动物细胞融合与单克隆抗体.doc

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1、选修三专题2动物细胞融合与单克隆抗体教学目标：（1）知识目标：⑴掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。⑵简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。（2）能力目标：让学生了解单克隆抗体的制备过程，指导学生掌握获取生物科学知识和培养探索生物科学的兴趣。教学重点：动物细胞融合、单克隆抗体的制备过程教学难点：单克隆抗体的制备过程教学过程：一.动物细胞融合：（一）复习导入新课让学生回顾有关植物体细胞杂交技术的基本知识。指出动物细胞与植物细胞的不同，进一步探讨动物细胞是否可以融合或杂交？如果动物细胞进行融合，与植物细胞有什么区别？

2、杂交细胞膜融合、核融合植物细胞A原生质体制备原生质体A人工诱导植物细胞B酶解法去壁原生质体B融合物理：离心、振动、电激化学：聚乙二醇（PEG）人工诱导因素（二）动物细胞融合：也称为细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。动物细胞融合的基本原理与植物原生质体融合的基本原理相同，都是依据细胞膜的流动性。但是动物细胞没有细胞壁，不需要酶解。动物细胞自然生长条件下会出现融合的现在，但是多数依靠人工诱导动物细胞融合。物理：离心、振动、电激诱导动物细胞融合

3、化学：聚乙二醇（PEG）同核、异核的因素生物：灭活的病毒（如仙台病毒等）通过课本图2-23和生物技术资料卡讲解灭活病毒如何诱导细胞融合、如何获得灭活病毒。总结：细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能（包括种间，属间、科间的细胞都获得成功），使杂交细胞具有两个亲本细胞的遗传特性。但是，最主要的应用是杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。二．单克隆抗体：（一）复习导入新课让学生回忆的免疫调节中关于抗体的本质，和B淋巴细胞产生抗体的流程。请学生在阅读课本P52的最后一自然段的基础上，讨论一下问题：抗体的传统生

4、产方法如何进行及缺陷是什么？淋巴细胞产生抗体的流程图：抗原a吞噬细胞T细胞B淋巴细胞浆细胞抗a抗体（具有特异性）(二).抗体的传统生产方法：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需要的抗体。这种生产抗体的方法产量和纯度都很低，而且制备的抗体特异性差。（三）.单克隆抗体要获得大量的纯种抗体，必须得到只产生单一抗体的B淋巴细胞（可以通过单个细胞的分离培养的得到）。但是主要的问题是，得到单一的B淋巴细胞后，由于它是属于高度分化的细胞，在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞是不可能增殖的，怎么解决这个问题呢？

5、引导学生思考：如果诱变B淋巴细胞，使其可以无限增殖（如癌细胞状态）？但是诱变是不定向的，有可能使细胞丧失产生抗体的能力。所以要采用一种定向的方法让B淋巴细胞既保持产生抗体的能力，又能无限增殖---细胞杂交。单克隆抗体技术产生的，就是把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行杂交融合，所得到的杂交细胞既能大量增殖，又能产生大量的特异性抗体，这就是极富创造性的杂交瘤实验。通过课本图2-24详细讲解单克隆抗体的制备过程。为何要注入抗原？提取得到的B淋巴细胞种类是否单一？为什么板书：特定抗原免疫小鼠体外培养骨髓瘤细胞（A）B

6、淋巴细胞（多种）如：B1，B2，B3杂交融合多种杂交细胞（同核、异核）如：AA,BB,AB1,AB2,AB3第一次筛选的目的？筛选后的细胞的种类？选择性培养基多种杂交瘤细胞（异核）如：AB1,AB2,AB3专一抗体检验，对阳性细胞克隆培养第二次筛选的目的？单克隆杂交瘤细胞注射到小鼠体内体外培养单克隆抗体总结分析单克隆抗体的概念及其优点。让学生看书，回忆单克隆抗体的制备过程，并请学生复述。板书：动物细胞融合单克隆抗体物理：离心、振动、电激传统抗体生产化学：聚乙二醇（PEG）生物：灭活的病毒单克隆抗体生产