枯草芽孢杆菌_Bacillussubtilis_液体发酵条件

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1、第24卷第4期上海交通大学学报(农业科学版)Vol.24No.42006年8月JOURNALOFSHANGHAIJIAOTONGUNIVERSITY(AGRICULTURALSCIENCE)Aug.2006文章编号:1671-9964(2006)04-0380-06枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)液体发酵条件郝林华1,孙丕喜1,姜振波2,陈靠山3,牛德庆1(1.国家海洋局第一海洋研究所,青岛266061;2.山东省即墨市环保局,青岛266200;3.山东大学生命科学学院,济南250100)摘要:采用单因素试验和正交试验对筛选

2、出的1株生防拮抗菌——枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)的液体发酵培养基和工艺条件进行优化。确定了最佳的培养基配方为:蔗糖20g·L-1、硫酸铵5g·L-1、麸皮50g·L-1、柠檬酸三钠2.5g·L-1、KHPO·243HO0.3g·L-1、MgSO·7HO0.5g·L-1、FeSO·7HO0.05g·L-1;最适发酵条件为:发酵温度30℃,初始pH值7.2,最适接种量242425%;进行了100L发酵罐放大培养,20h达到生长高峰期,生长周期24h,最适放罐时间为26~28h;此时所获得的菌体数量约为6×109个·mL-1

3、。关键词:枯草芽孢杆菌;培养基;发酵条件中图分类号:Q939文献标识码:ALiquidFermentationConditionsofBacillussubtilis1,SUNPei-xi122,NIUDe-qing1HAOLin-hua,JIANGZhen-bo,CHENKao-shan(1.The1stInstituteofOceanography,StateOceanicAdministration,Qingdao266061;2.EnvironmentalProtectionAdministrationofJimoCity,Shan

4、dongProvince,Qingdao266200;3.LifeScienceInstitute,ShandongUniv.,Jinan250100,China)Abstract:Bacillussubtilisispotentialtoplayanimportantbiologicalcontrolplantpathogenseffect.TheliquidfermentationmediumandtechnologicalconditionsofBacillussubtiliswereoptimizedbysinglefactorex

5、perimentsandorthogonalexperiments.Theresultsshowedthatoptimummediumformulawassucrose20g·L-1,(NH)SO5g·L-1,wheatbran50g·L-1,citratesodium2.5g·L-1,424KHPO·3HO0.3g·L-1,MgSO·7HO0.5g·L-1,FeSO·7HO0.05g·L-1.Thefavorablefermentationconditionwasdetermined:fer-2424242mentationtempera

6、ture30℃,initialpHvalueofmedium7.2,inoculationamount5%.Themagnifyingculturein100Lfermentationtankwasconducted,growthpeakvalueappearedin20h,growthperiod24h,andoptimumcultivatingtime26~28h,andtheob-tainedbacteriumamountwasupto6×109·mL-1infermentationliquid.Keywords:Bacillussu

7、btilis;medium;fermentationconditions20世纪60年代以来,化学农药引起的环境污染和在农产品中的残留以及病原物产生抗药性等一系列问题日益引起各国政府广泛的关注,寻找对环境友好的无公害、高效的生物农药受到普遍重视[1,2]。生物防治被认为是最具有发展潜力的防治作物病害的方法并发挥着越来越重要的作用,而获得高效拮抗菌是生物防治的基础[2,3]。枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)是土壤和植物微生态的优势种群,能够忍受极端的外部环境而长期存活,作为植物根际有益微生物,通过分泌抗生物质和生长竞争,在防治

8、植物病害方面发挥多种有益作用[4~6]。剂型以活体芽孢为主,田间施用可以较长时间的发挥抑制病原菌作用[7,8]。收稿日期:2005-11-03基金项目:国家863计划资助项目(N

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