重庆大学微生物实验报告.doc

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1、开课学院、实验室城环学院市政与环境工程实验研究中心实验时间：年月日课程名称实验项目名称实验项目类型验证演示综合设计其他指导教师成绩一、实验目的1.学习使用血球计数板进行微生物计数的方法。2.认识活性污泥中常见的微生物，后生动物的形态及菌胶团的外形色泽3.认识水中常见藻类。二、实验原理显微镜直接计数法就是利用血球计数板在显微镜下直接计数，其原理是：将经过适当稀释的菌悬液放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中，在显微镜下进行计数由于计数室的容积是一定的（0.1mm2），所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。血球计数板通常是一块特制的载玻片（如图3-1

2、)，其上由四条槽构成三个平台，中间的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网（如图3-2），方格网中间是边长为1皿的计数室，当盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0.1mm，这样就形成一图3-1a.正面图b.侧面图0.1mm3的计数室个体积为0.1mm3的计数室。。计数室的刻度一般有两种规格：一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格（如图3-3A），另一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格（如图3-3B)。但无论是哪种规格的计数板，每一个大方格中的小方格数是相同的，即16X25=400小方格。计数时如采用16中方格X

3、25小方格的计数板时，就按对角线方位数取左上、左下、右上、右下的四个中方格内的菌数。如果是25中方格X16小方格的计数板，除数取上述四个中方格外，还须数取其中央的一中方格的菌数位于中方格线上的菌体，一般只计此中格的上方及右方格线上的菌体。16中方格X25小方格计数板：菌数（个／毫升）=4个中方格中总菌数X16X101OOOX稀释倍数÷425中方格x16小方格计数板：菌数（个／毫升）=5个中方格内总菌数X25XlOXlOOOX稀释倍数÷5图3-2图3-3三、使用仪器、材料四、实验步骤（一）微生物计数1.在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗后才能进行计数。2.本试验以酵

4、母菌液为样品。将酵母菌液摇匀，用无菌的细口滴管吸取少许，放一滴在血球计数室上，轻轻盖上盖玻片，不能有气泡，不能让多余的菌液顶起，多余的菌液让其自然溢出。3.将血球计数板置于显微镜载物台上，先用低倍镜观察全貌，找到计数室所在位置，然后换成高倍镜进行计数。如果酵母出芽，芽体太小达到母细胞的一半时，即作两个菌体计数。4.计数时若发现菌液太浓或太稀，需重新调节稀释度后再计数，一般样品释释度要求每个中方格内有20个左右菌体为好，记下稀释倍数，以供计算。5.参考前面的计数公式，计数菌数。6.计数完毕，血球计数板要立即清洗干净，并用吸水纸吸干，最后用擦镜纸擦干净并放回盒内。（二）活性污泥的观察在生物

5、法处理废水中，对曝气池活性污泥的观察是废水处理过程中最常用的检验手段之一。通过对活性污泥中微形动物（原生动物、后生动物）及菌胶团的观察，能及时了解处理请况，以利于及时采取补救措施。1.取活性污泥法曝气池混合液一小滴，放在洁净的载玻片中央。2.小心地用洁净的盖玻片覆盖，覆盖后片内不能有气泡形成。3.将制备好的标本片放在载物台上，先用低倍镜观察污泥中菌胶团的外形、色泽等，然后用高倍镜观察污泥中的微形动物，并画出形态草图。（三）藻类的观察藻类常出现在废水处理的氧化塘中，在给水水源中也常常大量出现。1.用吸管吸少许含有藻类的水样，放一滴在载玻片中央，盖上盖玻片（片内不能有气泡形成）即成。2.将

6、制备好的标本片放在载物台上，用低倍镜或高倍镜观察各种藻类的色泽、形态、构造，并绘出形态草图。五、实验过程原始记录及实验结果及分析(数据、图表、计算等)教师签名年月日