临床生化报告的审核ppt课件.ppt

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1、临床生化检验反应原理及报告的审核成都市第一人民医院检验科付虎主要内容常见的生化反应原理检验报告审核普遍存在的问题检验报告审核的建议总结终点分析法（平衡法）连续监测法比浊测定法一、常见的生化反应原理终点分析法是基于反应达到平衡时反应产物的吸收光谱特征及其对光吸收强度的大小，对物质进行定量检测分析方法。反应混合物进行一定时间反应后，达到平衡终点，即在显色反应处于稳定阶段时，监测其颜色对光的吸收强度，以此计算待测物浓度。分为一点、两点终点法终点分析法一点终点法一点终点法：当样品和试剂混合后，待测物与试剂的物理化学反应达到终

2、点时，即在时间-吸光度曲线上吸光度不再改变时选择一个终点吸光度值，计算待测物质的浓度。该法要求试剂本底颜色要深，该法具有代表性的试验有：总蛋白、白蛋白、镁测定TP反应曲线二点终点法：一般是用双试剂，在被测物反应或指示反应尚未开始时，选择第一个吸光度，在反应到达终点或平衡时选择第二个吸光度，此两点吸光度之差用于计算结果。该方法的优点是可以消除样品、试剂的颜色、浊度以及一些干扰物质的影响。两点终点法Cre反应曲线A+R1+R2C+D(检测物)测定底物的消耗或产物生成的速度的化学方法称为连续监测法（又称动态分析法、速率法或动

3、力学法）。在反应速度恒定期（零级反应期）来连续观察和记录一定反应时间内底物或产物量的变化。以单位时间酶促反应初速度计算酶活力的大小和代谢物的浓度。连续监测法（速率法）酶促反应进程曲线单位时间的吸光度变化量是一致的。利用线性反应期，计算出单位时间的吸光度变化ΔA/min，来计算酶活性。AMY反应曲线ALT反应曲线通过检测物质对光的散射或透射强度来测定物质的方法称比浊法。比浊法可分为化学比浊法和免疫比浊法，免疫比浊法又分为透射比浊和散射比浊。全自动生化仪常用透射比浊法，常用于特种蛋白测定。其工作曲线为抛物线。比浊测定法比浊

4、测定法注意事项：抗原大大过剩，可出现可溶性复合物，造成误差。应维持反应管中抗体始终过剩。易受到脂血的影响。二、报告审核中的普遍问题未对结果进行认真审核对检测仪器或试剂方法学不够了解专业知识欠缺，工作经验不足对仪器检测的结果及室内质控结果过于相信三、报告审核的建议结合临床资料审核结合分析项目间的内在联系审核（专业知识）结合影响检验结果因素审核检验项目的方法学和线性检验标本的影响检验仪器性能影响结合当日检验结果总体趋势审核结果结合临床资料结合病人的性别、年龄、临床诊断、其他检查结果审核例：某病人检测的TP为110g/L，该

5、标本没有脂血等影响检测结果的因素，球蛋白升高。临床诊断：多发性骨髓瘤例：普外科病人血钾6.89mol/L，1小时后复查2.38mol/L,与临床沟通后，病人正在血透。图书推荐：《检验与临床沟通案例200例》检验项目间的内在联系各检测参数间存在大小、比例、逻辑关系例：HDL-C+LDL-C﹤TC、DB﹤TBCK-MB﹤CK(MM+MB+BB)α-HBDH（LDH1，LDH2H亚基）﹤LDH(H+M)CREA与CYC一致影响检验结果的因素试剂线性范围：了解检验项目试剂的线性范围，对超过或低于范围的项目，必须进行相应的减量稀

6、释或增量后重新测定。线性范围在实际工作中，用连续监测法会遇到检验结果为0或者负值的情况，此时不能盲目相信该结果低就出具低值报告，应查看其反应曲线例：某病人的尿液AMY检测结果为0U/L其反应曲线如下图：AMY反应曲线AMY反应曲线分析分析：由于测定物质浓度过高处理：对测定物质进行十倍左右的稀释再测定，直到反应曲线恢复正常结果才可靠影响检验结果的因素检测项目的方法学：要了解该项目试剂采用的方法学：例：某病人在测定心肌酶谱时，其CK:246U/L、CK-MB:286U/L，标本无溶血等因素影响,其结果中CK-MB﹥CK检测

7、项目的方法学分析：CK是由M和B两类亚基组成的二聚体，其构成为CK-MB(心型)约占0-3%、CK-MM(肌型)约占97-100%、CK-BB（脑型）约占0-1%检测项目的方法学CK-MB采用的检测方法为免疫抑制法原理:正常人体中，CK同工酶中CK-MM﹥CK-MB﹥CK-BB,其中CK-BB含量极少，可忽略。免疫抑制法正是建立于忽略CK-BB的基础上。采用抗体抑制其M亚基活性，使CK-MM失去活性，而CK-MB失去一半的活性。单测定B亚基的活性，其结果×2即为CK-MB活性检测项目的方法学原因分析：由于在患轻度或中度

8、脑损伤、脑血管意外及脑手术后、新生儿产程窒息造成脑组织发生实质性损害、癌症患者的病人中，CK-BB会升高，这时该方法测定的CK-MB的活性相当于是CK-MB+2CK-BB的活性之和，造成CK-MB活性假性升高检验标本的影响标本脂血会使反应浊度增加，透光度下降，吸光度增加，从而造成检验结果不准确。如TP、TG、UA显著增高，GGT显