几种石斛粗提物抗凝抗血栓作用对比探究

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1、几种石斛粗提物抗凝抗血栓作用对比探究  摘要:目的:对比研究几种石斛粗提物的抗凝和抗血栓作用。方法:采用毛细管法测定凝血时间和胶原-肾上腺素致体内血栓形成法,分别测定几种石斛粗提物的抗凝、抗血栓作用。结果:除报春石斛和翅梗石斛外,所有给药组均能显著延长小鼠全血的凝血时间,而报春石斛有一定延长趋势;除报春石斛和翅梗石斛外,所有给药组均能显著对抗胶原-肾上腺素诱导小鼠的体内血栓形成,使动物死亡率明显降低,报春石斛和翅梗石斛仅有一定作用趋势。结论:除报春石斛和翅梗石斛外,鼓槌石斛、长距石斛、球花石斛、玫瑰石斛、叠鞘石斛、黑毛石斛、流苏石斛、金钗石斛均有较好的抗凝、抗血栓作用。关键词:石斛

2、粗提物;抗凝;抗血栓中图分类号:R285.6文献标识码:A文章编号:1007-2349(2012)12-0061-02石斛属(DendrobiumSw.)是兰科植物中的第二大属,全球共有大约10007种,我国有74种2变种,主要分布在华南及西南地区,尤其以云南南部为多[1]。石斛是业内外人士都熟知的常备药品的必需原料,应用于脉络宁注射液、石斛夜光丸、通塞脉片、石斛散等数十种中成药。脉络宁制剂具有活血化瘀的功能,是利用石斛的“除痹”功效,笔者选择简单、经济、快捷的小鼠凝血时间测定,胶原-肾上腺素致体内血栓形成,观察与比较几种石斛粗提物的抗凝、抗血栓作用,初步评价其对心血管活性。1实验

3、材料1.1样品1.1.1受试物鼓槌石斛SHch(Dendrobiumchrysotoxum),棕色浸膏,提取率3.15%;金钗石斛SHn(D.nobile),棕色浸膏,提取率5.42%;翅梗石斛SHtr(D.trigonopus),棕色浸膏,提取率4.34%;长距石斛SHl(D.longicornum),棕色浸膏,提取率4.16%;报春石斛SHp(D.primulinum),棕色浸膏,提取率13.81%;球花石斛SHth(D.thysiflorum),棕色浸膏,提取率11.80%;玫瑰石斛SHcr(D.crepidatum),棕色浸膏,提取率121.11%;叠鞘石斛SHd(D.de

4、nneanum),棕色浸膏,提取率13.24%;黑毛石斛SHw(D.williamsonii),棕色浸膏,提取率11.39%;流苏石斛SHf(D.fimbriatum),棕色浸膏,提取率14.27%;由中科院昆明植物研究所提供。所有样品均为60%乙醇提取物,易吸湿,常温密闭保存。1.1.2对照药品阿斯匹林肠溶片(拜阿斯匹灵,进口药品注册证号H20050059,100mg/片,BayerHealthCareAG生产,批号BTA6ZB7)。1.1.3配制方法各种石斛粗提物按提取率折算成6.07g/kg的生药剂量为实验的给药剂量,临用前称取适量样品于乳钵中,用1%CMC-Na研磨后配制成

5、相当于生药0.30g/mL浓度的混悬液供小鼠灌胃用;阳性对照阿斯匹林的配制方法同石斛粗提物。为保证受试物的稳定性,所有样品均为临用前新鲜配制。1.2动物SPF级昆明种小鼠,全雄,体重18~24g,购自于昆明医学院实验动物中心。合格证号:SCXK(滇)2005-0008。1.3主要仪器AL104电子分析天平(称量试剂、药品、脏器),梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;JJ2000型电子天平(称量动物体重),常熟双杰测试仪器厂;Millipore超纯水处理系统,美国Millipore公司;BCD-225E冰箱,青岛海尔冰箱厂。1.4主要试剂胶原蛋白,美国Worthington生化集团,

6、批号35E8048-B;盐酸肾上腺素注射液,国药准字H41021054,1mg/mL,天津药业集团新郑股份有限公司,批号0909102;溴代苯,分析纯,中国青浦合成试剂厂出品,批号20000405;橄揽油,化学纯,中国医药集团上海化学试剂公司出品,批号20090801。1.5统计学处理实验结果以均值±标准差(±s)表示,用DAS7ver1.0统计软件进行数据处理。方差齐用t检验,方差不齐用t′检验;偏态分布资料用秩和检验;计数资料用χ2检验。2方法与结果2.1对小鼠全血凝血时间的影响选用18~20g雄性昆明种小鼠132只,按体重随机分为12组:空白对照组;阳性对照阿司匹林40mg/

7、kg组;10种石斛样品粗提物6.0g/kg组;每组11只。各组动物每日分别按6.0g/kg干燥药材剂量灌胃给药1次,连续3d,空白对照组灌服等容量1%CMC-Na20mL/kg.bw。末次给药后1h,用20uL采血管于每鼠眼后静脉丛取血,以毛细管法测定凝血时间[2]。结果见表1。结果显示:除翅梗石斛外,所有给药组均能不同程度延长小鼠全血的凝血时间;其中,阳性对照阿斯匹林、鼓槌石斛、金钗石斛、长距石斛、球花石斛、玫瑰石斛、叠鞘石斛、黑毛石斛、流苏石斛分别延长30.58、

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