动物细胞培养.pdf

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1、动物细胞培养2.2.1动物细胞培养和核移植技术第1课时【学习目标】1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用。2、比较动物细胞培养与植物组织培养区别。【学习重点】1、动物细胞培养的过程、条件。【自主学习】一、动物细胞工程常用的技术手段1、动物细胞工程常用的技术手段有哪几种？2、______________是动物细胞工程技术的基础。二、动物细胞培养1、动物细胞培养的概念（1）动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，它分散成______________，后放在______________中，让这些细胞______________和______________。（2）动物细胞培养的原

2、理是：_________________。2、动物细胞培养的过程（1）基本概念①什么是细胞贴壁？②什么是接触抑制？③什么是原代培养？什么是传代培养？说明：分瓶之前，称原代培养；出现接触抑制用胰蛋白酶处理，再分瓶培养为传代培养。（2）过程剪碎原代培养幼龄动物组织或胚胎单个细胞细胞悬液细胞贴壁生长胰蛋白酶胰蛋白酶传代培养细胞悬液细胞株或细胞系【思考探究】①为什么选用幼龄的动物组织或胚胎？1动物细胞培养②如何使组织分散为单个细胞？这说明细胞间的物质是什么？能不能用胃蛋白酶？③制成细胞悬液的主要目的是什么？④培养细胞的培养瓶或培养皿应具备什么条件？⑤贴满瓶壁的细胞要如何处理才能继续培养

3、？⑥目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的，为什么？10～50代，50代以后细胞有什么变化？【例1】下列有关动物细胞培养的叙述中正确的是（）A、动物细胞培育的目的是获得大量的细胞分泌蛋白B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C、细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中D、培养至50代后的传代细胞称为细胞株3、动物细胞培养的条件①无菌、无毒的环境采取什么措施保证无菌、无毒的环境？②营养什么是合成培养基？培养动物细胞时为什么要加入血清、血浆？③温度和PH适宜的温度一般为_______________；适宜的PH一般为________________。④气体环境细胞

4、培养所需气体主要为O2和CO2，它们分别有什么作用？4、动物细胞培养技术的应用①生产生物制品：疫苗、干扰素、单克隆抗体等；2动物细胞培养②作为基因工程中的受体细胞；③检测有毒物质及毒性；④科研方面：筛选抗癌药物、治疗和预防疾病等。5、动物细胞培养与植物组织培养的区别植物组织培养动物细胞培养理论基础(原理)细胞的全能性细胞增殖培养基的物理性固体液体（合成培养基）质水、矿质元素、蔗糖、葡萄糖、氨基酸、无机盐、培养基的成分氨基酸、琼脂等维生素、动物血清等过程结果新的植株或组织新的细胞株或细胞系①植株快速繁殖②脱毒植株的①生产蛋白质制品如病毒培育疫苗、干扰素、单克隆抗体用途②人工种子④

5、生产药物、杀虫剂等；②检测有毒物质；③研等究药理病理；④移植治疗⑤转基因植物的培育相同点都需人工条件下的无菌操作，需要适宜的温度、PH、O2等特别注意以下几点：1.动物细胞培养基成分特有的动物血清含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等多种成分。2.两技术手段培养过程中都进行有丝分裂，都是无性繁殖，都可称克隆，都不涉及减数分裂。3.植物组织培养最终产生新个体，体现全能性；动物细胞培养产生大量细胞，不形成新个体，故不能体现全能性。【例2】一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（）①无毒的环境②无菌的环境③合成培养基需加血浆④温度与动物体温相近⑤需要O2，不需要CO2⑥CO2能调培养

6、液pHA.①②③④⑤⑥B.①②③④C.①③④⑤⑥D.①②③④⑥3动物细胞培养【例3】动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于（）A.培养基不同；B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。【随堂练习】1、在进行动物细胞培养时，通常选用的培养材料是（）A、衰老退化的动物组织细胞B、成熟动物个体的体细胞C、动物的受精卵细胞D、动物胚胎或幼龄动物个体的细胞2、下列关于动物细胞培养的叙述中，错误的是（）A、用于培养的细胞大多取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B、将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分

7、散成单个细胞C、在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D、动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞会衰老死亡3、在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是（）A、使动物组织分散为单个细胞进行培养B、去掉细胞壁成为原生质体C、去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合D、促进蛋白质水解为多肽4、离体的植物组织或细胞在适当培养条件下发育成完整的植株，离体动物体细胞却没有发育成动物的成熟个体，原因是（）A、动物细胞内没有成套的遗传物质B、动物细胞的全能性随分化程度提高而受到限制，分化