生理实验课件：机能实验学绪论.ppt

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1、机能实验学绪论机能学实验是研究生物正常功能、疾病发生及药物作用机制的综合性实践课程，它以动物实验为主要手段，采用离体和在体实验的实验方法，从整体和器官水平上研究生物的生理功能；复制临床常见疾病的动物模型，研究疾病发生、发展规律以及药物的作用及其机制，将生理学、病理生理学及药理学实验有机融合，形成以器官系统教学为主线的机能学实验。机能学实验的目的和任务机能学实验的目的和任务是通过验证性实验使学生掌握机能学常用的基本实验技术，验证所学的基本理论知识；通过设计性实验，使学生了解机能学实验研究的设计思路，培养学生运用知识能力、创新能力和团结协作精神，充分发挥学生主观能动性；通

2、过综合性实验使学生在实验设计、实验过程的观察和结果分析中进一步提高独立分析问题和解决问题的能力，培养学生的初步科研意识，为今后从事科学研究打下坚实的基础。考核方式实验课成绩根据学生的平时表现、实验技能的掌握情况、实验报告或实验论文以及实验操作和实验理论考核等综合评价。实验一制备坐骨神经-腓肠肌标本【目的和原理】由于蛙类的一些基本生理活动规律与温血动物相似，并且维持其离体组织正常活动需要的理化条件比较简单，易于建立和控制。因此，在实验中常用蟾蜍的坐骨神经-腓肠肌标本来观察和研究兴奋与兴奋性、刺激与肌肉收缩等基本的生理现象和过程。兴奋性兴奋的传布兴奋收缩耦联过程兴奋-收缩

3、耦联——三个主要步骤：①肌膜电兴奋的传导②三联管处的信息传递③肌浆网（纵管系统）中Ca2+的释放肌膜AP沿横管膜传至三联管↓终池膜上的钙通道开放终池内Ca2+进入肌浆↓Ca2+与肌钙蛋白结合引起肌钙蛋白的构型改变↓原肌凝蛋白发生位移暴露出细肌丝上与横桥结合位点↓横桥与结合位点结合激活ATP酶作用,分解ATP↓横桥摆动↓牵拉细肌丝朝肌节中央滑行↓肌节缩短=肌细胞收缩兴奋-收缩（肌丝滑行）耦联【实验对象】蟾蜍【实验器材和药品】蛙板、玻璃板、普通剪刀、手术剪、眼科剪、镊子、眼科镊、探针、玻璃分针、瓷盘、滴管、培养皿、锌铜弓、任氏液。锌铜弓用金属锌和铜铆接而成，锌铜弓在极性溶

4、液中形成回路时，锌与铜两极产生约0.5~0.7V的直流电压，因此可用来刺激神经和肌肉，使神经或肌肉兴奋。【实验步骤】破坏脑和脊髓　取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。左手握住蟾蜍，用食指按压其头部前端，拇指按压背部，使其脊柱伸直，右手持探针从枕骨大孔处垂直向下刺入，然后转向前刺入颅腔，左右搅动，充分捣毁脑组织。然后将探针抽回至进针处，再转向后刺入椎管，反复上下提插捣毁脊髓。此时如蟾蜍的四肢松驰无力，呼吸消失，表明脑和脊髓已破坏完全，否则应反复按上述方法进行操作剪除躯干上部和内脏　在骶髂关节水平上０.5cm—1cm处剪断脊柱，左手握住蟾蜍的后肢，将骶骨向上，使蟾蜍头和内脏自然

5、下垂，右手持剪刀，沿脊柱两侧剪除一切内脏和头胸部，留下后肢、骶骨、脊柱以及紧贴于脊柱两侧的坐骨神经。剥皮　左手握紧脊柱断端（注意不要握住或压迫神经），右手捏住其上的皮肤边缘，用力向下剥掉全部后肢的皮肤。把标本放在盛有任氏液的培养皿中。将手及用过的剪刀、镊子等全部手术器械洗净，再进行下面的步骤。分离两腿　用镊子夹住脊柱将标本提起，背面朝上，剪去向上突起的尾骨（注意勿损伤坐骨神经）。然后沿正中线用剪刀将脊柱和耻骨联合中央剪开两条大腿，并完全分开。将两条腿浸入盛有任氏液的培养皿中。制备坐骨神经腓肠肌标本游离坐骨神经　将腿标本腹面朝上放置，用玻璃分针沿脊柱旁游离坐骨神经。再沿

6、坐骨神经沟（股二头肌和半膜肌之间的裂隙处），找出坐骨神经的大腿段。用玻璃分针仔细剥离，剪断坐骨神经的所有分支，然后剪断脊柱，保留约1cm与坐骨神经相连处，并将神经一直游离到腘窝。完成坐骨神经小腿标本　将游离干净的坐骨神经搭在腓肠肌上，在膝关节周围，剪掉全部大腿肌肉，并用普通剪刀将股骨刮干净，然后在股骨中部剪去上段股骨，保留1cm的股骨，剩下的部分就是坐骨神经小腿标本。完成坐骨神经腓肠肌标本　将上述坐骨神经小腿标本在跟腱处穿线结扎后，于结扎处远心端剪断跟腱。游离腓肠肌至膝关节处，然后从膝关节囊将小腿其余的部分剪掉，这样就制得一个具有附着在股骨上的腓肠肌并带有支配腓肠肌的

7、坐骨神经的标本。检验标本兴奋性用经任氏液湿润的锌铜弓轻轻的接触一下坐骨神经，如腓肠肌发生迅速而明显的收缩，则表明标本的兴奋性良好，即可将标本放在盛有任氏液的培养皿中，以备实验用。实验要求：掌握制备坐骨神经腓肠肌标本的技能，并获得兴奋性良好的一对标本。【注意事项】操作中勿污染，压榨，损伤，过度牵拉神经和肌肉，动作要轻，避免损伤神经。操作中经常给神经和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以保持其始终有正常的兴奋性。制备好的神经肌肉标本为何要放在仁氏液中？用锌铜弓刺激神经，为何会引起肌肉收缩？坐骨神经-腓肠肌标本可完成哪些方面的实验。思考题实验二骨骼肌收缩的影响