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1、高效液相色谱仪的使用方法2008-05-1120:24仪器名称：高效液相色谱仪仪器型号：Agilent1100生产厂家：Agilent使用方法：(一)、开机：1、打开计算机,进入WindowsNT（或Windows2000）画面,并运行BootpServer程序。2、打开1100LC各模块电源。3、待各模块自检完成后，双击Instrument1Online图标，化学工作站自动与1100LC通讯，进入的工作站画面如下所示。4、从“View”菜单中选择“MethodandRuncontrol”画面,单击”View”菜单中的“ShowTo
2、pToolbar”，“Showstatustoolbar”，“Systemdiagram”,”Samplingdiagram”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。5、把流动相放入溶剂瓶中。6、打开Purge阀。7、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setuppump选项，进入泵编辑画面。8、设Flow：5ml/min，单击OK。9、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pumpcontrol选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通
3、道无气泡为止。10、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击PumpControl选项，选中Off，单击Ok关泵，关闭Purgevalve。11、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setuppump选项，进入Pump编辑画面，设Flow：1.0ml/min。12、单击泵下面的瓶图标，如图所示（以二元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积。单击Ok。（二）数据采集方法编辑：1、开始编辑完整方法：从“Method”菜单中选择“Editentiremethod”项，如上图所示选中除“Dataanalysis”外的三
4、项，单击Ok，进入下一画面。2、方法信息：在“MethodComments”中加入方法的信息（如：方法的用途等）。单击Ok进入下一画面。3、泵参数设定：（以二元泵为例）在“Flow”处输入流量,如1ml/min，在“SolventB”处输入70.0,(A=100-B),也可Insert一行”Timetable”,编辑梯度。在“PressureLimitsMax”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。单击Ok进入下一画面。4、自动进样器参数设定:选择合适的进样方式,如图所示，进样体积1.0ul,洗瓶位置为6号。“StandardInje
5、ction”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“InjectionwithNeedleWash”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。“Useinjectorprogram”---可以点击Edit键进行进样程序编辑。点击Ok进入下一画面。5、柱温箱参数设定:●在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more>>”键,如图所示,选中”Sameasleft”---使柱温箱的温度左右一致。●点击ok进入下一画面。6、VWD检测器参数设定:●在”Wavelen
6、gth”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm,在”Peakwidth(Responsetime)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间,如>0.1min(2s)。●在Timetable中可以“Insert”一行，输入随时间切换的波长，如1min，波长=300nm。点击ok进入下一画面。7、DAD检测器参数设定:●检测波长:254nm,BW=30nm,参比波长=350nm,BW=100nm;●检测波长：一般选择最大吸收处的波长。样品带宽BW：一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长：一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸
7、收区域。参比带宽BW：至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺省值。Peakwidth（Responsetime）：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。Slit—狭缝窄，光谱分辨率高；宽时，噪音低。同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈值。选中所用的灯。●点击Ok进入下一画面。8、RID检测器参数设定:●色谱条件:进样体积:20ul。光学单元温度:Off。极性:正。峰宽(响应时间):4s。●如图所示:“OpticalUnitTemperature”---若环境温度控制在±2℃,设定为Off,若环境温度不稳定,则设定光学单
8、元温度为高于环境温度5度,以防样品在池中沉淀。“Peakwidth”---大多数分析设为4S，只有在高速分析下设为更短。“Automaticrecyclingafteranalysis”---在不进行分析时可以让流动相循环，节省流动相
