植物提取物的检测方法.doc

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1、“零”添加纯植物提取-—巴科医药植物提取物的检测方法目前植物提取物的检测方法常见的有五种，分别为：高效液相色谱分析法(HPLC)、紫外吸收光谱分析法(UV)、薄层色谱分析法(TLC)、气相色谱分析法(GC)和原子吸收光谱分析法(AAS)O每一•种方法的作用原理和应用都各不相同。其中，HPLC和UV为标准植物提取物的常用检测方法，TLC被用于比例植物提取物的检测，GC用来检测挥发性液体或汕类，AAS)IJ于提取物重金属含量的检测。1、高效液相色谱分析法(HPLC)HPLC全程是HighPerformanceLiquidChrom

2、atography(高效液相色谱法)，乂称''高压液相色谱〃、''高速液相色谱〃、''高分离度液相色谱〃、''近代柱色谱〃等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法巳成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。高效液相色谱法(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的一种分析方法。近年来，在保健食品功效成分、营养强化剂

3、、维生素类、蛋白质的分离测定等应用广泛。世界上约有80%的有机化合物可以用HPLC来分析测定°1.1高效液相色谱分析的流程由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统，然后输出，经流量与压力测量之后，导入进样形。被测物由进样器注入，并随流动相通过色谱柱，在柱上进行分离后进入检测容，检测信号由数据处理设备采集与处理，并记录色谱图。废液流入废液瓶。遇到复杂的混合物分离(极性范围比较宽)还可用梯度控制器作梯度洗脱。这和气相色谱的程序升温类似，不同的是气相色谱改变温度，而HPLC改变的是流动相极性，使样品各组分在最佳条件下得以分离。1.2高效液相

4、色谱的分离过程同其他色谱过程一样，HPLC也是溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次交换过程。它借溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差别使不同溶质得以分离。开始样品加在柱头上，假设样品中含有3个组分，A、B和C,随流动相一起进入色谱柱，开始在固定相和流动相之间进行分配。分配系数小的组分A不易被固定相阻留，较早地流出色谱柱。分配系数大的组分C在固定相上滞留时间长，较晚流出色谱柱。组分B的分配系数介于A,C之间，第二个流出色谱柱。若一个含有多个组分的混合物进入系统，则混合物中各组分按其在两相间

5、分配系数的不同先后流出色谱柱，达到分离之日的。不同组分在色谱过程中的分离情况，首先取决于各组分在两相间的分配系数、吸附能力、亲和力等是否有差异，这是热力学平衡问题，也是分离的首要条件。其次，当不同组分在色谱柱中运动时，潜带随柱长展宽，分离情况与两相之间的扩散系数、固定相粒度的大小、柱的填充情况以及流动相的流速等有关。所以分离最终效果则是热力学与动力学两方面的综合效益。2、紫外吸收光谱分析法（UV）UV检测法也是植物提取物常用的检测方法之一，UV是英文名称ultraviolet的缩写，UV检测也称紫外检测法、紫外光谱检测法。UV

6、检测法主要用于配含物组成及其稳定常数的测定，定量分析结构分析定性分析应用范围定义紫外光谱是分子中某些价电子吸收了一定波长的电磁波，由低能级跃近到高能级而产生的一种光谱当分子中的电子吸收能量后会从基态跃迁到激发态，然后放出能量（辐射出特征谱线），同到基态；而辐射出特征普线的波长在紫外区中就叫做紫外光谱（UV）紫外光来自于一个水银紫外灯，水银紫外灯是通过蓝宝石窗口以及过程流来获取的。除了特定的紫外波长，狭窄的波段通过紫外过滤器阻塞了所有的传输光线。这些紫外光能够通过过滤岩以及测试探测器只记录特定的紫外波长。紫外光宜接通过靠近灯的相

7、同规格的紫外过滤器。参考探测器置于过滤器后边，可以测试出当前的紫外强度。参考探测器信号用于弥补由于灯管老化，极端温度变化等引起的紫外资源强度的起伏变化。通过测量及参考探测器给到的光电流结果将会通过传送器进行放大,修改，处理。传送揣实时的提供经计算后的测量结果，且能够向处理控制系统发送多个输出值。2.1UV定性分析在有机化合物的定性分析中，紫外一可见光谱适用于不饱和有机化合物，尤其是共轨体系的鉴定，以此推断未知物的骨架结构。此外，可配合红外光谱、核磁共振波谱法和质谱法进行定性鉴定和结构分析，因此它仍不失为是一种有用的辅助方法。一

8、般有两种定性分析方法，比较吸收光谱曲线和用经验规则计算最大吸收波长入max,然后与实测值进行比较。结构分析？？结构分析可用来确定化合物的构型和构象。如辨别顺反异构体和互变异构体。2.2UV定量分析紫外一可见分光光度定量分析的依据是Lambert-Beer定律，即在一定波长处被