防菌株nj-18的发酵条件优化

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1、南京农业大学学报2010,33(2):58-62JournalofNanjingAgriculturalUniversityhttp://nauxb1njau1edu1cn章四平,刘圣明,王建新,等.枯草芽孢杆菌生防菌株NJ18的发酵条件优化[J].南京农业大学学报,2010,33(2):58-62枯草芽孢杆菌生防菌株NJ18的发酵条件优化3章四平,刘圣明,王建新,周明国(南京农业大学植物保护学院/农业部病虫监测与治理重点开放实验室,江苏南京210095)摘要:通过单因子试验筛选到了适合枯草芽孢杆菌NJ

2、18生防菌株生长及其拮抗物质产生的最佳碳源为玉米粉和麦芽2+-1糖,最佳氮源为豆粕,最佳金属离子是Ca。用正交试验法确定了该培养基各组分的最佳含量为:玉米粉10g·L、-1-1-1麦芽糖30g·L、豆粕30g·L、CaCO3115g·L;在确定适合该菌株的培养基组分基础上,对其培养条件进行优化试验,结果表明:初始pH为618、培养温度为28℃、250mL摇瓶装液量为90mL、接种量为2%(体积分数)、培养-1时间为36h、转速为180r·min时为该菌株的最佳培养条件。关键词:单因子试验;枯草芽孢杆菌;

3、发酵条件;拮抗物质;正交试验中图分类号:S435;S436文献标志码:A文章编号:1000-2030(2010)02-0058-05OptimizingfermentationconditionfortheantagonisticBacillussubtilisNJ218strain3ZHANGSi2ping,LIUSheng2ming,WANGJian2xin,ZHOUMing2guo(CollegeofPlantProtection/KeyLaboratoryofMonitoringandManag

4、ementofPlantDiseasesandPests,MinistryofAgriculture,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095,China)Abstract:ThefavorableconditionforthegrowthandantagonisticproductionofaBacillussubtilisstrainNJ218,abiologicalcontrolagent,bysinglefactorexperimentswaspre

5、sentedinthisstudy.Theresultsshowedthatthebestcarbonsourcewascornflourand2+maltose,thebestnitrogenwassoybeandregs,andthebestmetalionswasCa.Thebestcompositionofthemediacontained:10-1-1-1-1g·Lcornflour,30g·Lmaltose,30g·Lsoybeandregsand115g·LCaCO3bytheorthog

6、onalexperiment.Subse2quentlythecultureconditionswasoptimizedandtheresultsshowedthemediuminitialpH618,thefermentationtemperature28℃,thequantityofmedium90mLina250mLflask,theinoculationvolumeof2%,thefermentationcycleof36h,andtherotation-1speedof180r·minresp

7、ectively.Keywords:singlefactorexperiment;Bacillussubtilis;fermentationcondition;antagonistic;orthogonalexperiment本实验室从南京郊区土壤中筛选到了一株对油菜菌核病菌和水稻纹枯病菌等植物病原菌生长具有强烈抑制作用的枯草芽孢杆菌NJ18生防菌株,经室内研究表明,该生防菌株能够分泌抗菌物质导致真77菌菌丝肿胀畸形。田间试验结果表明,该菌株的1×10~5×10发酵液对油菜菌核病和水稻纹枯病具[1-2]

8、有很好的防治效果。为了实现该生防菌株的产业化,本文对该菌株的发酵条件进行了优化研究,为该菌株的工业生产并获得高产抗菌物质提供参考依据。1材料与方法111材料枯草芽孢杆菌NJ18和油菜菌核病菌由本实验室分离、鉴定与保存。PDA培养基、NB培养基、NA培养基制作过程见文献[3]。基础发酵培养基、种子培养基同NB培养基。112方法11211种子菌液制备在超净台中从保存NJ18菌株的试管中挑取一环NJ18菌株,在含NA培养基平板上画线,于生长箱中2

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