酶专一性及活性影响因素探讨.docx

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1、酶的专一性及酶促反应速率影响探讨一．实验目的1)通过实训测出各种因素是如何对酶活性进行影响的。2)找到唾液淀粉酶各种单因素影响的最佳条件。二．实验原理酶与一般催化剂的区别是具有高度专一性。支队某一种或一类底物具有催化作用。对其他底物没有催化作用。淀粉在唾液淀粉酶的作用下水解，经过一系列被称为糊精的中间产物最后生成麦芽糖。碘液可指示淀粉的水解程度。淀粉→蓝色糊精→红色糊精→无色糊精→麦芽糖遇碘无色遇碘无色遇碘红色遇碘变蓝遇碘变蓝淀粉酶只对淀粉起作用，而不能水解蔗糖。淀粉、蔗糖、与糊精无还原性，或还原性很弱，对班氏试剂呈阴性反应；麦芽糖、葡萄糖、果糖

2、是还原糖，与班氏试剂共热后生成红棕色Cu2O2沉淀。本次实验内容通过比较淀粉酶在不同PH、温度、以及有无抑制剂或激活剂时水解淀粉的差异，说明这些环境因素与酶活性的关系。三．试剂与器材1.试剂2%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、班氏试剂（由CuSO4配制）、碘液、磷酸缓冲液2.材料唾液淀粉酶。先用蒸馏水漱口，再含10ml左右，轻轻咀嚼2min后吐出到收集杯里，既得唾液淀粉酶溶液。3.仪器恒温水浴（37℃）、沸水浴（100℃）、冰浴（0℃），试管数只，移液管数只，白瓷板，胶头滴管。四．操作步骤1.酶的专一性操作项目管号1231%淀粉112%蔗糖1唾液淀粉酶1

3、1蒸馏水1酶促水解摇匀，37℃水浴保温10min班氏试剂111反应摇匀，沸水浴加热10min后观察现象1.温度对酶活力的影响操作项目管号123唾液淀粉酶溶液111PH=7的缓冲液111温度预处理0371001%的淀粉111反应2-5min现象操作要点：加淀粉溶液的时候不能将试管移开水浴或冰浴；反应进行5分钟后，每隔1min用胶头滴管从2号试管取一滴，滴入白瓷板槽内，然后加一滴碘液，若呈无色或淡黄色，则可以停止反应；若呈蓝色，说明2号试管淀粉没有水解完全，继续反应，知道取出的反应液与碘液反应呈无色或淡黄色。2.PH对酶活力的影响操作项目管号123P

4、H5.0磷酸缓冲液2PH7.0磷酸缓冲液2PH8.0磷酸缓冲液21%淀粉10滴10滴10滴预保温混匀，37℃水浴中保温2min唾液淀粉酶溶液111检查淀粉的水解程度摇匀，37℃水浴反应1min，每隔1min从2号试管中取出1滴，滴入白瓷板槽中，加一滴碘液，看反应状态。若呈无色或淡黄色，则可以停止反应；若呈蓝色，说明2号试管淀粉没有水解完全，继续反应，知道取出的反应液与碘液反应呈无色或淡黄色。碘液111现象3.酶的抑制和激活操作项目管号1231%NaCl1%CuSO4蒸馏水唾液淀粉酶溶液1%淀粉保温反应并检查淀粉的水解程度摇匀，37℃水浴反应1mi

5、n左右，检查1号试管的淀粉水解程度。碘液（滴）111现象一．结果与分析针对每个实验现象进行说明，说明为什么是这个现象，如果做的实验现象和理论有差别，说明，为什么你做的是这个现象，说明你自己在操作时，错在什么地方。