高三生物总复习第45讲DNA和蛋白质技术名师精选教案.pdf

《高三生物总复习第45讲DNA和蛋白质技术名师精选教案.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯名校名师推荐⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2012高三生物总复习教案第45讲DNA和蛋白质技术教学案【考纲要求】生物技术在其它方面的应用考纲要求具体内容(3)PCR技术的基本操作和应用Ⅱ(4)蛋白质的提取和分离Ⅱ实验内容(3)血红蛋白的提取和分离操作实验与探究能力【考点分析】考点试卷类型题型PCR技术的基本操作和应用2008·江苏·生物非选择题2009·江苏·生物选择题【考点预测】从近几年高考试题看，有关植物的组织培养内容是命题的重点。预测今年高考命题可能会从下面两个方面展开：1．植物组织培养和花

2、药离体培养的原理、方法、操作步骤、注意事项等2．PCR技术的基本操作和应用3．蛋白质的提取和分离原理、过程及其注意事项从近几年新课标改革地区生物试题看，主要考查植物组织堵乔的原埋、近程及影响因素，以非选择题为主。由于近两年考查面的增加，赋分也有所增加的趋势。以07年到08年逐渐增多。命题角度的最大变化应该是以过程图和表格形式等多种表达形式考查学生对知识的掌握程度和识图能力。总体上来说本单元的考查难度较低，且作为选做题出现为主。在复习的过程中，要多加强识记，同时注意实验探究能力的培养。【知识梳理】一、DNA的粗体取与鉴定1、提取DNA的方法2、DNA的

3、鉴定3、设计实验过程二、DNA体外扩增技术1、PCR原理-1-⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯名校名师推荐⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2、PCR的反应过程3、DNA含量的鉴定三、血红蛋白的提取和分离【重点解析】一、DNA的粗提取和鉴定1．DNA的理化性质(1)DNA的溶解性DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。此外，DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些成分如蛋白质等却溶于酒精，利用这一原理，可将DNA与蛋白质等

4、进一步地分离。(2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60℃～80℃的高温，而DNA在80℃以上时才会变性，洗涤剂能够溶解细胞膜，但对DNA没有影响。(3)DNA的热变性DNA分子在细胞内复制或转录时，在解旋酶的作用下使氢键断裂，而在体外，DNA在80℃～l00℃的温度范围内变性，即双螺旋解开，成为单链；当温度慢慢降低后，两条彼此分离的单链又会重新结合形成双链。但高温能使DNA聚合酶变性失活，后来发现了耐高温的TaqDNA聚合酶，解决了上述矛盾。2．基本原理(1)DNA在不同浓度的NaCl溶

5、液中的溶解度不同，在0．14mol／L的NaCl溶液中的溶解度最低，如下表所示由上表可以看出，在NaCl溶液物质的量浓度为2mo1／L时，DNA溶解，部分蛋白质发生-2-⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯名校名师推荐⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯盐析而生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质；在NaCl溶液物质的量浓度为0．14m01／L时，DNA析出．，过滤可除去溶解的部分蛋白质。(2)DNA不溶于酒精溶液——加入体积分数为95％的冷却酒精溶液可使DNA析出，除去溶于酒精的蛋白质。(3)DNA不被蛋白酶所水解——嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，

6、加入嫩肉粉可使蛋白质水解而DNA不被水解。(4)DNA可被二苯胺染成蓝色——向含DNA的试管中加入二苯胺并沸水浴，溶液呈现蓝色可确认DNA。3．方法步骤(1)实验材料的选择①首先选择含有DNA的生物材料。②选用DNA含量相对较高的生物组织，成功率较大。(2)破碎细胞——获取含DNA的滤液①动物细胞如鸡血细胞——在血细胞液中加入蒸馏水，用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。②植物细胞用洗涤剂溶解细胞膜，进行充分搅拌和研磨，过滤后收集滤液。(3)去除滤液中的杂质方案①利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质(用2mo

7、l／I。NaCl溶液过滤除去不溶的杂质，用0．14mol／I。NaCl溶液析出DNA，过滤，除去溶液中的杂质，再用2mol／LNaCl溶液溶解DNA)。方案②在滤液中加入嫩肉粉，利用其蛋白酶水解蛋白质。方案③将滤液放入60℃～75℃恒温水浴箱中保温10～15rain，使蛋白质变性。(4)DNA的析出与鉴定①析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液等体积的冷却酒精溶液(体积分数为95％)静置，溶液中会出现白色丝状物(此即粗提取的DNA)，用玻璃棒沿一个方向搅拌卷起丝状物。②鉴定-3-⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯名校名师推荐⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

8、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯【例1】关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验装置如图(1)实验材料选用鸡血细胞液，而不用