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《2015届高三一轮复习课件基因工程.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、一、基本工具二、操作程序三、应用四、蛋白质工程专题复习一基因工程基因工程基因工程基因拼接技术DNA重组技术==基因工程含义:(1)按照人们意愿,____改造生物遗传特性的技术(2)在__________水平进行操作(3)是在_________进行的人为基因重组定向DNA分子体外基因工程之第1节基本工具一、工具与工具酶“分子手术刀/剪刀”：______________“分子缝合针/针线”：______________“分子运输车/运载体”：______________________限制性核酸内切酶DNA连接酶质粒λ噬菌体的衍生物动植物病毒二、分子手术刀—
2、—限制性内切酶1、特点：2、结果：识别_________,________特定序列特定切点断开____________键磷酸二酯GAATTCGAATTCGA限制酶GAATTCGAATTCGAATTCGAATTCGAATTCGAATTC黏性末端平末端3、限制酶作用后产生的末端:_________和______黏性末端CCCGGGCCCGGGCCCGGGGGGCCC平末端4、来源：________生物原核限制酶存在于原核生物中的作用是什么?思考原核生物容易受到外源DNA的入侵限制酶的作用:切割外源DNA,使之失效保证自身的安全限制酶为什么不会剪切原核生物本身
3、的DNA?思考防御机制1.同一原核细胞内有限制酶,但没切割序列2.有酶且有切割序列,但甲基化酶的作用下把甲基转移到碱基上,让限制酶不能切割三、分子缝合针——DNA连接酶连接酶种类来源作用E.coliDNA连接酶T4连接酶大肠杆菌T4噬菌体只能连接黏性末端连接黏性末端、平末端DNA连接酶和DNA聚合酶异同？相同点——作用位点都在磷酸二酯键思考不同点：聚合酶：单个与片段之间（单个核苷酸与核苷酸片段）连接酶：片段与片段之间（核苷酸片段与核苷酸片段）DNA聚合酶DNA连接酶DNA连接酶DNA聚合酶：用于DNA的复制DNA连接酶：用于拼接DNA双链DNA连接酶连接
4、酶将_____DNA片段的两个缺口上同时连接双链______酶、________酶、________酶的作用位点都在_____________键注意限制DNA连接DNA聚合磷酸二酯四、分子运输车——基因进入受体细胞的载体1.常用载体:_____________________________质粒,λ噬菌体衍生物,动植物病毒基因工程使用的质粒一定要经过人工改造!(1)能在细胞内进行__________(2)有________切割位点,便于目的基因插入(3)具有______基因,供重组DNA和筛选(4)必须是安全的(5)载体大小适合自我复制限制酶标记拓展2.
5、载体的必备条件:注意基因工程之第2节基本操作程序基因工程的步骤：获取目的基因获取运载体构建运载体导入(受体细胞)基因复制基因表达用同种限制酶核心步骤二步骤三步骤四步骤一步骤一获取目的基因一.获取目的基因的工具:获取目的基因提取运载体二.获取目的基因的方法:(1)从基因文库中获取(2)用PCR技术扩增目的基因(3)人工合成法用限制酶步骤二步骤三步骤四步骤二构建表达载体运载体必须经人工改造1.表达载体=________+_______+_______+________基因工程的核心启动子终止子标记基因2.目的:目的基因在受体细胞内,能遗传稳定存在表达及发挥作
6、用目的基因启动子:位于基因的______,___________酶的结合部位,驱动基因转录mRNA终止子:位于基因的______,终止____标记基因:______是否导入成功首端RNA聚合尾端转录鉴定步骤三步骤四步骤一目的基因载体同一种限制酶T4DNA连接酶15ºC重组体载体自连目的基因自连目的基因与运载体结合步骤三导入受体细胞(1)农杆菌转化法(2)基因枪法(3)花粉管通道法显微注射技术感受态细胞法受体细胞不同导入方法不同植物动物微生物步骤二步骤四步骤一检测步骤步骤四目的基因的检测与鉴定步骤二步骤三步骤一DNA杂交一是否插入了目的基因二是否转录了mR
7、NA三是否翻译成蛋白质mRNA-DNA杂交抗原-抗体杂交一分子水平检测二个体水平检测基因工程之第3节应用（一）动植物基因工程的成果外源基因类型及举例成果举例植物基因工程成果抗虫转基因植物抗病转基因植物抗逆转基因植物改良品质的转基因植物动物基因工程成果提高生物速度的转基因动物改善畜产品品质的转基因动物生产药物的转基因动物作器官移植供体的转基因动物第3节基因工程的应用（二）基因工程与医药卫生基因工程药品——胰岛素基因工程药品——干扰素基因工程药品——生长激素基因诊断基因治疗（二）基因工程与医药卫生利用基因工程方法制造“工程菌”生产药物:__________,
8、______,______,_______细胞因子抗体疫苗激素化学本质:____
