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1、专题3生物技术在其他方面的应用考纲考情三年11考 高考指数:★★★★★1.酶活力测定的一般原理和方法2.制备和应用固定化酶3.蛋白质的分离4.PCR技术的原理【知识梳理】一、酶活力的测定1.酶的活性:(1)概念:酶催化一定_________的能力。(2)表示方法——反应速度:单位时间内、单位体积中反应物的_______或产物的_______。2.影响酶活性的因素:_____________________等。3.探究温度和pH对酶活性影响的思路:(1)探究最适pH:在一恒定温度下,通过设置_______来确定。(2)探究最适温度:在一恒定的pH下,通过设置_________
2、来确定。化学反应减少量增加量温度、pH和酶的抑制剂pH梯度温度梯度二、酵母细胞的固定化1.固定化酶:(1)原理:将酶固定在_____________上,使酶既易催化,又利于_____,可以重复利用。(2)高果糖浆的生产反应原理:葡萄糖果糖颗粒状的载体回收葡萄糖异构2.固定化细胞技术:(1)方法:_______、化学结合法、___________。(2)操作流程:配制CaCl2溶液配制海藻酸钠溶液海藻酸钠溶液活化包埋法物理吸附法三、多聚酶链式反应扩增DNA片段1.PCR原理:DNA_____,即:复制解体降温2.PCR反应过程:变性90℃复性50℃引物延伸72℃DNA聚合酶3
3、.PCR反应特点:__________只能特异地复制处于_________之间的DNA序列,使这段固定长度的序列呈_____扩增。DNA聚合酶两个引物指数四、血红蛋白的提取和分离血红蛋白的释放粗分离透析相对分子质量较小凝胶色谱法SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳【盲点判断】1.(2009·江苏高考T3D)利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类的作用只是作为反应底物。 ()2.在制备固定化酵母细胞过程中必须进行无菌操作。 ()3.(2013·广东高考T28)PCR扩增与体内DNA复制不同,前者通过高温解开双链,后者通过解旋酶解开双链。 ()4.(2013·北京高考T5D)PCR呈指数扩增D
4、NA片段是因为上一轮反应产物可作为下一轮反应模板。 ()×√√√5.电泳过程中,蛋白质分子的移动速度与分子本身的大小和形状无关,而与所带电荷的差异有关。 ()6.凝胶色谱法分离蛋白质过程中,相对分子质量较大的蛋白质较相对分子质量小的蛋白质先洗脱出来。 ()×√【盲点判断点拨】1.利用固定化酵母细胞进行发酵时,糖类的作用不只是作为反应底物,同时也是酵母细胞进行呼吸作用的能源物质。2.固定化酵母细胞必须固定活细胞,其活性的维持需要适宜的环境因素(如温度、pH等),还需要尽量减少其他微生物的竞争,以最大限度地保证固定化细胞的使用寿命。3.PCR是体外DNA复制,利用高温解旋代替解
5、旋酶的作用,利用耐高温的TaqDNA聚合酶代替普通DNA聚合酶的作用。4.PCR扩增DNA片段时上一轮反应的产物可以继续作为下一轮反应的模板,使得两条引物之间的DNA序列呈指数增长。5.电泳分离蛋白质利用了不同蛋白质分子在形状、大小、带电性质等方面的差异导致的不同蛋白质在迁移方向、速度上的不同达到分离的目的。6.相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。【网络概览】名称原 理图 示包埋法将酶或细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中化学结合法利用共价键、离子键将酶分子或细胞相互结合,或将其结合到载体上物理吸附法通过物理吸附作用
6、,将酶或细胞固定在纤维素、琼脂糖、多孔玻璃等载体上考点一固定化技术1.固定化酶与固定化细胞技术的比较:2.直接使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较:直接使用酶固定化酶固定化细胞酶的种数一种或几种一种一系列酶制作方法化学结合固定化、物理吸附固定化包埋法固定化是否需要营养物质否否是反应底物各种物质(大分子、小分子)各种物质(大分子、小分子)小分子物质直接使用酶固定化酶固定化细胞缺点①对环境条件非常敏感,易失活②难回收,成本高,影响产品质量不利于催化一系列的酶促反应反应物不易与酶接触,尤其是大分子物质,反应效率下降优点催化效率高、耗能低、低污染①既能与反应物接触,又能与产物分离②可
7、以反复利用成本低、操作容易实例果胶酶固定化葡萄糖异构酶固定化酵母细胞【高考警示】固定化酵母细胞制备的三个注意事项(1)配制海藻酸钠溶液:要用酒精灯加热,边加热边搅拌,同时注意要用小火或间断加热。(2)海藻酸钠溶液与酵母细胞混合:要将溶化好的海藻酸钠溶液先冷却至室温,然后再加入已活化的酵母细胞,防止高温烫伤甚至杀死酵母细胞。(3)固定化酵母细胞:要以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中,不能注入溶液中,防止形成的凝胶珠形状不规则。【通关题组】1.(固定化技术方法的比较)下列说法不正确的是 (
