离子交换柱层析的操作与应用ppt课件.ppt

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1、艾滋病毒感染者在满足下列条件时可实施人工喂养：如果替代品喂养是可以接受的，可行的，可以负担的，可持续的，并且安全的第七章层析分离技术艾滋病毒感染者在满足下列条件时可实施人工喂养：如果替代品喂养是可以接受的，可行的，可以负担的，可持续的，并且安全的第一节层析的基本原理与分类•一、层析分离的基本原理与特点•（一）基本原理•层析分离是一种物理的分离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度分布在两个相中。艾滋病毒感染者在满足下列条件时可实施人工喂养：如果替代品喂养是可以接受的，可行的，可以负担

2、的，可持续的，并且安全的•（二）层析分离具有如下基本特点•优点：（l）分离效率高。•（2）应用范围广。•（3）选择性强。•（4）设备简单，操作方便。•缺点：处理量小、操作周期长、不能连续操作，因此主要用于实验室，工业生产上还应用较少。艾滋病毒感染者在满足下列条件时可实施人工喂养：如果替代品喂养是可以接受的，可行的，可以负担的，可持续的，并且安全的（三）层析的基本概念•1.固定相•2.流动相•3.分配系数及迁移率（或比移值）•4.分辨率（或分离度）•5.正相色谱与反相色谱•6.操作容量（或交换容量）艾滋病毒感染者在满

3、足下列条件时可实施人工喂养：如果替代品喂养是可以接受的，可行的，可以负担的，可持续的，并且安全的二、层析分离技术的分类（一）依操作形式分分为纸层析、薄层层析和柱层析。艾滋病毒感染者在满足下列条件时可实施人工喂养：如果替代品喂养是可以接受的，可行的，可以负担的，可持续的，并且安全的（二）依流动相分根据流动相的形式分类，层析可以分为液相层析和气相层析。艾滋病毒感染者在满足下列条件时可实施人工喂养：如果替代品喂养是可以接受的，可行的，可以负担的，可持续的，并且安全的（三）依分离机理分1.吸附层析2.分配层析3.凝胶过滤4

4、.离子交换层析5.亲和层析6.疏水层析艾滋病毒感染者在满足下列条件时可实施人工喂养：如果替代品喂养是可以接受的，可行的，可以负担的，可持续的，并且安全的第二节层析分离的基本操作技术一、柱层析基本操作技术（一）柱层析的基本装置1、固定相2、流动相3、收集系统4、检测系统5、蠕动泵艾滋病毒感染者在满足下列条件时可实施人工喂养：如果替代品喂养是可以接受的，可行的，可以负担的，可持续的，并且安全的（二）柱层析系统的基本操作技术1.装柱2.平衡3.加样4.洗脱5.流速控制6.分部收集7.洗脱峰检测、合并收集8.层析介质的再生

5、艾滋病毒感染者在满足下列条件时可实施人工喂养：如果替代品喂养是可以接受的，可行的，可以负担的，可持续的，并且安全的二、纸层析基本操作技术•（一）滤纸•（二）展开剂•（三）操作方法•（四）在抗生素中的应用艾滋病毒感染者在满足下列条件时可实施人工喂养：如果替代品喂养是可以接受的，可行的，可以负担的，可持续的，并且安全的三、薄层层析基本操作技术（一）基本原理（二）吸附剂和展开剂的选择（三）基本操作1.薄层板的制备2.样品的预处理3.点样、展层与显色4.影响Rf的主要因素5.薄层色谱法的应用艾滋病毒感染者在满足下列条件时可

6、实施人工喂养：如果替代品喂养是可以接受的，可行的，可以负担的，可持续的，并且安全的第三节吸附柱层•一、吸附层析的原理与特点基本原理同吸附薄层色谱法。•二、吸附剂的选择•常用的吸附剂除氧化铝、硅胶和聚酞胺外，还有活性炭。•吸附剂的种类很多，而对吸附剂的选择尚无固定的法则，一般需通过小样实验来确定。艾滋病毒感染者在满足下列条件时可实施人工喂养：如果替代品喂养是可以接受的，可行的，可以负担的，可持续的，并且安全的三、吸附柱层析的基本操作与应用（1）干法装柱在柱下端加少许棉花或玻璃棉，再轻轻地撒上一层干净的砂粒，打开下口，

7、然后将吸附剂经漏斗缓缓装加入柱中，同时轻轻敲动色谱柱，使吸附剂松紧一致，最后，将色谱柱用最初洗脱剂小心沿壁加入，柱至刚好覆盖吸附剂顶部平面，关紧下口活塞。（2）湿法装柱将吸附剂加入合适量的色谱最初用洗脱剂调成稀糊状，先把放好棉花、砂子的色谱柱下口打开，然后徐徐将制好的糊浆灌人柱子。注意，整个操作要慢，不要将气泡压人吸附剂中，而且要始终保持吸附剂上有溶剂，切勿流干，最后让吸附剂自然下沉。当洗脱剂刚好覆盖吸附剂平面时，关紧下口活塞。艾滋病毒感染者在满足下列条件时可实施人工喂养：如果替代品喂养是可以接受的，可行的，可以负

8、担的，可持续的，并且安全的三、吸附柱层析的基本操作与应用（1）湿法上样把被分离的物质溶在少量色谱最初用的洗脱剂中，小心加在吸附剂上层，注意保持吸上附剂上表面仍为一水平面，打开下口，待溶液面正好与吸附剂上表面一致时，在上面撒一层细砂，关紧柱活塞口。样（2）干法上样多数情况下，被分离物质难溶于最初使用的洗脱剂，这时可选用一种对其溶解度大而且沸点低的溶剂，取尽可能