选修三 专题一 基因工程 1.1DNA重组技术的基本工具ppt课件.ppt

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1、专题一基因工程要是我自己能对付害虫就好了！普通棉花抗虫棉基因工程培育抗虫棉的简要过程普通棉花(无抗虫特性)苏云金芽孢杆菌（有抗虫性状）提取抗虫基因棉花细胞(含抗虫基因)棉花植株(有抗虫特性)重组DNA导入形成培育抗虫棉的关键步骤有哪些？1.1DNA重组技术的基本工具三种基本工具在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例？一、限制性核酸内切酶（限制酶）来源主要是从原核生物中分离纯化出来的一、限制性核酸内切酶作用识别特定的核苷酸序列，使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（限制酶）AG一种限制酶是否能断开任何一处磷酸

2、二酯键？一、限制性核酸内切酶EcoRⅠ（限制酶）EcoRⅠ限制酶识别：GAATTC序列一、限制性核酸内切酶SmaⅠ限制酶具有专一性（限制酶）SmaⅠ限制酶识别：GGGCCC序列中轴线中轴线平末端和黏性末端SmaⅠEcoRⅠ平末端黏性末端A生物的DNA片段EcoRⅠDNA连接酶B生物的DNA片段EcoRⅠ黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端作用催化的形成将两条DNA链连接起来种类（1）E·coliDNA连接酶（2）T4DNA连接酶二、DNA连接酶磷酸二酯键E·coliDNA连接酶或T4DNA连接酶可以连接互补的黏性末端T4DNA连接酶还可以连接平末端，但效率较

3、低DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？寻根问底AGTACTAATDNA母链DAN聚合酶DNA聚合酶寻根问底TTAGATATCCGACGGTTTAA……………………………………………………DNA连接酶寻根问底思考DNA连接酶是将___________连接起来DNA聚合酶是将___________连接起来共同点：都是催化磷酸二酯键的形成两个DNA片段单个核苷酸三、基因进入受体细胞的载体质粒大肠杆菌细胞小型环状DNA分子质粒的特点：假如质粒没有限制酶切割位点将怎样？（没有限制酶能识别的序列）质粒限制酶？限制酶？限制酶？限制酶？目的基因1.有一个或多个酶切割位

4、点目的基因插入位点基因工程1.概念：基因工程是指按照____的愿望，进行严格的设计，并通过体外_____重组和基因拼接等技术，赋予生物新的________，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。人们DNA遗传特性DNA重组技术基因拼接技术2.原理：__________基因重组3.别名：___________或____________质粒的特点：1.有一个或多个酶切割位点重组DNA受体细胞受体细胞假如质粒含有标记基因如：四环素抗性基因含四环素的培养基2.具有标记基因（四环素抗性基因、氨苄基青霉素抗性基因等）质粒的特点：1.有一个或多个酶切割位点

5、2.具有标记基因（四环素抗性基因、氨苄基青霉素抗性基因等）受体细胞3.能自我复制有酶切割位点标记基因能自我复制大肠杆菌质粒对受体细胞无害考考你细菌质粒用EcoRⅠ限制酶切割出来的抗虫基因用同一种限制酶打开质粒用DNA连接酶连接重组DNA抗虫棉棉花细胞1.1DNA重组技术的基本工具三种基本工具限制酶DNA连接酶载体动动手步骤1：制作两个DNA分子片段步骤2：用E.coRⅠ限制酶分别切割两个DNA分子片段步骤3：将不同颜色的片段连接起来形成重组DNA分子课堂练习（一）1.以下说法正确的是A．所有的限制酶只能识别同一种特定的核苷酸序列B．质粒是基因工程中惟一

6、的运载体D．DNA连接酶的作用是催化碱基间氢键的形成C．运载体必须具备的条件之一是：具有一个或多个限制酶切割位点，以便与外源基因连接课堂练习（二）2.如图，两个核酸片段在适宜条件下，经X酶催化作用，发生下述变化，则x酶是：X酶A.RNA聚合酶C.DNA聚合酶D.限制酶B.DNA连接酶课堂练习（三）3.下列关于基因工程中限制酶的描述，错误的是：A.产生于细胞内，同时可以在细胞外起作用B.限制酶的活性受温度和pH等因素的影响C.限制酶可以从原核生物中提取，对原核生物自身DNA无损害D.限制酶能识别和切割RNA4.下列除哪一项外，其余均为基因工程载体必须具备的

7、条件：课堂练习（四）A.是环状DNA分子B.具一个或多个酶切位点C.能在受体细胞中自我复制D.具有标记基因，便于筛选