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时间:2017-12-30
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1、高考生物试题中有关染色剂使用的考查一染色剂的应用1 DNA和RNA的染色鉴定甲基绿和吡罗红是混合染色剂。甲基绿是具有金属光泽的绿色微结晶或亮绿色粉末。溶于水,显蓝绿色。稍溶于乙醇,不溶于戊醇。吡咯在盐酸作用下聚合成为吡咯红,可与RNA结合呈现红色。这两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以观察到DNA和RNA在细胞中的分布情况。注意:①盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进人细胞,同时使染色体中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。②2种染色
2、剂要混合使用,而且要现配现用。2健那绿染液与线粒体的观察健那绿染液是专一性的线粒体的活细胞染料,线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原成为无色状态。因此可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。线粒体能在健那绿染液中维持活性数小时,通过染色,可以在高倍显微镜下观察到生活状态的线粒体的形态和分布。3. 碱性染料与染色体的观察生物实验中所用的染料,按其来源可分为天然染料和人工染料两大类。人工染料根据其主要化学成分的性质,又分成碱性染料、酸性染料和中性染料三大类,其碱性、酸性和中性是由
3、染料中有色部分的性质所决定的。若染料的有色部分为阴离子,即为“酸性”染料;若染料的有色部分为阳离子,则称为“碱性”染料;若染料的阴、阳离子均有颜色,则称为“中性”染料。染色体(质)是细胞核内容易被碱性染料染成深色的物质。在观察植物细胞有丝分裂实验中,常用龙胆紫溶液使染色体染成紫色,也使用醋酸洋红溶液使染色体着红色。二者染色时间都不可过长。l%~2%龙胆紫溶液俗称紫药水,是人们所熟悉的外用药。龙胆紫溶液的配制是将龙胆紫溶解在质量分数为2%的醋酸溶液中配制而成。染色中使用的龙胆紫溶液略呈酸性,l%醋酸洋红本身也是酸性,同样具有碱性的助色基团。配方
4、中的醋酸是染料的溶剂,在染色时增加了细胞的通透性,利于染液的离子进入细胞而使细胞核内的染色体着色。此外,改良苯酚品红溶液也可使染色体着色。4亚甲基蓝是一种活体染色体亚甲基蓝是细胞的活体染色剂,0.01%亚甲基蓝对细胞无毒害,亚甲基蓝是一种有机物小分子,在水中离解成亚甲基蓝的阳离子(呈蓝色)和氯离子(无色),亚甲基蓝阳离子可通过主动运输进入到细菌体内,在酶的作用下被细菌分解成无色的小分子,使蓝色褪去。褪色程度越大,说明细菌越多,水污染越严重,因此可用于水污染程度指示剂。此外,亚甲基蓝是氧化还原指示剂,在有氧的环境中蓝色褪去,可用作氧气检测剂。5
5、苏丹红与脂肪鉴定苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ是人工合成的苏丹红系列染料。常作为一种工业染料,被广泛用于如溶剂、油、蜡、汽油的增色以及鞋、地板等增光。近年有不法分子用于食品添加剂,对人体有害。苏丹红为亲脂性化合物。在脂肪类物质中的溶解度大于在其他溶剂(如酒精、丙酮)中的溶解度时,染料颗粒便大量进入脂肪类物质的结构内,在脂滴中溶解积累,并吸附在脂肪颗粒结构上,苏丹Ⅲ遇脂肪显橘黄色,苏丹Ⅳ遇脂肪显红色。苏丹Ⅳ染液与脂肪的亲和力比较强,所以染色时间应比苏丹Ⅲ短。6染色剂的染色与显微镜的使用如果观察经过染色剂染色的生物材料,如观察洋葱根尖分生区有丝分裂实验时要用较强
6、的光照。而不经染色的生物材料在显微镜下观察时,光线尽可能的较暗些。如观察质壁分离与复原实验时,如果光线太强,不容易观察到液泡。二例题分析例1只有在保持细胞活性的条件下,才能显示细胞中某物质或结构的实验是( )A.苏丹Ⅲ染色剂观察花生种子子叶细胞中的脂肪B.龙胆紫染色观察洋葱根尖分生区细胞的有丝分裂C.健那绿(詹纳斯绿B)染色观察动物细胞的线粒体D.甲基绿、派洛宁(吡罗红)染色观察动物细胞中的DNA和RNA解析:本题考查有关染色剂的使用。苏丹Ⅲ染色剂用于观察花生子叶细胞中的脂肪颗粒。观察洋葱根尖分生区细胞的实验在解离时细胞已死亡,甲基绿、吡罗红
7、用于观察DNA和RNA健那绿染液是专一性的线粒体的活细胞染料,其染色原理是:线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原成为无色状态。因此可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。所以只有在保持细胞活性的条件下,才能显示细胞中线粒体结构。答案为C。例2下表是根据实验目的,所选用的试剂与预期的实验结果正确的是 实验目的试剂预期的实验结果A观察根尖分生组织细胞的有丝分裂醋酸洋红染色体被染成紫红色B检测植物组织中的脂肪双缩脲试剂脂肪颗粒被染成紫红色C检测植物组织中的葡萄糖甲基绿葡萄糖与甲基绿
8、作用,生成绿色沉淀D观察DNA和RNA在细胞中的分布斐林试剂 吡罗红斐林试剂将DNA染成绿色,吡罗红将RNA染成红色解析:本题主要考查生物教材中不同实验的染色或某些
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