生物化学套读课件9培训讲学.ppt

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1、生物化学套读课件9发酵热的测定(1)通过测量一定时间内冷却水的流量和冷却水的进出。Q发酵=GC(T2-T1)/VQ发酵-----------发酵热;C-------冷却水的比热G-----------冷却水的流量;T1T2------进出口冷却水的温度;V----------发酵液的体积(2)通过罐温度的自动控制，先使罐温达到恒定，再关闭自控装置，测量温度随时间上升的速率S。Q发酵=(M1C1+M2C2)S/V2021/8/92(3)根据化合物的燃烧值计算发酵过程中生物热的近似值。(4)测定微生物生长代谢中的耗氧量。通风（耗氧）发酵过程生成的发酵热数

2、量与过程所消耗的氧是成正比。QH=(0.106~0.124)QO2≈(1/10)QO2QO2-------------氧的消耗比速(mmolO2/g菌体.h)QH--------------发酵热生成的比速(kcal/g菌体.h)当通风发酵出现溶解氧不足时，有的的微生物能够进行厌氧反应。则出现:QH>>(0.106~0.124)QO22021/8/93二.pH的检测和控制pH值可用耐灭菌的玻璃电极和银-汞参比电极以及pH测量仪表的检测系统检测，可连续指示罐内酸碱变化。微生物反应过程中pH的变化具有一定规律。①在微生物细胞的生长阶段，由于所用的微生物菌

3、种不同，相对于接种后的起始pH值有上升或下降趋势②在生产阶段，一般反应液的pH值趋于稳定，维持在最适合产物形成的范围。③在微生物细胞的自溶阶段，随着培养基中的营养物质的耗尽，微生物细胞内蛋白酶的积累和活跃，微生物自溶，引起培养液中的氨基氮等的增加，致使pH值有上升。2021/8/94引起反应液pH值下降的主要原因有1.培养基中的碳/氮比例不当，碳源过多，特别是葡萄糖过量或者中间补糖过多或溶解氧不足，致使糖等物质氧化不完全，培养液中有机酸会大量积累，从而使pH值下降2.消泡油加得过多；3.微生物生理性物质的存在，使pH值下降。引起反应液pH值上升的主要

4、原因有：1.培养基中的碳/氮比例不当，碳源过多，氨基氮释放会使pH值上升。2.生理碱性物质存在。3.中间补料液中氨水或尿素等碱性物质的加入过多。2021/8/951.调节培养基中的原始pH值，或加入缓冲溶液制成缓冲能力强、pH值变化不大的培养基。2.可在反应过程中加入弱酸或弱碱进行pH值的调节，进而合理地控制发酵条件，也可通过调整通风量来控制pH值。3.进行补料，既调节了培养液的pH值，又可补充营养，增加培养液的浓度和减少阻遏作用，进一步提高产率。4.采用酸性铵盐作为氮源时，由于NH4+被利用后，剩下的酸根会引起发酵液中的pH值下降，在培养液中可加入

5、碳酸钙来调节pH值。5.根据pH值的变化可用流加氨水的方法来调节，同时又可把氨水作为氮源供给。6.以尿素作为氮源进行流加调节pH值。反应液中pH值的控制方法2021/8/96三.泡沫的影响和控制太多的泡沫给反应带来不利的影响1.使反应器的装填系数减少；2.造成大量逃液，导致产物的损失；3.泡沫“顶罐”有可能使培养基从搅拌的轴封渗出，增加了染菌的机会。4.由于泡沫的液位变动，以及不同生长周期微生物随泡沫漂浮，使微生物生长的环境发生了变化，影响了微生物群体的效果，增加了微生物群体的不均一性。5.影响了搅拌的正常进行，妨碍了微生物的呼吸。6.使微生物提早自

6、溶。7.为了控制泡沫，需加入消泡剂。对产物的提取不利。2021/8/97微生物反应过程产生泡沫的原因1.由外界引进的气流被机械地分散形成2.反应过程产生的气体聚结生成的泡沫培养基的物理化学性质对泡沫形成的表面现象起决定作用，此外，培养基的温度、酸碱度、浓度等对过程的泡沫也有一定的影响。培养基中的蛋白质含量越多，反应液的黏度也越大，越容易起泡，泡沫多而且持久稳定。2021/8/98泡沫的控制化学消泡消泡机理：1.消泡剂是表面活性物质，降低气泡表面张力，使气泡破裂2.降低机械强度（降低液膜的弹性）3.降低膜表面的黏度。天然油脂类、高级醇类、聚醚类、硅酮类

7、、氟化烷烃等生产中的一些用法：(1)通过机械搅拌，使消泡剂更易于分散在反应液中。(2)将消泡剂与载体一起使用，使消泡剂溶于或分散于载体中，比如用聚氧丙烯甘油作消泡剂时，以豆油为载体的消泡增效作用明显。(3)多种消泡剂并用可增强消泡作用。(4)使用乳化剂增强消泡剂的消泡作用，如消泡剂聚氧丙烯甘油用吐温-80为乳化剂的增效作用可提高1~2倍。2021/8/99机械消泡靠机械强烈振动和压力的变化，促使细胞破裂，或借助机械力将排出气体中的液体加以分离回收，从而达到消泡的作用。机械消泡的优点是不需在发酵液中加入其他物质，减少了由于加入消泡剂所引起的染菌机会和对

8、后续分离的影响。但是机械效果不如化学消泡迅速、可靠、不能根本上消除引起稳定泡沫的因素，而且它还需要一定的设备