实验五-细菌的菌落计数教学提纲.ppt

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1、实验五-细菌的菌落计数平板分离法中的稀释涂布平板法，能有效分离纯化微生物外，还可用于测定样品中活菌数量。平板菌落计数法是将待测菌液经适当稀释，涂布在平板上；经过培养后在平板上形成肉眼可见的菌落。统计菌落数，根据稀释倍数和取样量计算出样品中细胞密度。由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，平板上形成的每个菌落不一定是单个细胞生长繁殖而成，有的可能来自2个或多个细胞。因此，平板菌落计数的结果往往比样品中实际细胞数低，这就是现在使用菌落形成单位（colony-formingunit，CFU）取代以前用绝对菌落

2、数来表示样品活菌含量的原因。二、实验原理三、实验器材和试剂酒精灯，记号笔，标签，火柴，灭菌培养皿菌种，平板，培养基1、编号：取无菌牛肉膏蛋白胨培养皿9套，分别用记号笔标明10-4、10-5、10-6（稀释度）各3套。另取6支盛有4.5ml无菌水的试管，依次标明10-1、10-2、10-3、、、10-6。2、稀释：用1ml无菌吸管准确吸取0.5ml已充分混匀的大肠杆菌培养液（待测样品），加入标有10-1字样的试管中，此为10倍稀释。将10-1试管在手掌或置震荡器上震荡，使菌液充分混匀。接着取0.5ml10

3、-1菌液精确地放入10-2试管中，此为100倍稀释……..其余依次类推。四、实验操作3、取样涂布：无菌吸取10-4、10-5、10-6稀释菌悬液各0.1ml放在不同稀释度编号的平板上，尽快用无菌涂布棒将菌液在平板上涂布均匀，平放于试验台上20-30min，使菌液渗入培养基表层内。4、培养：将平板倒置在37℃的恒温箱中培养24-48h五、实验报告稀释度10-410-510-6菌落数123平均123平均123平均CFU/ml简要说明六、思考题1、怎样判断稀释涂布平板计数数据是否可靠？需要掌握哪几个关键？此课

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