透射电子显微镜技术精讲ppt课件.ppt

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1、电子显微镜技术第一章绪论A1电子显微镜技术发展历史B1电子显微镜的诞生电子显微镜是在1931年,由德国科学家EnestRuska和MaxKnoll首先发明的。虽然他们的第一台用电子束和电磁透镜组成的显微镜只将铜网放大了12倍,但是却揭开了用电子显微镜探索微观世界的新篇章。1986年,世界上第一台透射电镜的发明者E.Ruska与发明扫描隧道显微镜的科学家G.Binnng和H.Rohrer一起荣获诺贝尔物理奖。B2光学显微镜和电子显微镜的差别A2电子显微镜技术现状B1仪器性能的进步和完善:分辨力的提高放大

2、倍数的增大功能的多样化B2样品制备技术的协同发展:表现样品的二维超微结构、应用广泛的超薄切片术;显示表面超微结构、立体感较强的扫描电镜样品制备技术;呈现生物膜的断裂面超微结构的冷冻蚀刻技术;用于细胞内化学成分的定性和定位研究的电镜细胞化学技术;进行细胞内抗原(抗体)的定性和定位研究的免疫电镜技术;探测细胞内大分子合成、运输动态过程的电镜放射自显影技术;研究病毒和生物大分子等悬浮材料的负染术.A2电子显微镜技术的应用与未来B1电镜技术的应用:C1生命科学方面:Dl细胞生物学:用电镜技术发现并揭示了细胞内

3、各种细胞器的超微结构,特别是细胞骨架系统和生物膜的超微结构;促进了对细胞的结构及其功能的研究,如:细胞生理和生化、细胞通讯与运输、细胞分裂与分化、细胞增殖与调控等。D2分子生物学:用电镜技术揭示了核酸和蛋白质大分子的超微结构,并对其进行了亚显微测量;还研究了染色体的超微结构,拍摄了DNA转录mRNA的过程,观察到了灯刷染色体、巨大多线染色体和在染色质纤维上间隔排列的球形核小体,并研究了核小体的化学组成和分子结构。另外,还进行了核酸分子杂交和编接基因缺失的观察与研究,以及核糖体和蛋白质合成机制的研究等。

4、D3动物学和植物学:用电镜技术进行了广泛的细胞超微结构的研究,特别对动植物的分类学研究作出了贡献。D4微生物学:用电镜技术揭示了病毒、细菌和支原体等的超微结构,促进了微生物发育史的研究,并发现了新的细菌、病毒和类病毒等。C2医学科学方面:Dl基础医学:电镜技术为超微病理学的研究提供了先进的手段,如:对病变细胞超微结构的研究,有助于探索病因和治疗的机理。特别是高分辨力的电镜更促进了分子病理学的产生与发展;在中医基础理论的研究方面也获得了广泛的应用,如:针刺机理和中草药药理的研究等。D2临床医学:免疫电镜

5、技术为研究疑难病症的诊断与治疗开辟了道路,如:对天花等病症,用免疫电镜技术可以在数分钟内作出明确的诊断;另外对病毒性肝炎、肾病、血液病和肿瘤的分类和诊断也显示出了优势。C3农林科学:电镜技术在植物保护、良种繁育、土壤改良、成分分析、品种的分类与鉴定和动植物各种疾病的病因、诊断与防治方面的研究都获得了快速进展。C4材料科学:可用电镜对各种非金属和金属材料的超微结构进行鉴定和检测,以及进行新型材料的研制等。B2电镜技术的未来:C1多技术、方法的相互协作:C2仪器装置的不断完善C3计算机技术的不断渗入C4电

6、镜样品制备技术的不断创新第二章电子显微镜的基本知识电子显微镜(以下简称电镜,ElectronMicroscope,EM)是揭示生物样品超微结构的有力工具。为便于初步了解常用电镜的名称及其基本构造、成像原理和应用范围,以及在操作时需注意的问题等,本章将对透射电镜(TEM)、扫描电镜(SEM)、扫描透射电镜(STEM)和超高压电镜(UHVEM)等分别作介绍。A1透射式电子显微镜B1透射电镜的基本构造透射电镜(TransmissionElectronMicroscope,TEM)属于大型精密仪器,主要由电子

7、光学系统、真空系统和供电系统三大部分组成。C1电子光学系统电子光学系统又分为电子枪、磁电子透镜、样品室和观察记录装置等几个部分。D1电子枪:电子枪是电子光源的发射装置,由阴极、栅极和阳极组成。一般阴极是钨丝制成的极细小的V型灯丝,当通电加热到2227℃以上时,其尖端即发射电子。栅极位于阴极和阳极之间,用来控制电子发射的强度,并将阴极发射的电子挤压成直径小于100μm的束流,这个极微小电子束的集合点(又称交叉点)就是电镜的光源。而阳极与阴极之间有极大的电位差,可对电子束产生巨大的加速作用。另外阳极还有调

8、节电子波长的作用,阳极的电压越高,电子波长越短,电镜的分辨力就越高。D2磁电子透镜系列:磁电子透镜包括聚光镜、物镜、中间镜和投影镜。聚光镜的作用是汇聚电子束,控制照明束斑和孔径角的大小,以减少能量的损失,使更多的电子束投射到样品上,并成像放大。物镜是短焦距强磁透镜,它把样品的精细结构作第一次约60倍的放大,称初级放大像。物镜的精确度和清洁度非常重要,它的质量优劣与电镜的分辨力有直接关系,物镜的质量越好,电镜的分辨力越高。中间镜和投影镜的作用是把初级放大像

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