肠杆菌科细菌的培养与鉴定ppt课件.ppt

《肠杆菌科细菌的培养与鉴定ppt课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、肠杆菌科细菌的培养和鉴定苏州大学附属第二医院微生物室周惠琴实验目的1.实验内容2.实验步骤3.实验结果4.肠杆菌科细菌的培养和鉴定一.实验目的掌握常见肠杆菌科细菌菌落特点、染色形态及生化鉴别实验。掌握沙门菌属、志贺菌属、弧菌属在特殊培养基上的菌落特点及鉴别实验。1.肠杆菌科常见细菌：大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、普通变形杆菌、奇异变形杆菌在不同培养基上的菌落形态观察、特点描述以及生化鉴定反应的选择、结果判读。2.肠道传染性致病菌：沙门菌属、志贺菌属在选择性培养基上的菌落形态观察、特点描述以及及生化鉴定反应选择、结果判读。3.弧菌科细菌：副溶血性弧菌在

2、TCBS选择培养基上的菌落形态观察、特点描述及生化鉴定反应的选择、结果判读。二.实验内容1.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、普通变形杆菌、奇异变形杆菌、沙门菌属、志贺菌属、副溶血性弧菌使用四区划线法接种到不同的培养基上，在35°C孵箱内，培养18-24h后观察各培养基上各菌落形态。2.将上述细菌按照生化鉴定需要，接种到不同的生化鉴定培养基中，在35°C孵箱内，培养18-24h后观察各生化鉴定管的阴阳性结果，综合生化反应结果鉴定出细菌种类。三.实验步骤生化鉴定培养基种类及接种方法克氏双糖铁（KIA）半固体（动力）甲基红（MR）V-P枸橼酸盐（CIT）靛基

3、质（吲哚）穿刺后斜面划线垂直穿刺液体接种液体接种斜面划线悬空于半固体上硝酸盐（NIT）培养基苯丙氨酸脱氨酶（PAD）培养基赖氨酸（LYS）脱羧酶精氨酸（ARG）脱羧酶鸟氨酸（ORN）脱羧酶氨基酸脱羧酶对照尿素（URE）培养基斜面划线斜面划线液体接种液体接种生化鉴定培养基种类及接种方法肠杆菌科细菌生化鉴定反应“套餐”各生化管的阴阳性结果判读斜面产碱，底层不变，气体阳性，H2S阴性（K/K,气体+，H2S-）斜面产酸，底层产酸产气，H2S阴性（A/A,气体+，H2S-）斜面产碱，气体阴性，H2S阳性（K/A,气体+，H2S+）动力实验左管阳性，右管阴

4、性吲哚实验左管阳性，右管阴性枸橼酸盐利用实验上管为阳性，下管为阴性VP实验左管阴性，右管阳性甲基红实验左管阳性，右管阴性各生化管的阴阳性结果判读氨基酸脱羧酶实验赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶阴性，精氨酸脱羧酶阳性苯丙氨酸脱氨酶实验左管为阴性，右管为阳性革兰染色为阴性杆菌，短粗，大小为(1-1.5)μm×(2-6)μm在血琼脂平板上培养18-24h，呈现出圆形，直径为2-3mm，稍凸，边缘整齐，灰白色，不透明的菌落，少数菌株产生β溶血环。大肠埃希菌在血平板上菌落形态大肠埃希菌(E.Coli)在麦康凯平板上形成不透明粉红色的菌落，部分不发酵乳糖的菌株呈现无色菌

5、落，少数呈现粘液样菌落。大肠埃希菌(E.Coli)在伊红亚甲蓝平板上呈现紫黑色，金属光泽菌落。在中国蓝平板上呈现蓝色菌落大肠埃希菌(E.Coli)大肠埃希菌在中国蓝平板上的菌落特征在XLD平板上呈现出黄色、不透明菌落。在CHROMagar尿道定位培养基上呈现红色菌落大肠埃希菌在XLD平板上的菌落形态大肠埃希菌在尿道定位培养基上红色菌落大肠埃希菌(E.Coli)大肠埃希菌氧化酶阴性，触酶阳性KIA气体H2S动力葡萄糖O/F吲哚(IND)甲基红(MR)V-P枸橼酸盐(CIT)硝酸盐还原（NIT）苯丙氨酸脱氨酶(PAD)脲酶(URE)赖氨酸脱羧酶(LY

6、S)鸟氨酸脱氨酶(ORN)精氨酸脱氨酶(ARG)大肠埃希菌A/A＋－＋F＋＋－－＋－－＋+/－－注：A：产酸；K：产碱；+：90%以上菌株阳性；-：90%以上菌株阴性；+/-：（50-90）%菌株阳性；-/+：（50-90）%菌株阴性；大肠埃希菌(E.Coli)大肠埃希菌主要生化反应结果大肠埃希菌生化鉴定反应结果革兰染色为阴性杆菌，大小为(0.3-1.5)μm×(0.6-6)μm。单个、成双或短链状排列。可见透明环状荚膜。肺炎克雷伯菌(K.Peumoniae)革兰阴性杆菌荚膜在血琼脂平板上培养18-24h，形成较大、粘、圆形、凸起、灰白不溶血的大

7、菌落。肺炎克雷伯菌在血平板上的菌落形态肺炎克雷伯菌(K.Peumoniae)在麦康凯平板上形成隆起、大而粘液样，易融合的、粉红色菌落。挑起时呈丝状粘连。肺炎克雷伯菌(K.Peumoniae)在中国蓝平板上呈现蓝色菌落。肺炎克雷伯菌(K.Peumoniae)肺炎克雷伯菌在中国蓝平板上的菌落形态肺炎克雷伯菌氧化酶阴性，触酶阳性。KIA气体H2S动力葡萄糖O/F吲哚(IND)甲基红(MR)V-P枸橼酸盐(CIT)硝酸盐还原（NIT）苯丙氨酸脱氨酶(PAD)脲酶(URE)赖氨酸脱羧酶(LYS)鸟氨酸脱氨酶(ORN)精氨酸脱氨酶(ARG）肺炎克雷伯菌A/A

8、＋－－F－－＋＋＋－＋＋－－肺炎克雷伯菌(K.Peumoniae)肺炎克雷伯菌菌主要生化反应结果肺炎克雷伯菌生化鉴定反应结果革兰阴性杆菌