大孔吸附树脂的预处理方法.doc

《大孔吸附树脂的预处理方法.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、大孔树脂使用方法一大孔吸附树脂的预处理：大孔树脂在试验中使用时间较长。必须保证不受霉菌污染。新购树脂一般用氯化钠及硫酸钠处理。但树脂内部存在未聚合的单体残存的致孔剂引发剂分散剂等用前必须除掉。方法：预处理的流程简述如下：以0.5BV的乙醇浸泡树脂24h（1BV为1个树脂床体积）用2BV的乙醇以2BV/h流速通过树脂柱，并浸泡4-5h用乙醇2BV/h的流速洗涤树脂至流出液的加水不呈白色混浊为止。再用水以同样流速洗净。用2BV的5%HCL溶液以4-6BV/h的流速通过树脂层。并浸泡树脂2-4h。而后用

2、水以同样流速洗至出水pH中性用2BV的2%NaOH溶液以4-6BV/h的流速通过树脂层并浸泡树脂2-4h而后用水以同样流速洗至出水pH中性。在洁净的分离柱内，放入已去除外来杂质，体积恒定的大孔吸附树脂加入相当于树脂体积0.4-0.5倍的乙醇（或甲醇）浸泡24h，然后用树脂体积的2-3倍的乙醇（或甲醇）与水交替反复洗脱交替洗脱2-3次，至最终以水洗脱后，保持分离使用前的状态。醇洗脱液加水不显混浊。也可用电导率、荧光和紫外吸收等作为前处理的标准。二大孔树脂的使用中草药有效成分在大孔树脂上的吸附是大孔树

3、脂与有效成分形成以范德华力和氢键为主的一分子间作用力的结果。大孔树脂依据其聚合物的单体组成不同，可以分成非极性和极性两大类。非极性吸附树脂适合从极性溶液中（如水溶液）中吸附非极性物质。中等极性树脂可从极性溶液中吸附非极性物质，还能从非极性溶液中吸附极性物质。大孔树脂的孔径和比表面积是影响大孔树脂对物质的吸附的主要因素。大孔树脂比表面积越大，单位质量大孔树脂吸附的作用面积越大，单位质量大孔树脂吸附有效成分就越大。而大孔树脂的比表面积还包括内孔网的面积。树脂孔径过小，有效成分分子不能进入树脂内部，只能

4、在树脂外表面吸附，相应的比表面积就比较小。因此选择的时候应该根据目标物的分子量选择合适孔径的树脂才能使吸附的有效面积增大具体地应该通过实验确定。1树脂类型的确定吸附率和吸附量的测定：吸附率E%=C0—Ce/C0×100%C0—吸附前溶液的浓度mg/mlCe—吸附后溶液浓度E%—吸附率吸附量Q=（C0—Ce）×V/WQ—吸附量mg/gW干树脂重V溶液体积考察某种树脂是否适合于该新药。首先考察该树脂的比吸附值，即树脂对所纯化分离的有效成分要有较大的吸附量。然后，需考察树脂对所分离的有效成分有良好的分离

5、性能目标成分能比较集中的被洗脱出来。采用的方法如下A静态吸附以葛根素中黄酮提取为例将10g处理好的树脂加入葛根素水溶液30ML总黄酮浓度为9.4mg/mL每5min振摇1次，2h小时后分别取各树脂的吸附溶液1ML进行吸光度的分析，计算各种树脂对葛根素总黄酮的吸附率和吸附量。B静态解析：将静态吸附的树脂过滤抽干，加30ml70%乙醇解析每5分钟振一次2h后分别取各解析液测定黄酮的浓度。以计算各种树脂对黄酮的解析率。C动态吸附准确称取10ml或20ml树脂在干净的2×20cm色谱柱内，加入葛根素的水溶

6、液总黄酮的浓度为9.4mg/ml于柱顶，以2BV/h的流速进行动态吸附，收集流出液。按床体积收集进行分析，测出目标物的浓度如皂甙或黄酮等，然后以洗脱液体积为横坐标，流出液中的目标物含量为纵坐标绘制动态吸附曲线，计算饱和动态吸附量。并计算达到吸附饱和时，所吸附的目标物的量。可以比较出何种树脂的吸附量大。2药液浓度的考查：黄酮、皂苷、生物碱等在大孔树脂上是物理吸附。从物理吸附等温方程可以发现。有效成分初始浓度增加。平衡吸附量增加，吸附率降低。平衡吸附实际增加。进柱液浓度增加平衡吸附时间增加平吸附实际延

7、长吸附率降低。取葛根素的水溶液分别加水稀释。.5，10，15，20倍后上样以2BV/h的流速进行吸附后先以5BV水洗脱再用70%乙醇洗脱，收集洗脱液至100ML于250nm计算吸光度计算总黄酮的含量。即多篇文献研究结果表示当总黄酮浓度0.5g/mL黄酮的药液浓度上样即可。药液稀释可以提高解析率。洗脱剂浓度中草药有效成分从大孔树脂上洗脱，是利用有效成分在洗脱液有效成热能在洗脱液中的溶解作用大于有效成分在黄酮、皂苷、生物碱以及其他苷类物质在乙醇类溶液中溶解度较大。常使用乙醇作为洗脱液。乙醇溶液从两方面

8、影响有效成分在大孔吸附树脂上的吸附。将中草药有效成分pH值对大孔吸附树脂提取有效成分效果的影响酸性有效成分应该在酸性条件下吸附，碱性有效成分应该在碱性条件下吸附。反之在解析洗脱阶段，酸性有效成分使用户碱性洗脱液洗脱效果好碱性有效成分使用酸性洗脱液效果好。温度对大孔树脂提取有效成分效果的影响由于黄酮、皂甙、生物碱等有效成分在大孔树脂是通过分子间作用力，属于物理吸附。温度升高，一方面有效吸附作用降低。另一方面，有效成分在溶液中的溶解度增大。综合结果温度升高可使有效成分在大孔树脂上的吸附