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1、基因工程总复习1名词解释基因工程、遗传工程、DNA重组、基因克隆、基因操作2简要回答下列问题1）简述基因工程研究发展历史。2）简述基因工程研究的主要内容。3）说明基因工程的理论基石和技术基础。4）简述基因工程的主要应用领域。5）用5个词描述基因工程的过程。第1章概论1名词解释DNA变性；DNA复性；Tm值2简要回答下列问题1）举例说明浓缩DNA或RNA的方法。2）简述DNA与基因工程有关的主要特性。3）简要说明天然DNA的主要提取过程。第2章天然DNA的制备1名词解释限制性核酸内切酶；同裂酶；同尾酶；限制性核
2、酸内切酶星活性；限制性图谱；平末端；粘性末端；衔接头；连接子2简要回答下列问题1）基因工程中常用的酶有哪些？各有何的用途？2）何谓定向克隆？如何进行？3）说明限制性核酸内切酶产生Star活性的原因及其克服措施。第4章分子克隆工具酶1名词解释载体，克隆载体，表达载体,质粒，cccDNA(scDNA)，松弛型质粒，严谨性质粒，附加体，选择标记，转化子，重组子，cosmid，噬菌粒载体，YAC，PAC，BAC，MAC，基因打靶，定位整合平台，定位整合克隆载体，穿梭载体，结合型质粒，非结合型质粒，迁移作用，显性质粒，
3、隐蔽质粒，组织特异性表达载体，分泌型表达载体，诱导型表达载体，报告载体，反义表达载体，RNAi2简要回答下列问题1）按来源可将基因克隆载体分为哪几类？并说明各自的主要特点。2）作为克隆载体必须具备的主要条件是什么？3）作为表达载体必须具备的主要条件是什么？4）如何鉴定转化子、重组子和转基因生物？第4、5章分子克隆载体1名词解释PCR,RT-PCR,定量PCE,反向PCR,RACE,TAIL-PCR,巢式PCR2简要回答问题特殊PCR主要有那些?各自的原理是什么?如何设计PCR引物?3分析讨论试述PCR反应的原
4、理与应用.第6章PCR技术及其应用1名词解释SSH、RDA、DDRT-PCR、ESTs、酵母双杂交、cDNA文库、基因组文库2简要回答问题1）简述cDNA文库构建的原理与步骤2）简述基因组文库构建的原理与步骤3）简述酵母双杂交的原理与步骤3分析讨论试述分离和筛选目的基因的主要方法和原理.第7、8章目的基因制备与筛选策略一、名词解释受体细胞、感受态细胞、转化子、重组子、α-互补、目的重组子、转基因沉默、启动子、增强子、终止子、绝缘子、反义子、SD序列、外显子、内含子、融合蛋白、表达标签蛋白、包涵体、RNAi、M
5、icroRNA二、思考题1简述转基因的主要方法与原理。2简述在基因工程主要表达受体中提高表达效率的策略。3简述重组子的筛选与分子鉴定的主要方法和原理。4说明原核与真核生物基因表达调控的特点。5说明转基因沉默的机制与克服措施。第9章转基因及其表达1名词解释融合表达,融合蛋白,分泌表达,包涵体,转导,转化，转染，表面展示.2简要回答下列问题试述促进转基因在大肠杆菌中表达的策略。简述原核生物基因工程常用的载体和受体细胞。简述细菌基因工程的主要应用。简述外源基因在细菌中的主要表达形式及优缺点。第10章细菌基因工程1名
6、词解释YEp;YIp;YRp;YCp;营养缺陷型2简答题简要描述表面展示和酵母双杂交的原理。酵母基因工程的主要宿主有哪些?酵母基因工程的载体有哪些?各有和特点?酵母转基因的方法有哪些?为什么说酵母是一个非常重要的基因工程宿主?3分析和讨论如何在酵母中实现高效分泌表达?第11章酵母基因工程1名词解释植物整体转化,全能性,组成性表达启动子,组织转星星表达启动子,诱导表达启动子,花蕾浸泡转化法,清洁DNA转化,Ti质粒,卸甲Ti质粒,双元载体系统2解答题植物转基因的方法主要有那些?植物转基因的载体主要有那些?如何利
7、用农杆菌进行植物遗传转化?转基因植物的主要成就有哪些?3分析讨论题如何控制转基因在转基因植物中的表达?第12章植物基因工程1名词解释胚胎干细胞,限制性内切酶介导的整合,插入载体,替代载体,稳定表达，瞬时表达，脂质体转化，乳腺生物反应器2简答题进行动物细胞转基因的目的是什么?主要载体有哪些？转基因方法有哪些？怎样获得转基因老鼠？如何获得转基因蛙?转基因羊乳腺生物反应器是如何获得的?3分析讨论如何实现在高等动物中细胞中的高效稳定表达?第13章动物基因工程1名词解释（10个30分）2填空题（有的话20分）3载体填图
8、（10分）4匹配题（10分）5简答题（10分或30分）6设计题（20分）考试题型1.酵母2µ质粒复制原点2.3．4.5.6.1、启动子受体细胞NOS启动子农杆菌SV40早期启动子哺乳动物玉米ubiquitin-1启动子高等植物2、选出适合扩增图示序列之间DNA的PCR引物。3、载体或载体源受体细胞Ti质粒烟草pYES2牛腺病毒大肠杆菌pBR322酵母人类此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！ 感谢您的
