微生物细菌鉴定试验汇总.ppt

《微生物细菌鉴定试验汇总.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、常用细菌生化反应触酶试验凝固酶试验胆汁溶菌试验氧化/发酵试验氧化酶试验苯丙氨酸脱氨酶试验硝酸盐还原试验糖发酵试验吲哚试验（靛基质试验）甲基红试验V-P（Voges-Proskauer）试验枸橼酸盐（或柠檬酸盐）利用试验克氏双糖铁（KIA）复合试验动力、吲哚及脲酶（MIU）复合试验原理：有触酶的细菌能催化过氧化氢生成水和初生态氧，继而形成氧分子出现气泡。触酶试验方法：用接种环取备检菌少许，置于洁净的玻片上，滴加3%的过氧化氢1～2滴，观察结果。试管法：用洁净的玻棒蘸取待检菌少许，置于装有3%过氧化氢的试管内，观察结果。触酶试验方法触酶试验结果应用：用于革兰阳性球

2、菌初步分属。注意事项：血浆凝固酶试验原理：有些细菌能产生血浆凝固酶，可以使人和动物血浆中的纤维蛋白原转化成纤维蛋白，从而使血浆凝固。方法：玻片法：取洁净玻片一张，加生理盐水两小滴于玻片两端，用接种环挑取待检菌落和对照菌均匀涂于盐水中，制成浓菌液，加兔或人血浆一滴于菌液中，观察结果。试管法：于3支试管中分别加入1:4稀释的血浆0.5ml，1支管加入待检菌肉汤培养物0.5ml,另两支分别加阴阳性对照菌肉汤培养物0.5ml，35℃培养3～4h后观察结果。应用：主要用于金葡菌的鉴定。血浆凝固酶试验方法(-)凝固酶(+)1）凝固酶试验玻片法测定结合型凝固酶；试管法测定分

3、泌型凝固酶。金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌呈现阳性反应。路邓葡萄球菌产生结合型凝固酶而不分泌游离型凝固酶,因而玻片凝固酶试验阳性、试管凝固酶试验阴性。玻片法少许菌落+兔血浆10s内出现凝集为阳性阳性：金葡、中间葡阴性：其它葡萄球菌试管法:试管2支，各加0.5ml兔血浆，取被检菌和阳性对照菌分别加血浆混匀，37℃水浴3~4h（3）种的鉴定(-)商品化的胶乳凝集试验(+)原理：胆盐、去氧胆酸钠和硫磺胆酸钠能选择性地溶解肺炎链球菌，胆汁降低细胞膜的张力-膜破损或裂解胆汁溶菌试验方法：平板法：取胆酸钠溶液一环，放在平板的菌落上，35℃30min观察结果。试管法：于0.

4、9ml培养了18～24小时的菌液中，加入取氧胆酸钠试剂0.1ml或牛胆盐0.2ml混匀，37℃水浴10～30min，观察结果。应用：主要用于肺炎链球菌与甲型链球菌。胆汁溶菌试验方法CAMP试验原理：B群链球菌能产生一种胞外因子——CAMP,它能增强金黄色葡萄球菌β-溶血毒素的活性，因此，在两菌交界处出现箭头样的溶血增强区。方法：取血平板一块，用产生β-溶血毒素的金葡菌在中央划一道线，将待检菌据此线0.5cm处垂直划线。35℃18~24小时培养，观察结果。应用：用于鉴定B群链球菌。CAMP试验方法3）CAMP试验无乳链球菌能产生CAMP因子，它可促进金黄色葡萄球

5、菌溶血能力，使其产生显著的协同溶血作用。本法可作为无乳链球菌的初步鉴定试验13涂片：G+C触酶试验链球菌肠球菌+－葡萄球菌、微球菌标本氧化酶(双糖)－(O)+(F)微球菌葡萄球菌凝固酶试验鉴定流程+－金葡表葡、腐生新生霉素表葡腐生SR14触酶试验：阴性链球菌属鉴定流程观察血平板上溶血环β-溶血环非β-溶血环Optochin、杆菌肽、胆七、高盐杆菌肽、CAMP、胆七、高盐非β溶血链球菌鉴定菌种Optochin敏感试验胆汁溶菌试验胆汁七叶苷试验肺炎链球菌S+—草绿色链球菌R——牛链球菌R—+氧化-发酵试验又称O/F试验或Hugh-Ldifson（HL）试验原理：细

6、菌分解葡萄糖对O2需求不同，氧化型：细菌只在有氧环境中分解葡萄糖;发酵型：细菌可在有氧、无氧环境中分解G;产碱型：细菌在有氧、无氧环境中都不分解葡萄糖;葡萄糖氧化/发酵试验硝酸盐还原试验某些细菌能还原培养基中的硝酸盐-亚硝酸盐、氨和氮。原理：原理：使硝酸盐还原的细菌能从硝酸盐中获得氧，使其成为亚硝酸盐或其它还原物。培养基中的亚硝酸基能与α-萘氨和苯磺酸形成红色的N-α-萘氨偶氮苯磺酸。若出现红色现象则说明该菌还原硝酸盐。硝酸盐还原试验方法：取一环待检菌接种到硝酸盐琼脂斜面上，35℃培养18~24小时，然后依次加入含α-萘氨和对氨基苯磺酸的试剂各1mL，30s后

7、观察结果。硝酸盐还原试验方法应用：有助于鉴别肠杆菌科、奈瑟菌属、布兰汉菌属、假单胞菌属等氧化酶试验原理：某些细菌具有细胞色素氧化酶，能将二甲基对苯二胺或四甲基对苯二胺试剂氧化成紫红色醌类化合物方法：滤纸法：用洁净滤纸蘸取菌落，加一滴试剂，观察结果菌落法：直接在菌落上加试剂，观察结果纸片法：使用试剂浸泡制成的试剂纸片，取足够的菌落，观察结果。应用：用于科别鉴定试验。氧化酶试验方法苯丙氨酸脱氨酶试验原理：有苯丙氨酸脱氨酶的细菌，可以使苯丙氨酸脱氨形成苯丙酮酸，苯丙铜酸与三氯化铁作用形成绿色化合物。方法：琼脂斜面法：将待检细菌接种到苯丙氨酸琼脂斜面上，35℃培养24

8、～48h，取出，将三氯化铁试剂4～5滴