基因工程习题与考纲.doc

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1、第一章1、基因工程的含义及其基本环节包括哪些2、基因工程的基本条件及各自的作用有哪些3、基因工程的基本技术策略及其具体实施方案第二章1、限制修饰系统及其在基因工程中的应用2、限制性内切酶含义及其类型3、限制性内切酶II为何是DNA重组技术中最常用的工具酶?它具有哪些特性?4、同切点酶、同尾酶的含义及其在基因工程中的应用5、限制性内切酶的星活性及其在使用过程中如何加以避免6、DNA分子的完全酶切消化和部分酶切消化含义及其应用7、DNA连接酶含义及其催化的连接反应特点有哪些8、大肠杆菌DNA聚合酶I有哪些不同的酶活力特性,各有何利用价值?9、Klenow

2、片段和DNApolyI有何异同10、为什么说反转录酶是一种特殊的DNA聚合酶,其主要作用是什么11、末端脱氧核昔酸转移酶、T4多核昔酸激酶以及碱性磷酸酶的含义及其在基因工程中的应用12、核糖核酸酶H的含义及其应用13、如何正确利用各种核酸酶从mRNA获得双链cDNA第三章1、载体的含义及其功能类型2、克隆载体的基本条件及其主要类型3、根据质粒在宿主细胞中的拷贝数,可将质粒的复制方式分为哪些类型,在应用上有何区别?4、质粒的不相容性的含义5、天然质粒往往需要哪些方面的改造才能成为合适的克隆载体6、指出常用质粒载体pBR322与PUC18之间的差异,并列

3、出pUC18载体的优点7、TA载体的含义及其应用8、入噬凿体载体类型及其应用上的差别9>cosmid载体由哪些要素组成,如何使用该载体?10、表达载体的含义及其主要类型11、原核表达载体包括哪些表达元件,各有何作用12、穿梭载体的含义,为什么说真核表达载体多为穿梭载体13、Ti质粒表达载体的含义以及双元Ti质粒表达载体的使用程序14、RNAi的含义以及转基因RNAi载体和VIGS载体结构上有哪些不同,第四章1、凝胶电泳的含义及其影响因素2、聚内烯酰胺凝胶电泳与脉冲电场凝胶电泳的含义以及二者之间的主要差异3、核酸分子杂交的含义及其意义4、如何采用切曰平

4、移法均匀标记探针5、在核酸分子杂交中,非放射性标记物有哪些,如何进行检测6、Southern杂交与Northern杂交的含义及其异同点7、PCR技术原理及其基木成分与基木过程如何8、PCR平台效应及其影响因素9、引物的含义与设计原则1()、逆转录PCR、锚定PCR、反向PCR、巢式PCR、原位PCR、多重PCR、不对称PCR、实时定量PCR的含义11、Sanger双脱氧链终止法测序的基本原理12、基因定点诱变的含义以及重组PCR定点突变的具体过程13、酵母单杂交系统、凝胶阻滞试验、DNAasel足迹试验第五章1、简并序列的含义以及如何减低一段氨基酸序

5、列的简并度2、基因文库的含义及两种不同基因文库类型之间的区别3、构建基因组文廉时为何要考虑基因组信息的可重建性以及如何才能满足这-•条件。4、入噬菌体载体文库的构建应包括哪些步骤,XDNA离体包装蛋白是怎样制备的,为什么包装蛋白要分成两个部分5、已知某一个DNA的部分核廿酸序列,如何从含有百万个重组克隆的基因组文库中筛选一个含有特定目的基因的重组克隆?6、如果已知了某一蛋白的氨基酸序列,请设计几种方法分离该蛋白质的eDNA序列。7、具体描述一种根据基因差异表达获得目的基因的方法第六章1、DNA体外重组的含义2、如何将一平末端的DNA与BamHI形成的

6、粘性末端连接3、某一质粒载体有Tet*■和amp1■的表型,在Amp*■中有一个EcoRI的酶切位点,先用EcoRI切割载体进行基因重组,那么如何用抗性变化筛选含有插入片段的重组体第七章1、启动子、增强子、沉默子、终止子、衰减子、核基质结合区以及SD序列2、启动子和增强子有哪些异同点3、能影响染色体上DNA结构的三种顺式作用元件是什么,能影响基因转录起始的顺式作用元件是哪些,影响基因转录终止的顺式作用元件是哪些4、什么是密码子的偏爱性,在外源基因的表达中有什么应用5、按功能和作用方式分,启动子可以分为儿种类型,每一种类型的启动子各有什么特点第十章1、

7、基因漂移、生物安全性评价、实质等同性原则、个案分析原则基因漂移:指转基因生物中的目标基因,在生物的个体、种群甚至是物种间自发移动的过程。生物安全:指转基因技术及遗传修饰体对动植物、人类健康及遗传资源和环境造成不利影响甚至危害的安全问题。实质等同性原则:是安全评价的起点,是指以有安全食用历史的传统食品为基础,要求转基因食品和它所替代的传统食品至少要同样安全。个案分析原则:个案分析原则主要针对不同基因、不同转化事件、不同环境条件的个案分析。2、什么是生物安全管理?目前有哪些管理模式,各有什么特点转基因技术及遗传修饰体会对动植物、人类健康及遗传资源和环境造

8、成不利影响甚至危害,为了预防和控制这些不利影响采取的一系列措施就是生物安全管理。%1宽松型的管理模式:以美国

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