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1、ICS65.020.20B61备案号:47106-2015DB44广东省地方标准DB44/T1530—2015相思组培快繁育苗技术规程TechnicalregulationsontissuecultureofAcacias2015-03-26发布2015-06-26实施广东省质量技术监督局发布DB44/T1530—2015前言本标准按GB/T1.1-2009的规定编写。本标准由广东省林业厅科技与交流合作处提出。本标准由广东省林业厅归口。本标准起草单位:中国林业科学研究院热带林业研究所。本标准主要起草人:曾炳山、裘珍飞、刘英、李湘阳、范春节。本标准首
2、次发布。ⅠDB44/T1530—2015相思组培快繁育苗技术规程1范围本标准规定了相思组培快繁的外植体、丛芽诱导、增殖培养、生根培养、瓶苗培育、容器苗培育、建档等技术要求。本标准适用于马占相思(AcaciamangiumWilld)、厚荚相思(A.crassicarpaA.CunnexBenth)和黑木相思(A.melanoxylonR.Br.)的组培苗生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB6000主要造
3、林树种苗木质量分级GB/T6001育苗技术规程LY/T1000容器育苗技术LY/T1770桉树无性系组培快繁技术规程LY/T1882林木组织培养育苗技术规程3术语与定义下列术语与定义适用于本文件。3.1叶状柄phyllode相思类树种的羽状复叶退化消失,其叶柄变平、变宽而成的叶片。4设备与操作流程按LY/T1882和LY/T1770执行。5外植体5.1母株采集繁殖材料的母树为经过测定的优树,或经省级以上良种审(认)定的优良繁殖材料。马占相思和厚荚相思宜采集母树的枝条培育嫁接苗作为采集外植体的母株,黑木相思则采集母树1.5cm~2.5cm粗的根段培育
4、根蘖苗作为采集外植体的母株。5.2采集1DB44/T1530—2015宜在5月~10月、连续晴天3d以上时,采集母株半木质化、生长旺盛和无病虫害的枝条作外植体。宜当天采集,当天消毒。若需要长途运输或储藏2d~3d,采集时剪去叶片,并用保湿材料包扎。5.3消毒消毒前用洗洁剂将外植体洗净,并用自来水冲洗15min~20min。在超净工作台中,用75%酒精消毒8s~10s,无菌水冲洗1次。再用已加4滴~5滴吐温-80的0.1%氯化汞溶液浸没材料,轻微摇动,嫩枝段消毒4min~6min,略老的枝段消毒6min~12min,最后用无菌水冲洗3次~4次,每次8
5、min~10min。6丛芽诱导6.1诱导培养基马占相思、黑木相思的丛芽诱导培养基分别参见附录A、附录B,厚荚相思丛芽诱导培养基的激素浓度为6-BA1.5mg/L~2.0mg/L、NAA0.1mg/L~0.3mg/L,其它成分参照马占相思丛芽诱导培养基。6.2接种将消毒后的外植体切成含有1个~2个腋芽的枝段,垂直或略倾斜接种到丛芽诱导培养基上。6.3诱导培养条件适宜温度为24℃~28℃。初期暗培养5d~6d,后转入光培养,光照强度为1500Lx~3000Lx,每天光照10h~12h。其它条件按LY/T1882执行。6.4诱导时间每20d~25d转接外
6、植体1次,共转接与培养3次~5次。当外植体萌发的腋芽形成3个~4个芽组成的芽丛、叶片由叶状柄转变为羽状复叶时,将芽丛整体切离外植体,再转入增殖培养。7增殖培养7.1增殖培养基基本培养基与丛芽诱导培养基相同,将激素浓度按比例下调30%~50%。马占相思、黑木相思的增殖培养基分别参见附录A、附录B,厚荚相思增殖培养基的激素浓度为6-BA1.0mg/L~1.5mg/L、NAA0.1mg/L~0.2mg/L,其它成分参照马占相思增殖培养基。7.2增殖培养条件除初期不需要暗培养外,其它按6.3执行。7.3增殖培养周期马占相思和厚荚相思为30d~40d,黑木相
7、思为25d~35d。转接时将大丛芽切分为3个~4个芽组成的小芽丛。2DB44/T1530—20157.4培养材料更新马占相思和厚荚相思增殖培养超过50代或时间超过4年,黑木相思超过45代或3年,宜采集外植体更新培养材料。8生根培养8.1生根培养基大量元素为1/3MS~1/2MS,微量元素和有机营养成分同MS,蔗糖浓度降为20g/L~25g/L。诱导生根的激素浓度为:马占相思IBA1.0mg/L~2.0mg/L、NAA0.5~1.0mg/L,黑木相思IBA0.5mg/L~1.0mg/L、NAA0.1mg/L~0.3mg/L,厚荚相思IBA0.5mg/
8、L~1.0mg/L。马占相思、黑木相思的生根培养基分别参见附录A、附录B,厚荚相思生根培养基配方除激素浓度外参照马占相思生
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