前列腺疾病患者血清前列腺特异性抗原检测方法探究

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1、前列腺疾病患者血清前列腺特异性抗原检测方法探究  摘要:前列腺特异杭原(PSA)作为检测前列腺癌肿瘤标记物之一,在国内已日益受到重视,本文从PSA的生物学特性及检测方法包括酶联免疫吸附法(ELISA)、放射免疫测定法(RIA)、化学发光免疫分析法(LICA)及电化学发光免疫分析法(ECLIA)的基本原理及方法学特点和PSA在前列腺癌诊断中的意义作一简要综述。PSA也是最有用的细胞免疫化学标志,它确认某种组织是否来源于前列腺的敏感性和特异性都高达100%。Abstract:Asoneofthedetectionoftumormarkerforpros

2、tatecancer,prostatespecificantigen(PSA)hasbeenpaidmoreandmoreattentionathome.ThisarticlebrieflyintroducesthebiologicalcharacteristicsandthebasicprincipleandthemethodcharacteristicsoftestmethodsofPSAincludingenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA),radioimmunoassay(RIA),chemicallu

3、minescenceimmunoassay(LICA)andElectrochemiluminescenceimmunoassay(ECLIA),andthesignificanceofPSAinthediagnosisof9prostatecancerisalsoreviewed.PSAisthemostusefulimmunocytochemicalmarker,whosespecificityandsensitivitytoconfirmwhetheracertaintissueisfromprostateareashighas100%.关键

4、词:前列腺特异抗原;酶联免疫分析法;放射免疫分析法;化学发光免疫分析法;电化学发光免疫分析法Keywords:prostatespecificantigen;enzymeimmunoassay;radioimmunoassay;chemiluminescenceimmunoassay;chemiluminescenceimmunoassay中图分类号:R446文献标识码:A文章编号:1006-4311(2013)26-0320-020引言前列腺特异抗原(ProstateSpecificAntigen,PSA)是由前列腺腺泡和导管的上皮细胞分泌的一种

5、单链糖蛋白,在功能上属于类激肽释放酶的一种丝氨酸蛋白酶,参与精液的液化过程,是临床常规用于前列腺良性与恶性疾病诊断与鉴别诊断及前列腺癌患者术后随访的重要指标。9PSA是主要由前列腺上皮细胞产生的蛋白分解酶,正常情况下被分泌入前列腺液或精液中,以有活性的游离形式(f-PSA)存在,血清中的PSA主要以结合形式存在,通常以f-PSA与结合PSA的和即总PSA(t-PSA)代表血清总的PSA水平。血清PSA测定精确度高、稳定、重复性好,而且是无创的,有助于前列腺癌早期诊断,监测治疗反应及判断预后。也可用于高危人群(50岁以上男性)前列腺癌的普查,是目前公

6、认的前列腺癌的肿瘤标志物,与其他肿瘤标志物相比,具有高度敏感性,多数文献[1,2]报道敏感性达90.0%以上。1980年Kuriyama等[3]报道了PSA的免疫测定法,并在前列腺癌(Prostatecancer,PCa)患者血清中测到了PSA。现在PSA抗原的检测常用的方法是酶联免疫吸附法(ELISA)、放射免疫测定法(RIA)、化学发光免疫分析法(LICA)及电化学发光免疫分析法(ECLIA)。1酶联免疫吸附法ELISA法是一种酶联免疫技术。用于检测包被于固相板孔中的待测抗原(或抗体)。即用酶标记抗体,并将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使

7、抗原抗体反应在固相载体表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除,最后通过酶作用于底物后显色来判断结果。结合了放射性同位素的敏感性和免疫反应的特异性,是一个可靠、经济和特异的测定方法。常用的ELISA法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。测定抗原的,主要有以下方法。1.1双抗体夹心法9本法首先是用特异性抗体包被于固相载体,经洗涤后加入含有抗原之待测样品,如待检样品中有相应抗原存在,即可与包被于固相载体上的特异性抗体结合,经保温孵育洗涤后,即可加入酶标记特异性抗体,再经孵育洗涤后,加底物显色进行测定,底物降解的量即为欲

8、测抗原的量[4]。这种方法欲测的抗原必须有两个可以与抗体结合的部位,因为其一端要包被于固相载体上的抗体作用,而另一端则要与

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