对几种百合科植物基因组大小的评价

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1、≥47维普资讯}(http://www.cqvip.com2}7一哆，．劫级、武汉植物学研究1996，14(3)：199～203Journalo1"WuhanBotanicalResearch对几种百合科植物基因组大小的评价砌I武大学生命科学学院武搜4300721r武大学分析涮试中心．iI=槛430072】，×y毕7'，．7经典细胞学对某种生物的细胞核DNA含量和基因组大小研究只停留在定性说明上一为了清楚地认识细胞核DNA，对其定量分析是很必要的。随着对生物细胞核型研究的深入和细胞学染色技术的发展，不仅细胞，甚至单个染色体已能清晰地显现越来越多的物种染色体核型图见诸于报道，染色体组或

2、基因组的研究也更引人瞩目“。这些均为核DNA定量分析提供了必要基础。近年来，显微分光光度术和计算机在生物科学领域的应用．为细胞核DNA从定性转到定量研究提供了可能现在，部分物种的细胞校DNA含量已被精确地测量．而且单个染色体上DNA含量的测定已进行过尝试，从而为基因组大小的评价提供了更直接的数据和更新的途⋯”。同一物种的基困组大小是相当稳定的，是各个物种固有的特征参数。因此对基因组大小(即染色体组大小)的评价就可以为物种的系统进他、分类和遗传等研究提供客观的证据、-”在本实驻中，利用孚尔根显微分光光度法测定了百合科4种植物的细胞棱DNA含量，并对它们的基因组大小作出了评价。用显微分光

3、光度术测定Feulgen染色的细胞核DNA含量时，为了避免误差，国际上采用鸡红血细胞核DNA含量作为一种内部标准。。，从而使求得的绝对值更为直观，由于洋葱根尖细胞制片技术的成熟．它已作为另一种参考标准。本实验同时采用这两种标准使测量数值更具说服力。收靖}j：19504l川．偿阿【J；199510l7第一怍肯．26岁域I孙坦，赶宁编显微镜光i州帕舒斩武汉人学分析测试科学系艾1988维普资讯http://www.cqvip.com武汉植物学研宄第14卷1材料与方法1．1材料(1)洋葱(AltiumcepaI．)，市售。(2)藻头(AltiumchineseG．Don．)、分葱(Altiu

4、mascaloniumL．)均取自武汉大学生命科学学院植物细胞实验室。(3)黄花(HemerocaltiscitrinaBaroni)取自武汉大学生命科学学院植物生理实验室。(4)鸡红血细胞，取自武汉大学生命科学学院鸡场成年公鸡静脉血。1．2方法1．2．1植物制片方法将上述4种材料洗净，剪去原来生长的根，在室温(20'C)下重新发根。待根尖长1cro左右时，取根尖用卡诺固定液(无水乙醇：冰醋酸一3：1v／v)室温下固定3h．再用双蒸水洗3次(3×10min)。然后按1：1(V／V)加入2果胶酶和1纤维素酶，于30C温箱中酶解1h后用双蒸水洗3次(3×10min)。酶解后的根尖放在60

5、C水浴中用1mol／LHCI酸懈10min，取出．水洗3次(3×10rain)。洗净的根尖用Schiffs试剂染色1h。染色后再用SO水和蒸馏水各洗3次。每次10m[n。将已染色的根尖加1滴45醋酸压片，然后放入冰箱冷藏室冰冻待结冰后揭片，室温下晾干，用中性树胶封片，待测。1．2．2鸡红血细胞制片方法取公鸡静脉血，用肝素抗凝剂稀释．涂片于1／2载玻片处，用卡诺固定液(无水乙醇：冰醋酸=3：1v／v)固定1h，再用95乙醇洗2次，每次10min，晾干后，保存于4C冰箱中备用。鸡红血细胞染色与封片方法与根尖相同。’1．2．3细胞核DNA测量与计算测量所用仪器为扫描显微镜光度计(Scann

6、ingmicroscopephotometer，UNIVAR．Reiehert—Jung，Austria)测量，波长选定为650nrfl，用扫描法测量细胞棱的光密度。每种材料测5张制片，选择处于有丝分裂中、前期，即4C核。每张制片测1O个细胞核，DNA测量均由相应计算机软件控制操作数据收集及处理亦由Commodore计算机执行。求出平均值后，再与鸡红血细胞棱DNA含量比较，换算出各种植物细胞核DNA绝对含量，其公式为“：细胞核DNA绝对含量cPg一丽殖蔷×。．zzPg基困组大小计鲐：用下列公式：基因组大小(bp)一绝对含量(1c)×0．965×10bp本实验测出鸡红血细胞DNA含量2

7、c值为3．22Pg。2结果和分析2．1几种不同植物核DNA含量百合科几种不同植物胞核DNA含量列于表1。从表1中可以看出．不同种的细胞核DNA含量存在着很大的差异。按DNA含量的多少顺序排列为：萏头106．47Pg、洋葱维普资讯http://www.cqvip.com第3期扬勇等：时几种百台抖植物基因组大小的评价75．30Pg、分葱43．25pg、黄花30．99Pg。不同唇间差异更大，蓖头、洋葱和分葱分别为黄花核DNA含量的3．4、2．4和1．4倍。但从同