液相糖测定的方法.doc

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1、(一)梨1．3．1色谱条件色谱柱为上海资生堂公司生产的氨基柱(4．6mmx250mm)，填料直径为5μm；柱温50oC；流动相为乙腈一水(体积比为70：30)溶液，使用前用0．45μm滤膜抽滤；流速1．0mL·min-1～；ELSD检测器漂移管温度80℃，载体为高纯N2，流速2．0mL·min-1；进样量10μL。1．3．2样品制备供试样品为河北‘黄冠梨’，烟台‘巴梨’，睢宁‘丰水梨’，安徽‘砀山酥梨’果实。样品削皮去核，称取混合果样2g，加入20mL超纯水研磨，转移至离心管中，于4℃、20000g离心15min，取上清液，用0．45μm微孔膜过滤后进行色谱分析。取6份样品，重复

2、3次。1．3．34种可溶性糖标准液和混合标准液的配制各组分糖标准液的配制：分别称取各组分糖1．0000g，溶解于少量超纯水中，定容至50mL，转移至试剂瓶中，置于4℃冰箱备用。混合标准液的配制：准确吸取各组分适量的标准液混合，用超纯水定容，转移至试剂瓶中，置于4℃冰箱中保存备用。（二）莲雾1．3．2色谱条件Carbohydrate柱(4．0μm，4．6mm×250mm，Waters)，流动相为乙腈／水=90／10(V／v)，流速1．5mL／min，柱温45℃，进样量20μL，Waters1525泵，Wa—ters2414示差检测器。以保留时间定性，峰面积定量。1．3．3样品的制备

3、具体步骤如下：莲雾果肉冰浴研磨后称取5．0g，样品加人10mL,80％乙醇，35℃下提取30min，4000r／min离心10min，取上清。残渣重复提取3次，合并上清液定容至25mL，取5．0mL于40℃旋转蒸发仪蒸干后，用5．0ml，超纯水溶解。进样前用0．45μm微孔滤膜过滤。1．3．4糖标准溶液的配制准确称取0．5000g经干燥至衡重的果糖、葡萄糖和蔗糖，转移至25mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，得质量浓度为20mg／mL的混标母液，逐级稀释至0．625，1．25，2．5，5，10mg／mL的标准溶液。上机进样前用0．45μm微孔滤膜过滤。（三）甘薯可溶性糖的提取：参考

4、GB／T22491—2008和GB／T22221—2008的方法并做适当修改．首先，准确称取2．0g甘薯粉放入150mL的烧杯中，在烧杯中加入约40mL80％的乙醇溶液；然后用薄膜将烧杯口密封并在45℃下磁力搅拌2h，放至室温后用容量瓶定容至50mL；离心后取约1．5mL上清液用0．45μm滤膜过滤，所得滤液移至样品瓶中用于测定．