实验十 传出神经系统药物对离体家兔肠管平滑肌

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1、传出神经系统药物对家兔离体肠管平滑肌的影响    实验目的1、掌握离体平滑肌的实验方法。2、观察传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用   教学时数  2学时   实验原理一、 离体实验1、所用组织：心脏、膀胱、子宫、气管、肺、肠等均可用于离体实验2、特点：实验条件易于控制、操作简便、结果准确、节省时间，可进行大量药物的筛选。3、要求：离体实验需在一定生理环境下进行，模拟体内环境。         （1）温度：38±0.5℃         （2）通氧气：1－2气泡/s        （3）营养液：含有一定离子和葡萄糖的溶液，不同的组织所选用的营养液不同。二、离体肠管实验1、肠管的选

2、择：根据实验目的的不同进行选择（1）小肠：十二指肠、空肠、回肠（2）自律性：频率较慢，起博点位于十二指肠，自律性自上而下渐弱。（3）空肠多做定性实验，回肠多做定量实验2、肠内受体及作用原理（1）受体：家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。（2）作用：α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张；M受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。（3）药品对受体的作用：1、氯化乙酰胆碱（Ach）：M受体激动剂，乙酰胆碱可兴奋M受体，使小肠收缩幅度增加，蠕动加强。2、阿托品(Atro)：M受体阻断药，为竞争性拮抗剂，单独用药对肠管无作用，可阻断M受体，对抗乙酰胆碱的M样作用，使肠管收缩幅度降低。3、肾上腺素(Ad

3、)：α、β受体激动剂，可激活α、β受体（主要是β2受体），α、β受体激动可产生与M受体激动相反的效应，表现为肠管舒张，小肠蠕动减弱。4、氯化钙（Bacl2）：①Ba2+进入细胞与钙调蛋白结合，使平滑肌收缩，②Ba2+可使细胞膜发生去极化。所以加入Bacl2肠管会发生强直性收缩，Bacl2并非作用于受体，所以阿托品不能对抗这一作用。  实验材料1．动物：家兔2．药品①5X10-4氯化乙酰胆碱       ②0.5％硫酸阿托品       ③0.1%盐酸肾上腺素       ④20％BaCL23、器材：RM6240多媒体化生物信号记录分析系统、PC80586计算机、张力传感器、保温式麦氏浴槽

4、、超级恒温水浴、“L”型通气钩、高位吊瓶、量筒、烧杯、培养器、氧气瓶、外科剪刀、眼科剪刀、眼科镊子、缝衣针、棉线、注射器、台式营养器。    实验方法    一、首先调试RM6240系统，使进入肌张力测定状态．    1．在主菜单中用鼠标选择<实验>中的<消化>，选择系统显示<平滑肌生理特性>。2．在界面右侧控制参数区选择<张力>,〈选择3g〉,扫描速度1.0s/div,确定信号输入，选择〈通道2〉，在工具菜单选择快速归零（空载时钩上无任何东西）。   3．在主菜单中选择〈示波〉，进入示波状态。   4．在主菜单中工具栏选择〈网格切换〉对背景网格进行切换为细格，并在选项中选择波形颜色红色

5、。      此时肌张力测试调试完毕。    二、调节仪器：    将超级恒温水浴温度调至38.5±0.5℃，向麦氏浴槽中加30ml台氏液，通入氧气(1～2个气泡／秒)并制备家兔肠管标本。   三、正式试验：  将肠管标本两端用缝针各穿一线，一端打一空结(约lcm小套)，另一端穿上长线打结，用眼科镊钳住空结固定于通气钩上，放入麦氏浴槽中，将另端长线的尽端打一空结，挂在张力换能器的小钩上，调节换能器高度，使前负荷为1g，稳定标本20分钟。  在主菜单下按键选择〈记录状态〉，先描记一段正常曲线，然后按下列顺序给药。    ①向麦氏浴槽内加入5X10-4MAch0.2ml同时用标记框在屏幕上作

6、给药标记，观察肠段反应。当反应最明显时，用暂停键，将计算机转入“示波状态”。用台氏液冲洗肠管3遍，稳定标本15分钟，加入下列药物。    ②将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后，向麦氏浴槽中加0．5％阿托品0．2ml并作标记，观察曲线变化，1分钟后加5X10-4MAch0．2ml并标记，观察肠段反应。将计算机转入“示波状态“后，用台氏液冲洗肠管3遍。稳定标本15分钟    ③将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后向麦氏浴槽中加0．01％Adr0.1ml并作标记，观察曲线变化。将计算机转入“示波状态”下冲洗肠管，稳定标本，加下列药物。    ④将系统重新转入“记录状态”，

7、描记一段正常曲线后，向麦氏浴槽中加20％BaCl2 0．2ml并作标记，观察曲线变化。    在主菜单下选择“结束实验”，激活工具栏，系统进入分析状态。   实验结果处理    在主菜单下分析项可选择区域测量、标记查询、开始反演、鼠标捕捉，测量后按工具栏中取消标志线，测出正常曲线，加Ach后，加阿托品回复后，加Adr后加BaCl2后肠管的收缩张力，分别求出加Ach、Adr、BaCl2所引起的张力变化值及Atro对Ach拮抗的张力回缩