典型多媒体完整食用菌生物学试验ppt课件.ppt

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1、食用菌生物学实验张志瑾1.实验一母种培养基配制及棉塞制作一.实验目的1、掌握食用菌固化培养基的配制。2、学会棉塞的制作方法。二、基本原理食用菌母种分离、移接和斜面保存菌种都必须要制作相应的培养基，以备食用菌的培养、分离和保存之用。培养基是根据各种食用菌在生长繁殖过程中对营养物质需求制成的，它可供给食用菌的C源、N源、水分、各种无机盐及生长物质等。培养基的种类很多，本实验学习斜面培养基（PDA）制作。2.三.实验准备1.器具：  天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、漏斗架、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、棉花、线

2、绳、牛皮纸、皮筋、纱布、电炉、菜刀、菜板、小铝锅等。2．材料：  马铃薯、葡萄糖或蔗糖、琼脂、水。四、实验内容过程：制马铃薯滤液→融化琼脂→培养基的分装→棉塞的制作方法步骤：3.1．配方（PDA）：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15~20g，自来水1000ml，pH自然。2．制作方法（1）制滤液：  马铃薯刮去粗皮，去芽眼，切成碎块，称量后放锅中，加水1200~1300ml，将其煮沸20min。用双层纱布过滤，取1000ml滤液。4.（2）化琼脂：将滤液加热至将沸腾时加入琼脂，不断搅拌，注意控制火力不要使培养基溢出或烧焦。待琼脂完全融化后加入剩余原

3、料，并使其溶解（用热水补足水量）.（3分装:通过漏斗装置，趁热将培养基分装于试管中，装量约占试管高度的1/4（分装三角瓶，其5.装量以不超过其容积的一半为宜）。注意管口或瓶口不要沾染培养基。（4）制棉塞棉花以白色长绒脱脂棉为宜。根据试管口大小取棉，将其卷成棉塞，最好外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉塞塞入试管2/3。制做棉塞要求外表光滑，外包的纱不能折、松紧适宜等。6.A.正确;B.不正确7.（5） 包扎：管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。（6）、灭菌（7）、摆斜面（8）、存放冰箱

4、（4-6C）六、作业1、简述高压灭菌锅的使用。2、何谓灭菌？简述热力灭菌的类型和原理。3.何时加入琼脂？融化时注意什么问题？分装的技术要求有哪些？4.棉塞的作用有哪些和技术要求？菌种培养时管口堵胶塞或软木塞行吗？为什么？8.实验二、食用菌接种环境的消毒、灭菌与斜面接种一.目的及要求：1.掌握食用菌斜面接种方法及无菌操作技术。2、能正确分析自己的接种效果。二、基本原理：食用菌斜面接种是食用菌栽培过程中最基本的方法之一，也是食用菌制种工作最重要的一个环节。因为在食用菌栽培过程中，一旦斜面接种污染，后面的工作将无法进行，故斜面菌种的接种、分离和移接非常重要，

5、必须在严格无菌操作条件下进行，才能获得纯菌丝体（纯菌）。9.三、实验准备1.材料：空白斜面培养基（无菌检验）、母种等2.器具：酒精灯、接种环、火柴、尖头镊、酒精棉球、大镊子、接种箱、超净工作台、高锰酸钾、37％甲醛溶液、紫外灯、2%来苏水、标签纸等。四、实验内容1、 接种环境的处理2、母种的转管技术10.五、方法步骤1.接种环境的处理（1）接种箱的熏蒸：  先用2%来苏清洁接种箱内外，放入接种所需的物品，用甲醛熏蒸。每立方米空间一般用甲醛10ml，加半量高锰酸钾（5~7g）使甲醛氧化挥发。先将高锰酸钾放入接种箱内的容器中，再注入甲醛，立即产生强烈刺激的

6、甲醛气体。熏蒸25--30min。11.（2）超净工作台的消毒：用消毒液擦拭台面后放置接种所需物品，开启超净工作台上的紫外灯，照射20-30分后使用。2.母种的转管技术（1）手及菌种管的消毒：用肥皂洗手，再用75％酒精棉球擦手和菌种管表面，在酒精灯焰上略烧试管外的棉塞后，立即将菌种管放入接种箱内。（2）转管：两手从接种孔伸人接种箱内，酒精棉球擦拭接种环。左手持菌种管和斜面管，两支试管口对齐于火焰上方。右手持接种环或针和铲等，并将其在灯焰上干热灭菌，用小指及无名指拔掉棉塞，接种环冷却后伸入菌种管内取略豆粒大菌种块，迅速移人斜面培养基的中部。然后将棉塞在火

7、焰上烧一下，立即塞入试管口，旋紧棉塞。接种环不要触碰管口及管壁。接种后的试管应立即贴标签，注明菌种名称及接种日期，再进行适温培养。12.母种转管过程13.六、作业1、何谓无菌操作、消毒？消毒分哪几种类型？2、同学相互评比接种结果 分析自己接种成败的原因。14.实验三、食用菌母种制作分离技术一、目的要求1、明确食用菌无菌操作技术要点。2、掌握食用菌母种分离技术。二、基本原理：食用菌母种分离方法较多，但主要采用组织和孢子分离，所不同的是前者取子实体某块组织，后者取子实体的孢子经过培养形成的纯菌丝体（纯种）。三、实验准备1.材料：空白斜面培养基(空白培养无菌

8、).食用菌子实体等2.器具：酒精灯、接种环、火柴、尖头镊、酒精棉球、大镊子、接种箱、超净工作台